病理组织切片制作技术课件.ppt

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1、兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,实验内容,实验一 病理组织切片制作技术实验二 局部血液循环障碍：充血、 淤血、缺血、梗死、出血 实验三 局部血液循环障碍 血栓、 水肿实验四 组织细胞的变性,兽医病理解剖学实验 实验内容,兽医病理解剖学实验,实验五 组织细胞坏死 实验六 组织细胞病理性物质沉着 及组织修复 实验七 炎症实验八 肿瘤,实验内容,兽医病理解剖学实验实验五 组织细胞坏死 实验内,兽医病理解剖学实验,实验九 心脏血管系统病理实验十 呼吸系统病理实验十一 消化系统病理实验十二 泌尿系统病理实验十三 中枢神经系统病理,实验内容,兽医病理解剖学实验 实验内容,兽医病

2、理解剖学实验,前言,兽医病理解剖学实验部分在本课程教学中占有特殊地位。学生通过观察肉眼和切片标本印证课堂所讲的理论，加强理解，取得感性知识的教学环节。在学习过程中，要求同学初步掌握观察和描述器官组织病变的方法和认识病变。,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,大家有疑问的，可以询问和交流,可以互相讨论下，但要小声点,大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,实验一,病理组织切片制作技术,兽医病理解剖学实验实验一 病理组织切片,兽医病理解剖学实验,目的要求：,1、重点掌握病理组织切片的基本制作过程步骤

3、。2、了解病理组织切片制作过程中的注意事项。,兽医病理解剖学实验目的要求：,兽医病理解剖学实验,实验内容,掌握组织材料的取材、固定、脱水、透明、包埋、切片、烤片、脱蜡、染色及封固的基本操作。,兽医病理解剖学实验实验内容,兽医病理解剖学实验,一、取材及固定,（一）取材注意事项： 1、材料新鲜 2、组织块力求小而薄 3、勿使组织块受挤压 4、尽量保持组织的原有形态 5、熟悉取材部位,兽医病理解剖学实验一、取材及固定（一）取材注意事项：,兽医病理解剖学实验,（一）取材注意事项：,6、选好组织块的切面 7、保持材料的清洁 8、切除不需要的部位,兽医病理解剖学实验（一）取材注意事项： 6、选好组织块的切

4、,兽医病理解剖学实验,（二）固定及目的：,应用化学试剂使组织或细胞中的无机成分和有机成分凝固或沉淀，以保持其生活状态的过程称为固定。,兽医病理解剖学实验（二）固定及目的：,兽医病理解剖学实验,固定液是10%福尔马林溶液（4%甲醛溶液），固定24小时以上。,兽医病理解剖学实验 固定液是10%福尔,兽医病理解剖学实验,固定的目的,1、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止自溶与腐败，使之尽量保持生前的状态与结构。2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持其原有状态。3、使组织内各种物质成分产生不同的折光率，以便染色后易于鉴别和观察。4、使组织块硬化，便于制作薄片。,兽医病理解剖学实

5、验 固定的目的,兽医病理解剖学实验,固定的注意事项,1、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽也应小于1515mm。2、固定液与组织块的比例应大于10：1。3、软组织或较大组织块可先经2-3小时固定后再修整成小块，重新投入新配制的固定液中继续固定。4、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防固定组织变形。,兽医病理解剖学实验固定的注意事项1、组织块不宜大，厚度小于5,兽医病理解剖学实验,二、固定后处理及切片,(一)、洗涤与修切(二)、脱水与透明 脱水：将组织块内水分置换的过程。 透明：乙醇和石蜡不互溶，最常用的透明剂是二甲苯。既能溶于脱水剂又能溶于包埋剂（石蜡），透明必须适度 。,兽医病理解剖学实验 二、

6、固定后处理及切片(一),兽医病理解剖学实验,50%乙醇: 30-60min70%乙醇: 1-2小时或过夜80%乙醇: 1-2小时95%乙醇: 1-1.5小时100%乙醇: 30min100%乙醇: 20min1：1无水乙醇：二甲苯: 20min二甲苯: 10-30min,兽医病理解剖学实验50%乙醇: 30-60min,兽医病理解剖学实验,生物组织脱水机,兽医病理解剖学实验生物组织脱水机,兽医病理解剖学实验,(三)、浸蜡与包埋,52-58石蜡，浸蜡的全过程在60的温箱中进行。 1：1二甲苯：石蜡: 30min 石蜡: 30min 石蜡: 30min 石蜡: 30min,兽医病理解剖学实验(三)

7、、浸蜡与包埋,兽医病理解剖学实验,组织包埋机,兽医病理解剖学实验组织包埋机,兽医病理解剖学实验,（四）切片、粘片,1、切片前处理及切片2、载玻片处理3、粘片（展片）4、烤片,兽医病理解剖学实验（四）切片、粘片1、切片前处理及切片,兽医病理解剖学实验,轮转式组织切片机,兽医病理解剖学实验轮转式组织切片机,兽医病理解剖学实验,三、脱蜡和染色,（一）、脱蜡1、二甲苯: 5-10min2、二甲苯: 5-10min3、1：1二甲苯：乙醇（冬20min）: 5min4、无水乙醇、95%、80%、70% 、50%梯度乙醇每级1-2min5、蒸馏水1-2min,兽医病理解剖学实验三、脱蜡和染色（一）、脱蜡,兽

8、医病理解剖学实验,（二）、染色（HE染色法）,1、苏木素染液: 515min2、蒸馏水（洗去多余的染液）: 30s3、分色:1%盐酸-70 %乙醇分色: 1-30s4、蓝化:自来水冲洗（碱化，核蓝色）: 15-20min5、蒸馏水（洗去多余的碱） : 1-2min,兽医病理解剖学实验（二）、染色（HE染色法）1、苏木素染液:,兽医病理解剖学实验,6、逐级入50%、70%、85%乙醇，: 每级1-2min 7、伊红- 95%乙醇染液: 15s2min8 、95%、无水乙醇、无水乙醇逐级 脱水，每级1-2min9、1：1无水乙醇：二甲苯 : 5min10、二甲苯 ：5min11、二甲苯 ：5min,兽医病理解剖学实验6、逐级入50%、70%、85%乙醇，:,兽医病理解剖学实验,组织切片染色机,兽医病理解剖学实验组织切片染色机,兽医病理解剖学实验,四、封固,滴加中性树胶，加盖玻片封片。,兽医病理解剖学实验四、封固 滴加中性,兽医病理解剖学实验,五、光镜观察,兽医病理解剖学实验 五、光镜观察,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,兽医病理解剖学实验,