病毒的感染免疫诊断课件.ppt

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1、,第26章 病毒的感染与免疫,病毒的感染免疫诊断,第26章 病毒的感染与免疫病毒的感染免疫诊断,第一节病毒的感染与类型,病毒的传染源、传播方式与感染途径,传染源人-感染者（病人），隐性和慢性感染者动物-发病动物、带病毒动物,病毒的感染免疫诊断,第一节病毒的感染与类型病毒的传染源、传播方式与感染途径传染源,病毒感染途径,病毒的感染免疫诊断,病毒感染途径1、水平传播： 病毒在人群不同个体间的传播, 2、垂直传播 vertical transmission （其他微生物种少见）,通过宫内、胎盘或产道，病毒直接由亲代传给子代的方式HBV、 HCMV、 HIV、风疹病毒,病毒的感染免疫诊断, 2、垂直传

2、播 vertical transmissio,病毒的感染免疫诊断,病毒的感染免疫诊断,二、病毒的感染类型,病毒的感染免疫诊断,二、病毒的感染类型细杀细胞感染（cytocidal inf,急性感染acute infection：发病急，病程短，恢复快,显性感染,整体,向外播散病毒，重要的传染源 机体获得特异性免疫,持续性感染(Persistent infection),病毒感染与肿瘤,病毒与畸胎,人类肿瘤中有15%由病毒而诱发。,如感染了风疹病毒和 CMV、HSV、VZV可造成发育异常及畸形。,病毒感染的临床类型,隐性感染(subclinical infection),病毒的感染免疫诊断,急性感

3、染acute infection：发病急，病程短，恢复,潜伏感染Latent infection,慢发病毒感染Slow viral infection,寻常病毒,非寻常病毒,麻疹病毒 (SSPE)、HIV,持续性感染,慢性感染Chronic infection,病毒可持续存在血液或组织中并不断排出体外，可出现症状，也可无症状。病程可长达数年或数十年之久。病毒可检出，长期感染、长期排毒如HBV,经显性或隐性后，病毒基因存在一定的组织或细胞中，不产生有感染性的病毒体，在某些条件下可被反复激活而急性发作，病毒长期存在，时隐时现，如 HSV、VZV,病毒感染后出现很长时间潜伏期，数年或数十年后可发生慢

4、性、进行性疾病，常导致死亡，如儿童期感染麻疹病毒恢复后，经过十余年可发生亚急性硬化性全脑炎（SSPE）,病毒的感染免疫诊断,潜伏感染慢发病毒感染 寻常病毒,持续性病毒感染机制,机体免疫力低下；病毒抗原性弱；病毒存在于受保护部位；病毒发生变异；病毒基因组整合；,病毒的感染免疫诊断,持续性病毒感染机制 机体免疫力低下；病毒的感染免疫诊断,病毒感染的的致病机制,1、阻止细胞大分子合成2、改变细胞膜结构3、诱导细胞凋亡或坏死4、干扰细胞因子的活性5、病毒包涵体的形成6、染色体畸变7、免疫病理损伤,病毒的感染免疫诊断,病毒感染的的致病机制1、阻止细胞大分子合成病毒的感染免疫诊断,病毒的致病及机制,一、病

5、毒感染对宿主细胞的致病作用,1 溶细胞性感染：多见于无包膜病毒 ，多引起急性感染 2 稳定状态感染：多见于有包膜病毒3 细胞凋亡：细胞自身基因指令的生物学过程 4 病毒基因组的整合：多见于肿瘤病毒5 细胞的增殖与转化：促进细胞DNA的合成6 包涵体的形成：细胞被病毒感染后，在细胞浆或细胞核内出现光镜下可见的斑块状结构，称为包涵体,病毒的感染免疫诊断,病毒的致病及机制一、病毒感染对宿主细胞的致病作用 1,Fig 正常猴肾细胞与HSV感染的猴肾细胞,Fig A multinucleate giant cell,病毒的感染免疫诊断,Fig 正常猴肾细胞与HSV感染的猴肾细胞Fig A m,2、对机体

6、的致病作用： 病毒对组织器官的亲嗜性与组织器官的损伤： 免疫病理损伤：体液免疫病理作用和细胞免疫病理作用,病毒的感染免疫诊断,2、对机体的致病作用：病毒的感染免疫诊断,二、病毒感染对机体的致病作用,（一）对组织器官的亲嗜性与组织器官的损伤,病毒性感染具有宿主种属特异性和组织嗜性：组织和器官亲嗜性决定了感染的定位及疾病的症状病毒亲嗜性的基础： 由病毒、细胞受体决定病毒亲嗜性的作用： 造成了病毒对特定组织器官的损伤，也是形成临床上不同系统疾病的原因。,病毒的感染免疫诊断,二、病毒感染对机体的致病作用（一）对组织器官的亲嗜性与组织器,（三 ） 病毒对免疫系统的致病作用,病毒感染引起免疫抑制麻疹病毒等

7、病毒对免疫活性细胞的杀伤HIV病毒感染引起自身免疫病,1、体液免疫的病理作用（III型变态反应）2、细胞免疫的病理作用（CTL 、共同抗原） 早期全身症状 晚期局部损伤和炎症,（二）免疫病理损伤,病毒的感染免疫诊断,（三 ） 病毒对免疫系统的致病作用病毒感染引起免疫抑制麻,抗病毒免疫,1、屏障作用,2、巨噬细胞、NK、DC的作用,3、 干扰素获得性非特异性免疫,一、固有免疫,病毒的感染免疫诊断,抗病毒免疫1、屏障作用2、巨噬细胞、NK、DC的作用3、,干扰素,定 义：,由病毒或其他干扰素生剂刺激机体细胞所产生的一种具有抗病毒等作用的糖蛋白,种 类：,种类产生细胞 抗病毒 抗肿瘤 免疫调节 人白

8、细胞 强 弱 弱 人成纤维细胞 强 弱 弱 T细胞 弱 强 强,病毒的感染免疫诊断,干扰素定 义：由病毒或其他干扰素生剂刺激机体细胞所产生的一,抗病毒意义：,抗病毒特点,种的特异性、间接性、广谱性,抗病毒机理：,细胞受干扰素作用后，合成抗病毒蛋白,蛋白激酶、2-5合成酶、磷酸二酯,早期中断病毒复制，阻止病毒扩散,病毒的感染免疫诊断,抗病毒意义： 抗病毒特点种的,二、适应性免疫,按种类：IgG IgM IgA,中和抗体,体液免疫：,按功能：,中和抗体、,补体结合抗体、,血凝抑制抗体,能与病毒结合并使之丧失感染力的抗体一般为病毒表面抗原刺激产生,抗体的分子量大，不能进入病毒感染的细胞，清除胞内病毒

9、，故一般无根治感染的作用,病毒的感染免疫诊断,二、适应性免疫按种类：IgG IgM IgA 中和,血凝抑制抗体病毒血凝素刺激机体产生，可抑制血凝现象的抗体与病毒结合后使之丧失感染力，故也为中和抗体,非中和抗体由与病毒入侵易感细胞不相关的病毒抗原诱导的无中和作用的抗体，称非中和抗体多为病毒内部抗原刺激产生由于非中和抗体可通过补体结合反应而检测，故又称补体结合抗体，有时具有诊断价值,病毒的感染免疫诊断,血凝抑制抗体非中和抗体病毒的感染免疫诊断,细胞免疫：,抗病毒免疫的主要成分,TH、TC 、NK,CD8+T细胞：产杀伤病毒感染细胞CD4+T细胞：生淋巴因子 引起炎症反应 促进抗体产生,病毒的感染免

10、疫诊断,细胞免疫：抗病毒免疫的主要成分 TH、TC 、NKCD8+T,第27章 病毒感染的诊断,病毒的感染免疫诊断,第27章 病毒感染的诊断病毒的感染免疫诊断,一、病毒的分离、培养 形态学二、检测病毒抗原及抗体方法三、检测病毒核酸的方法,病毒感染的实验室诊断,病毒的感染免疫诊断,一、病毒的分离、培养 形态学二、检测,1、标本采集与送检： 原则：早、快、冷、防,病毒的感染免疫诊断,1、标本采集与送检：用于分离培养的标本：采取急性期、防止病毒,2、常规分离与鉴定,动物接种,鸡胚接种,组织培养,器官培养,移植培养,细胞培养,原代细胞培养,传代细胞培养,三大培养方法,病毒的感染免疫诊断,2、常规分离与

11、鉴定动物接种鸡胚接种组织培养器官培养移植培养,生长指征 1）动物：出现症状 2）鸡胚：出现痘斑等 3）细胞：出现致细胞病变作用（cytopathic effect，CPE），如细胞皱缩、空斑、融合、坏死等,病毒的感染免疫诊断,生长指征病毒的感染免疫诊断,致细胞病变作用 病毒在细胞内增殖，可引起不同的结果，有的细胞完全被破坏，有的只有轻微的病变，或无可见的变化，由病毒引起的细胞病变称CPE 病毒感染引起的，光镜下可见受感染细胞的形态学改变,病毒的感染免疫诊断,致细胞病变作用病毒的感染免疫诊断,病毒在细胞内增殖的指标,1、CPE,2、红细胞吸附,正常细胞,病变细胞,病毒的感染免疫诊断,病毒在细胞内

12、增殖的指标1、CPE2、红细胞吸附正常细胞病变细,病毒数量和感染性测定, 1、蚀斑测定 plaque assay,2、ID50 或 TCID50,病毒感染鸡胚动物或细胞后，引起 50% 发生死亡或病变的最小量,病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位来表示,病毒的感染免疫诊断,病毒数量和感染性测定 1、蚀斑测定 plaque assa,病毒的快速诊断,光镜-包涵体,电镜,免疫荧光,ELISA,分子生物学技术,杂交,Southern blot,PCR,Northern blot,病毒的感染免疫诊断,病毒的快速诊断光镜-包涵体电镜免疫荧光ELISA分子,病毒的血清学诊断（检测病毒抗体）,中和试验,补体结合试验,血凝抑制试验,免疫扩散等,病毒的感染免疫诊断,病毒的血清学诊断（检测病毒抗体）中和试验补体结合试验血凝抑制,本章要点,掌握病毒的感染途径病毒感染的类型：整合感染、慢性感染、潜伏感染和慢病感染的概念病毒的致病机制病毒标本采集和送检原则，CPE和PFU的概念熟悉干扰素的类型和抗病毒作用抗病毒的适应性免疫病毒感染的检查方法原则（病毒分离与鉴定及血清学诊断）；细胞培养的概念及意义,病毒的感染免疫诊断,本章要点掌握病毒的感染免疫诊断,