临床医学检验红细胞的检查以及临床意义PPT课件.ppt
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1、红细胞检查,红细胞(red blood cell, RBC; erythrocyte),血液中数量最多的有形成分主要成分:血红蛋白主要功能:呼吸载体直径:6.7 9.5 um,平均7.2 um形状:双凹圆盘状,2,RBC,3,4,5,6,红细胞的生成,Stem cell Epo原始红细胞早幼红细胞 中幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞 成熟红细胞释放入血,72h,48h,平均寿命120 d,7,红细胞计数(red blood cell count,RBC),定义:单位体积(每升)血液内的红细胞数量原理:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池,于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数,并换算得每升血液
2、中红细胞数(/L),8,红细胞稀释液,稀释液:保护计数细胞,破坏非计数细胞,同时抗 凝,要求不含杂质红细胞稀释液:Hayem液,由氯化钠、结晶硫酸钠、 氯化高汞组成作用: 氯化钠调节渗透压,结晶硫酸钠防止细胞 粘连,氯化高汞防腐,9,计数方法,手工法 :取样 稀释 计数 计算 仪器法 :电阻抗分析或激光分析,10,手工法,10 uL末梢血+2 ml稀释液 混匀稀释 充池 计数 计算,11,成年男性(4.0 - 5.5)1012/L成年女性(3.5 - 5.0)1012/L初生儿 (6.0 - 7.0)1012/L,外周血红细胞参考值,12,思 考,手工法VS仪器法?,13,血红蛋白测定,( h
3、emoglobin,Hb),14,血红蛋白的组成,珠蛋白(globin)(4条肽链),亚铁血红素(heme)(1个),血红蛋白,15,珠蛋白具有种属特异性,含有两条链和两条非链 正常成人的Hb包括: HbA 22 (90%以上) HbA2 22 (2 3%) HbF 22 (2%以下;新生儿占70%),16,受激素调节 红细胞生成素:直接 雄激素:直接和间接 自身调节 血红素过多 氧化为高铁血红素,负反馈,血红蛋白的合成,17,血红蛋白的代谢,珠蛋白 氨基酸血红素 胆色素(胆绿素、胆红素、 胆素原及胆素),血红蛋白,18,还原血红蛋白(reduced hemoglobin,Hbred)氧合血红
4、蛋白(oxyhemoglobin,HbO2)高铁血红蛋白(hemiglobin,Hi)碳氧血红蛋白(HbCO)硫化血红蛋白(SHb),血红蛋白的种类,19,血红蛋白的测定,定义 指单位体积血液中所含血红蛋白的量参考值 成年男性: 120-160g/L 成年女性: 110-150g/L 初生儿: 170-200g/L,20,Hb测定方法,分光光度计比色 氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)(国际标准参考方法) 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS-Hb)(次选方法) 叠氮高铁血红蛋白测定法(HiN3) 碱羟血红蛋白测定法(AHD575)目视比色 沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪法、光谱分析法
5、仪器法,21,氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN),为国际标准参考方法步骤: 取样 加转化液(溶血、转化) 比色,22,原理: 血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,再与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白,通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。,23,方法:,计算:有三种方法求得Hb浓度 1. A367.7 2. 得A值后,在标准曲线上直接查找 3. AK KHb / A,转化液 5ml + 血 20ul(5min),比色读吸光度(A)(540nm),24,标准曲线的绘制,用一组已知浓度的HiCN参考液,在分光光度计上分别测定A值,以A为纵
6、座标,血红蛋白参考值为横座标,绘制标准曲线。 例如:HiCN参考品 Hb g/L: 50 100 150 200 A : 0.14 0.27 0.41 0.54 如果标本A为0.32,则标本Hb = 0.32370.37 = 118.52(g/L),KHb / A = 370.37,25,优点操作简单呈色快且稳定除SHb外均可检测根据吸光度直接定值,方法学评价,缺点KCN有剧毒HbCO转化较慢高WBC和高球蛋白血症可致溶液浑浊,26,红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义,27,生理变化,年龄与性别新生儿:RBC高,两周后下降,6-7岁最低男性:25-30岁高峰女性:13岁-15岁达高值,21岁-
7、35岁低水平,以后渐渐增高,28,精神因素 肾上腺素 RBC剧烈体力劳动或运动 相对缺氧 Epo RBC气压降低 缺氧 代偿性RBC妊娠中后期 血液稀释 RBC老年人 造血功能减退 RBC,29,病理变化,红细胞和血红蛋白增多相对增多:血浆中水分丢失,血液浓缩所致,如呕吐、 腹泻绝对增多: 原发性 真性红细胞增多 继发性 低氧血症 Epo (如心血管病、肺 疾病、异常血红蛋白病) 肾上腺皮质功能亢进,30,红细胞生成素代偿性增加,生理性: 新生儿 高原居民病理性:严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病红细胞生成素非代偿性增加:某些肿瘤或肾脏疾患,31,32,红细胞和血红蛋白量减少,主要见于贫血:由
8、于各种原因引起的全身血循环中红细胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少,低于该地区、该年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。,贫血病因,生成减少破坏过多失血过多,33,1)骨髓造血功能减退 药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移2)造血原料不足 缺铁(缺铁性贫血)、缺乏VitB12或叶酸(巨幼细胞性贫血)3)红细胞破坏增加 溶血性贫血(输血不合、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症)4)红细胞丢失过多 各种原因的失血(如消化性溃疡、痔疮、钩虫病),34,35,注意问题,Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数在某些病理情况下,Hb和RBC的浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量,如:急性失血、
9、水潴留、失水等 发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时,RBC计数与Hb浓度不成比例,36,红细胞形态检查,37,红细胞形态观察,大小及均匀程度 红细胞形状 血红蛋白含量 细胞内结构,38,红细胞大小改变,直径 例如小红细胞 10um 巨幼细胞贫血巨红细胞 15um 巨幼细胞贫血 大小不均 增生性贫血,39,A,C,B,A: normalB: megalocyteC: anisocytosis,40,红细胞形状改变,球形红细胞 遗传性或获得性椭圆形红细胞 遗传性靶形红细胞 珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病口形红细胞 遗传性镰形红细胞 异常血红蛋白S(HbS)棘形红细胞 遗传性或获得性-脂蛋白缺乏症新
10、月形红细胞 阵发性睡眠性血红蛋白尿症泪滴形红细胞 贫血、骨髓纤维化症缗钱状形成 纤维蛋白原和球蛋白增高裂红细胞 DIC、微血管病性溶血性贫血红细胞形态不整 巨幼细胞性贫血,41,spherocyte,42,Elliptocyte,43,人为假椭圆红细胞,44,Target cell,45,stomatocyte,46,Sickle cell,47,镰形红细胞,48,acanthocyte,49,50,meniscocyte,51,Tear drop cell,52,Rouleaux formation,53,schistocyte,54,poikilocytosis,55,血红蛋白含量改变,正
11、常色素性 急性失血、再障、白血病低色素性 缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血高色素性 巨幼细胞性贫血嗜多色性 溶血性或急性失血性贫血细胞着色不一 铁粒幼红细胞性贫血,56,normochromic,hypochromic,hyperchromic,polychromatic,57,人为面包圈红细胞,58,铁粒幼红细胞性贫血,59,细胞内的异常结构, 嗜碱性点彩红细胞:RNA, 铅中毒 染色质小体(豪焦小体):核残余物,巨幼细胞贫血、 脾切除后 卡波环:脂蛋白变性,巨幼细胞贫血、铅中毒 寄生虫:疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫 有核红细胞: 溶血性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移 性肿瘤、慢性骨髓增生
12、性疾病、脾切除后,60,Basophilic stippling cell,61,Howell Jollys body,62,Cabot ring,63,疟原虫(malarial parasite),64,有核红细胞,65,66,红细胞的各种改变,67,红细胞比容测定(Hematocrit,HCT),定义: 抗凝血在一定条件下离心沉淀,求出单位体积血液中红细胞占的体积百分比(L/L)。 与红细胞数量以及红细胞大小有关,68,温氏法(常量,中速离心) 微量法首选常规方法 放射性核素法参考方法 折射计法、黏度法、比重法、电阻抗法(仪器),测定方法,69,参 考 值,温氏法:男性0.4 0.54 女
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