API系列 基础理论ppt课件.pptx

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1、ABSCIEX TripleQuad 系列液相色谱质谱联用系统基础理论,ABSCIEX 亚太区技术支持中心,液相色谱串联质谱系统基本结构,三重四极杆/串联线性离子阱质谱仪,液相色谱,信号液流,质谱基本结构示意图,样品引入,一些质量的基本概念：质荷比,维拉帕米：C27H38N2O4,电离,质谱图,一些质量的基本概念：母子离子对,母离子：带上电荷（H+）后没有碎裂的完整化合物,m/z:331.0441,m/z:654.2286,m/z:354.2023,子离子：由带电母离子碎裂后产生的碎片离子,液相色谱串联质谱系统基本理论体系,液相色谱原理质谱离子化接口原理质量分析器工作原理检测器原理,ULTRA

2、 LC100液相色谱仪,托盘,色谱柱恒温箱,泵A,泵B,自动进样器,液相色谱：实现进样及初步分离,溶液1,溶液2,化合物A、B、C,质谱,串联四级杆质谱示意图,常见液相色谱串联质谱系统离子源,电喷雾电离（ESI）大气压化学电离（APCI）,离子喷雾电压(IS),液流,Orifice (DP),气帘气(CUR),Gas 2 (GS2)加热温度（TEM),Gas 1 (GS1),气帘挡板,液滴,感兴趣的离子,溶剂分子,ESI电喷雾离子化原理以正离子模式为例,APCI大气压化学离子化原理以正离子模式为例,Orifice (DP),气帘气(CUR),气帘挡板,放电电流(NC),液流,Gas 1 (GS

3、1),1. 液体分子转变为气体分子,2. 放电使源内O2或N2分子电离,3. O2或N2离子将电荷转移给溶剂分子,4. 溶剂离子将电荷转移给目标分子,5. 目标离子进入质量分析器,O2或N2分子,溶剂分子,目标分子,热喷雾器（TEM),离子源的选择基于目标化合物属性,Turbo V离子源结构,离子源互换ESI和APCI,一个不用使用工具，只要换探针就可以切换ESI和APCI 的离子源用手或螺丝起子就可调节的电晕针 电晕针一直在离子源中,1,2,3,Turbo V离子源推荐参数TurboIonSpray（ESI）部分,*不同扫描方式可能不同,Turbo V离子源推荐参数Heated Nebuli

4、zer（APCI）部分,*不同扫描方式可能不同,Turbo V离子源使用中应避免的事,盐干扰离子化并成簇，使质谱图变得复杂 强碱或季铵如三乙胺，在正离子模式下引起信号抑制 强酸如磺酸、硫酸和三氟乙酸 可能在负离子模式下引起信号抑制 难挥发性添加剂或缓冲液如磷酸盐导致加合物的产生，且污染离子源 难挥发离对子试剂如十二烷基硫酸钠（SDS)引起严重的离子抑制，且污染离子源,串联四级杆质谱-离子传输,离子传输部分结构,离子产生后，通过Orifice和Curtain Plate 之间的DP电压捕获化合物经过Qjet聚焦后进入Q0传输,Curtain Plate,Orifice Plate,QJet,Q0

5、,气帘气：Curtain Gas,气帘气,作用阻挡杂质，抗污染,DP:去簇电压簇离子形成的原理,形成离子源（常压）和离子传输单元（数个mTorr）间的真空度差异，导致离子流发生超音速膨胀离子流的膨胀致冷凝冷凝过程中，离子吸附溶剂分子（P）形成一系列簇离子,离子源,离子流超音速膨胀,M+nH z,M+xP+nH z =?,x=1,2,3,DP:去簇电压,Declustering Potential （DP）去簇电压,Orifice Plate,利用DP电压，给予离子一定共振能量，阻止溶剂分子的吸附，实现去簇。当DP过大时，离子因共振而碎裂，导致源内裂解（CID）。,串联四级杆质谱-质量分析器,四

6、极杆质量分析器-基本工作原理,通过电场（RFROFFDC）的改变来传输和选择离子,180 phase shift,= 离子,RF,RF,180 phase shift,轴向视角,四极杆质量分析器原理-RF电压,离子随着RF电压的相位变化，围绕中心轴做圆周振荡,四极杆质量分析器原理-ROF电压,ROF电压使离子前进,ROF,四极杆质量分析器原理-FDC电压,FDC的依次变化，形成电场扫描线这使得四级杆选择并允许不同质荷比的离子依次通过电场区域，即形成“离子扫描”的工作模式FDC电压的微调，使得电场扫描线的斜率有着细微的变化，即对应了不同的分辨率,选择离子模式：四级杆上加载三组电场RF 射频电场（

7、聚焦离子），通过固定频率的振荡电压，为离子提供稳定的飞行轨迹；Rod Offset Voltage（ROF）轴向补偿电压，通过较低的直流电压，为离子提供轴向飞行的能量；Filtering DC（FDC或 U） 过滤直流电场（选择离子），通过家在于两对电极杆上的特定直流电压（随RF改变方向）选择离子，并帮助调整分辨率；全通过模式：没有FDC，仅有RF和ROF；四级杆以“全通过模式”工作，不再选择离子；,四极杆质量分析器原理-两种传输模式,三重四级杆工作模式-单级四级杆的扫描模式,选择离子监测 （SIM）,Q1选择一段质荷比范围的离子通过，Q2、Q3全通过,Q1选择一个特定质荷比的离子通过，Q2、

8、Q3全通过,Q1 Q2 Q3,三重四极杆工作模式-三重四极杆扫描模式,MRM：最主要的工作模式，用于定量分析，Q1选择一个特定化合物，Q2碎裂化合物，Q3选择其中一个离子碎片监测；一般每个化合物做2个MRM,MS2：定性分析，Q1选择一个特定化合物，Q2碎裂化合物，Q3全通过，获得所有碎片信息,碎裂,碎裂,三重四极杆工作模式-其他的扫描模式,NL：定向分析，Q1和Q3之间设定一个特定的质量差，Q2碎裂化合物；只有具有设定质量差的中性丢失化合物才能产生信号,Prec：定向分析，Q1从低到高依次通过全部化合物，Q2依次碎裂化合物,Q3只选择特定质荷比的碎片通过；只有能产生特定质量的碎片的化合物才能产生信号,碎裂,三重四极杆质谱的定量工作模式-MRM,碰撞气,母离子,子离子,Q1 质量过滤器,Q2碰撞反应室（池）,Q3 质量过滤器,串联四级杆质谱-检测器,检测器-电子倍增器,数字信号导出，获得图谱,离子流,脉冲信号输出,三重四级杆质谱仪原理的动画演示,动画一原理动画1.wmv动画二原理动画2.avi,典型的进样方式针泵恒流进样,典型的进样方式色谱柱上进样,典型的进样方式三通进样,典型的进样方式流动注射无色谱柱进样（FIA）,谢谢！,