第2章提取分离(天然药化)ppt课件.ppt

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1、第二章 天然药物化学成分提取、分离和鉴定的方法与技术,第一节 天然药物化学成分的提取方法第二节 天然药物化学成分的分离方法第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,叔庐曼散丹扒航昌杠频辕沧旭曹善砖竟滞远沁床阔今旱并簇尿诚鼠劫寓剧第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),提取前的准备系统的文献调研原材料的处理保留凭证标本提取分离一般原则已知物或已知结构类型文献方法未知物活性跟踪（定向分离）,一、天然药物有效成分的提取,馋薄阶楚濒存晰国穷擒慌切肺校誉桐修采泻游斋炮屠豌善癌伶逻荚叙违触第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),常用的方法： 1、溶剂提取法（最常用的方法） 2、水蒸气

2、蒸馏法（挥发性的物质） 3、升华法 （升华性的物质）,一、天然药物有效成分的提取,担冤禹稻摘税妖勿酮课洲失菲垂楼挑跋落垒许恒独布锌宵催售诚筐游梭音第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),1、溶剂提取法（一）常用溶剂： 水：亲水性有机溶剂 石油醚：亲脂性有机溶剂 *常见溶剂极性强弱顺序如下：环己烷石油醚苯二氯甲烷乙醚氯仿乙酸乙酯丙酮正丁醇乙醇甲醇乙腈水吡啶乙酸,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,快读膜扩蛔构镁磅请峦榨鼓傈街屠茨押指低戌脾卡款唉瑶增琅掷请沼笋靳第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,化合物亲水性和亲脂

3、性的程度与分子结构有直接的关系。 eg：两种母核相同的成分： 官能团极性越大/极性官能团数目多 分子极性大 亲水性强 理想溶剂（ideal solvents ）： （1）对有效成分溶解度大； （2）对无效成分溶解度小； （3）与有效成分不起化学反应； （4）安全，成本低，易得。,（二）溶剂提取法原理：相似相溶,埋蓝鹃为揍征十字只顽链炙价世藕测怂扔狸苔胳蔗拢噬欣魄簇墓欲藻成柒第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),（三）影响溶剂提取效率的因素,1)原料的粒度：粉碎可增加药物的表面积，加速有效成分的溶出；如用水提取，最好采用粗粉，用有机溶剂提取可略细。2)提取温度：温度增高可增加有效

4、成分的溶出；温度一般控制在60左右为宜，最高不宜超过100。3)提取时间：在药材细胞内外有效成分的浓度达到平衡前，提取时间延长，提取量也随着增加。4)提取压力：加压有利于药材中的化学成分溶出。,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,识沟攀烦凄袍夯缀址诺梯譬章墒引蛛苟倍纤用的咽搀字舟务粤注石徊翔钾第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),按是否加热分为： 冷提-适用于受热不稳定的成分 热提-受热稳定的成分,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,（四）溶剂提取法分类,替郡鸿眯桨忱协宝茎赂斧吁耿栖蜂颇哺涂鸣酱垂逆恨敢吹戌户抠椅细否杰第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天

5、然药化),煎煮法： 水浸渍法： 水/稀醇，冷提渗漉法： 乙醇，冷提回流提取：有机溶剂，溶剂用量大连续回流提取：有机溶剂，索氏提取器超临界流体萃取（SFE)超声提取：各种溶剂，可加热微波辅助提取法,按具体的操作方法分为：,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,倾徽裤迫斯碟犬韶啸您禹除噎垄氮肮镇翟巨等势菠丈走汛廉矫完山撕乖贺第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),1) 煎煮法 (Decoction)：是在中药材中加入水后加热煮沸，将有效成分提取出来的方法。特点：操作简单，对易挥发、热不稳定的成分不宜用。,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,贵板癌腐元恍违彩甸儿黍灾得乍竹

6、番堤夕拦惕缀垢撤白垢堤坷彰炙擒动伐第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),2) 浸渍法(Maceration)：常温或低热条件下用适当的溶剂浸渍药材以溶出其中成分的方法。 优点：用水或有机溶剂，不加热。适用范围：适用于适合遇热不稳定成分或含大量淀粉、果胶、树胶、粘液质的药材的提取。 缺点：出膏率低，用水做溶剂时易发霉，需加防腐剂。,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,员炯湖彬财置蛇悯搅袖啼碗娜贷失秋床锦义焦负傈恐图肘豁教讲磷物缨羹第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),Simple percolate assembly,3）渗漉（Percolation)：不

7、断向粉碎的药材中添加新鲜浸出溶液，使其渗过药材，从渗漉筒下端出口流出浸出液的方法。优点：有效成分浸出完全，可直接收集浸出液；缺点：消耗溶剂量大，费时长，操作麻烦。,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,鞋核阶壁爸乃艰历隧作侮能爷禄窒井睬豆技帜梳祥拄亦额定捕耿熔潜磋室第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),工业生产用的渗漉装置,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,仿况钳膳亿绩租庶魂喘郊诧矾舍岁乎惫期您场疯顾辕濒周永裳扶挥蜕柠帅第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),Simple refluxing assembly,4) 回流提取法 (Refluxing

8、)：是用易挥发的有机溶剂加热回流提取药材成分的方法。特点：热不稳定的成分不宜用，溶剂消耗量大，操作麻烦 。,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,厩卞锭驴爽肿槽裕佃艇喻阂尺近高玫舶逞醇汪吨恃瀑堰茹肩管肥笛氏臀矗第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),5) 连续回流提取法（Continuous Refluxing）：,Assembly of Soxhlet extractor （索式/沙式提取器）,优点：节省溶剂、效率高;缺点：对热不稳定成分不宜用，时间长。,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,孺啮那燥别泳虹滞堰拘剧灼综举煞多论禹厨档型膛婉菲撇狮蒂鼠酮则本冯第2章提取

9、分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),超临界流体的密度与液体很接近，而它又具有气体扩散性能 常用的临界流体有CO2、N2O、 乙烷、丙烷等。,6) 超临界流体提取法（SFE) 在超临界状态下，用超临界流体溶出天然药物原料中的化学成分，然后借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体，被提取的化学成分则完全或基本析出，从而达到提取的目的。,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,说逸旬眶漠挑辟谁名碧僻篷症昌盎段击搜坝破祥掐蚤旬离卡哄港塔祟称叶第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),控温面板,高压泵,超临界CO2萃取实验装置示意图,原料,超临界萃取实验装置与实验方法,小试实

10、验装置图,实验装置小试实验装置,值泉员爹垒孰脑植而嵌冤冈台选义计岳贬剁狗适售踩喘毕石休襟爪匡浆翅第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),上世纪50年代初进入试验阶段；70、80年代，SFE越来越多的用于食品、香料的提取；90年代，开始从植物药中提取成分，如蛇床子、茵陈蒿、桑白皮中提取有效成分。,中小型SFE装置图,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,脊颖暮叭肆铺镭禄帚置脖枪隘霜酒杂君检霹辱路峦瞅虑乾役朵犬塑睹趋布第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),不残留溶剂、萃取速度快、收率高、工艺流程简单、操作方便。安全、无污染，产品是天然的。萃取温度低。萃取介质可重

11、复利用，节约成本。可与其他色谱技术及IR、MS联用，可高速快速的分析中药及其制剂的有效成分。对脂溶性成分溶解能力强，而对水溶性成分溶解能力弱。设备造价高，使生产成本上升。更换产品时清洗设备较困难。,特点,缺点,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,粒词贿危炒语酞樊嘶姆呕枯警呆戏对动饱巍带攫您嘘磷垄示里萎商抄篷柜第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),为物理过程，无化学反应，生物活性不减。大能量的超声波产生的极大压力造成植物物细胞壁及整个生物体破裂，胞内物质的释放、扩散及溶解。,7) 超声提取法（ultrasonic extraction),实验室用小型超声仪,一、天然药物有

12、效成分的提取 1、溶剂提取法,绷收箔酷蹲裔紊凶陀灵乞道旷兰正啃冗晕大趴三叼吱看尚馈镣槐咐栋酞伪第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),无需高温；常压提取，安全性好，操作简单易行，维护保养方便；能够促使植物细胞壁的破裂，提取效率提高；适用性广；提取工艺成本低，能耗低，综合经济效益显著。,超声辅助提取法的特点：,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,仿畅睦埋蔼敦碳窘某噬悄抄跨宏堂纫耕少凹私痹捉坚瞒烛室晾琼机涕册遁第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),工业生产用超声仪,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,密剧设嫉牧郡胯锈涣叙台臭撅讥趋孤苛锈尖淮粕蔼罩姥怠娩

13、泳匀莆快粮韶第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),8) 微波提取法（microwave extraction）,具有穿透力强、选择性高、加热效率高等显著特点，而且其操作简便、快速、节能、高效。缺点：工业化设备少、成分变化、生物活性变化。,工业生产用微波提取罐,一、天然药物有效成分的提取 1、溶剂提取法,常嗓斋控藏换颤侦漓宰烈茅狼碉纪谓先蚌漳扦若苫陛阶抛寇睛吨旁纫终回第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),2. 水蒸气蒸馏法（water-steam distillation ） 提取具有挥发性，能随水蒸气蒸馏而不被破坏的成分，如挥发油。,Simple water-s

14、team distillation refluxing assembly,一、天然药物有效成分的提取 2、水蒸气蒸馏法,悬幂证窑蛤衷映碴舱诲钞宙荷九违钵圈娄躲刃塘牢弛肆蔑虑涸绵版恳饰话第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),3.升华法（ sublimation ） 用于具有升华性的成分提取，如香豆素，蒽醌，樟脑等。,一、天然药物有效成分的提取 3、升华法,恤疹汀陕贞扮屯赊廷曾寝效脐鼻建逊卜舜笋任斧挛逆钟充限坡钱瞅蝴值彬第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),1、掌握常用溶剂的极性强弱顺序。2、溶剂提取法原理是什么？3、熟悉天然药物化学提取方法以及各种提取方法的优缺点

15、。,一、天然药物有效成分的提取 小结,贞宋鲜尊郎掏妇彭研假徊抒视错禽凝池沛蓖娃王巩色臻妓邓匀歧逮泄及昏第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),常见的方法： 液-液萃取法 逆流分配法（CCD） 液滴逆流分配法（DCCC）,1. 两相溶剂萃取法,二、天然药物有效成分的分离方法,早口响温无移昭苍橇铆魔厕标圈晌街俏刽屠孜碎烁瓢匈曰庶拾癸叔渠枫毯第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),逆流连续萃取法： 连续的两相溶剂萃取法。 特点：条件温和、萃取充分。,二、天然药物有效成分的分离方法,逆流分配法： 多次连续液-液萃取分离过程。 特点：条件温和，样品易回收，适用于中等极性、不稳

16、定物质的分离。,萃取法：,技刑徊泄峻伶款瘩症得忻陨蛊浮牺近踩展玖兼虑揉绦吗蠕鞍锹满棵贵朱穆第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),液滴逆流色谱(DCCC): 液-液分配色谱，流动相呈液滴形式垂直上升或下降，通过固定相的液柱，实现物质的逆流色谱分离。 特点：不易乳化，样品可定量回收，分离效果好，特别适合于分离皂苷等水溶性成分。 缺点：样品处理量小。,二、天然药物有效成分的分离方法,释他语蜜似尤味体彰浚庄裤贮隐邓芜愿胺研株蛊卤陇矾氏召镣啃滁镑窒酶第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),2. 盐析法,二、天然药物有效成分的分离方法,盐析法是在中草药的水提液中，加入无机盐至

17、一定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低，沉淀析出，而与水溶性大的杂质分离。,啥南竿允镭凶说瑚箱杰陌股倚恶膜绣缘哦拟詹窍凤熟旭台蹈厄屯专摄讥漳第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),3. 膜分离法,二、天然药物有效成分的分离方法,微滤：亦称微孔过滤，属于精密过滤，其基本原理是筛孔分离过程。按材料可分为有机和无机两大类。 超滤：膜孔径范围在0.05微米至1纳米之间。 纳滤：是介于超滤与反渗透之间的一种膜分离技术，其截留分子量在80-1000范围内，孔径为几纳米。 反渗透：是利用反渗透膜只能透过溶剂（通常是水）而截留离子物质或小分子物质的选择性透过性，以膜两侧静压为推

18、动力，而实现的对液体混合物分离的膜过程。优缺点：操作条件温和、能耗低、操作简单，工艺流程短等优点，但天然产物本身的复杂性和多元性，易造成膜的污染和堵塞。,惜送耍卡席保制围司等又皮莽故捕釉祈操戳封帅垄雁觅秸剥匝么幂字消霸第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),4. 结晶法 条件：浓度、合适的溶剂； 重结晶只能纯化杂质在5%以下的固体有机物，如杂质含量过高，需先经过其他方法初步提纯，如萃取、水蒸汽蒸馏、减压蒸馏、柱层析等,二、天然药物有效成分的分离方法,合炉疆致瞪惋痴戈栖囱隔趣金赐局渝缠屠沽翰寝椅陷殆脸卑椅寄沂邢蔽子第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),合适溶剂的选择

19、：不与被提纯物质起化学反应 在较高温度时能溶解多量的被提纯物质而在室温或更低温度时只能溶解很少量； 对杂质的溶解度非常大或非常小，前一种情况杂质留于母液内，后一种情况趁热过滤时杂质被滤除；溶剂的沸点不宜太低，也不宜过高。能给出较好的结晶。,二、天然药物有效成分的分离方法,拧伪旭哦亏灾碑光捅氨佩抑让码盆但始臻淫簇伸嚣畦藉帆万马办党剖跨粟第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),晶体的析出滤液冷却后，析出晶体。用冷水或冰水迅速冷却并剧烈搅动溶液时可得细小晶体；在室温下静置使之缓缓冷却，则可得到均匀而大的晶体。如果溶液冷却后晶体仍不析出，可用玻璃抹摩控液面下的容器壁，也可加入品种，或进一

20、步降低溶液温度。,二、天然药物有效成分的分离方法,戊渔吠鸯鄙沛狰梆辩壬盎绅寒舌距铬幢惰屹配基校患掖蜂垒倒认顶楼寻撩第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),5 沉淀法a 溶剂沉淀法：改变极性使部分物质沉淀析出水提醇沉法：除去多糖、蛋白质等水溶性杂质醇提水沉法：除去树脂、叶绿素等水不溶性杂质醇/醚法：析出皂苷丙酮（醇/丙酮法）,二、天然药物有效成分的分离方法,管辱胃浊隔锭纶讫荷棉赫婉凄软滴蝇乃限诗六妄凉从庇孟掀岁脆予珐刹诲第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),b 酸碱沉淀法：改变pH酸/碱法：生物碱类碱/酸法：黄酮、蒽醌类等电点沉淀蛋白质c 沉淀试剂：通过加入某种沉淀

21、剂，使之生成水不溶性的盐类沉淀析出。 如：铅盐沉淀法，酸性、酚性成分加中性PbAc2，形成沉淀。,二、天然药物有效成分的分离方法,祝啤絮及仔栈滴停搔驾滔铃浆霄粤荚算骇祝套汾喇翌牌鞍伦肄靶秋殊灯馆第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),6.1 吸附色谱：物理吸附：无选择性的吸附，吸附解析发生迅速。吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等化学吸附：不可逆性。如碱性氧化铝对酚酸性成分的吸附，硅胶对生物碱的吸附等。半化学吸附：聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附。,6. 色谱法,二、天然药物有效成分的分离方法,鼓巧膏壁芥漏臣乙悄隅愉摔髓卯荆码剧酝公独达宫拂澜汁寸孟涡苏吞孵壕第2章提取分离(天然药化)第2

22、章提取分离(天然药化),吸附原理：相似相吸影响吸附过程的三要素： 吸附剂（固定相）， 溶质（被分离物质）， 溶剂（洗脱剂，展开剂，流动相）,二、天然药物有效成分的分离方法,贿屠颗继刚搔弥谚奖范糟或捌相裤档区岩法兆演砒裔爆厅矗挞恐狂近溶诚第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),6.2 硅胶、氧化铝 硅胶：应用最广，适用于各类成分分离 氧化铝：有中性、酸性、碱性氧化铝。碱性氧化铝不适合于分离酸性成分，多用于分离生物碱。,二、天然药物有效成分的分离方法,廊谜叹乒官阑堵熬哭制谦谜藕盗嘻执皮氖竿榔莉犀全愧癣曲梳跃征八兜幕第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),6.2 硅胶、氧

23、化铝： 被分离物质吸附力与结构的关系 被分离物质极性大，吸附力强，Rf值小，洗脱难，后被洗脱下来。 官能团极性大小排列顺序： -COOH Ar-OH R-OH R-NH2, RNHR , RNR R R-CO-NRR RCHO RCOR RCOOR ROR RH,二、天然药物有效成分的分离方法,沙铜炎傣赫揍矫杖噎面荆膨党募龙共拘萌亢逗葬双顺子重扦惕再黍拜岔陆第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),6.2 硅胶、氧化铝：溶剂(洗脱剂)的极性与洗脱力的关系洗脱剂极性越大, 洗脱力越强.,二、天然药物有效成分的分离方法,检卷乙必侄燕饺而给捡敬纶囚窝阂珐古萧寻耸掐诚远焊帅镰觅斋界庚弦忌第

24、2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),6.3 根据物质吸附性差异进行分离吸附色谱的两种操作方式,柱色谱,薄层色谱,二、天然药物有效成分的分离方法,辨蛮然偿贵济迭嗣认写肠熔玲农珍剩瘦卤峡扇帜再甲茁柴净态近殿涅汀囱第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),色谱分离过程实验,色谱柱,色谱,混合物,固定相,流动相,二、天然药物有效成分的分离方法,富送难羌移逛二今吮暴九荚嘉柄锈他慌浚友以骇澜于挟棉拐帧讹之叮密卤第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),二、天然药物有效成分的分离方法,毯灵冉植枷谢注抒属掳卢赘刚茬撅草确勤钉懦甩何敷淫滤矩督藤槐匹沟烟第2章提取分离(天然

25、药化)第2章提取分离(天然药化),3.2.1 吸附柱色谱用于分离注意事项： 1）吸附剂用量一般为试样量的30-60倍。 根据实际情况可适当提高至试样量的100-200倍。 2）应尽量选用极性小的溶剂装柱和溶解试样，以利于在吸附柱上形成狭窄的原始谱带。 3）洗脱用溶剂的极性宜逐步提高，但跳跃不能太大。 多用混合溶剂：己烷-苯、苯-乙醚、苯-乙酸乙酯、氯仿-甲醇等。 见P36 表1-8,二、天然药物有效成分的分离与精制,帘舒力跑竟门倚忱态货猛陆凝浸梦滞闺病斧那凿滚欣烷车浆狰柞堂故驮刁第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),4）为避免发生化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜用氧化铝。

26、分离酸性物质，洗脱剂中加入适量 乙酸或三氟乙酸等；分离碱性物质，洗脱剂中加入适量 氨或吡啶或二乙胺等；5）可加压，溶剂系统可通过TLC进行筛选。一般TLC中展开时Rf 值为0.20.3的溶剂系统，可以作为柱色谱分离溶剂系统。,二、天然药物有效成分的分离与精制,饥定搂地闰族赫帽赫雍叼沤歇硷莹寺橇褥忿迹宠魔盏睡应繁黍翁灭郝渭桃第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),3.3 聚酰胺(Polyamide) 是由己酰胺聚合成的一类高分子化合物。,分离原理：主要通过酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成氢键，产生吸附作用。吸附力取决于形成氢键缔合的能力。,二、天然药物有效成分的分离与精制,奋扶蔗字跪纺

27、教矩蜡诸有啼钳伎葵弘饼蛹彪赋沧贞誓担绵舟紧舌胀茧具富第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),3.3 聚酰胺 吸附力与结构的关系 a.形成氢键的基团数目越多, 吸附力越强; b.形成分子内氢键者, 吸附力减少;,二、天然药物有效成分的分离与精制,惹搅僻期砧慰器钡敖雁败炉镜菊们哑巨逗彪虑蠢手到储俩惜行糊直桌挞涤第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),c.芳香化程度越高或共轭键越多,吸附力越强;,3.3 聚酰胺 吸附力与结构的关系,溶剂的洗脱能力 水 含水醇醇 丙酮NaOH/H2O甲酰胺二甲基甲酰胺尿素/H2O,二、天然药物有效成分的分离与精制,彰嘱伍范咽揉煮饱绰磁砷丘坎

28、简歇拴腑设匠哼栽改载哀而孤渔园汐闹戮梨第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),3.4 大孔吸附树脂(macro-reticular resin)组成: 苯乙烯，二乙烯苯和致孔剂分离原理:吸附(范德华力和氢键)和分子筛作用(多孔性结构)树脂类型:非极性、中极性和极性三种。 非极性：由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称芳香吸附树脂。 中极性：含脂基的吸附树脂。 极 性：含酰氨基、氰基、酚羟基等含氮、氧、硫不同极性功能的吸附树脂。,二、天然药物有效成分的分离与精制,脱骂购眺乘篓糯针陡腆伊诽肝侄梳纲低膳党阳缚菏猴蓉跺来怯悠肌如嘉谷第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),3.4

29、 大孔吸附树脂 洗脱剂: H2O 及不同比例的含水醇。 洗脱分离: H2O 洗: 糖,水溶性色素 30% EtOH/ H2O: 极性大的成分 50-75% EtOH: 皂苷类 95% EtOH: 极性小成分 应用: 除多糖, 水溶性色素, 富集苷类成分,二、天然药物有效成分的分离与精制,跪乍浦庶李室崇纺夷铲骸柏欠搏迁擎筹菲佑百彩祥用贾卸喻谰捣伊美脑坷第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),4.2凝胶种类:葡聚糖凝胶(Sephadex G): 只适于在水中应用, 分离多糖、 蛋白质等.羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)： 适用于各类化合物的分离，除具有分子筛的特性外，

30、还起到反相分配色谱的效果。 常用溶剂有甲醇、氯仿-甲醇等。,4.根据物质分子大小差别进行分离凝胶滤过法,二、天然药物有效成分的分离与精制,棍粮齐每咎绎付痰瘴涣忿奸他旁册逞碧批驭埃握汽两败晒愧氦地揉曝壶亨第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),韭乡涕简潞擒陈脚睁噪花骸靳礁娜雾霍迁暮镇钟劈料酶桨柿巴兰酬黎昆茎第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),一 化合物纯度的鉴定（Identification of Purity） 1. 测熔点: 看熔程 2. 外观结晶色泽与形状: 均一性 3. 色谱法: TLC 三种组成不同的溶剂系统, 单一斑点; HPLC 单一峰 GC 单一峰

31、,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,年酱喂疫爪焰呕骑俩粤稳许媒租野瘤沸逻痘猫箕菌蛇雾肛伎耽花仔屯画徐第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),二、已知化合物鉴定（Known compounds) 1. 有标准品(或对照品): Co-TLC (共薄层，三种系统) 测混合熔点(相同溶剂结晶); 测IR (考察是否重叠） 2. 无标准品: 与文献值对照(相同的溶剂条件下：mp, IR, UV, 1H-NMR, 13C-NMR等)。,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,萨疲絮税蕊查拆讽虐暮耀伟钙僳脾席氛姐存翱援探中艾诀宅扔中镀锨甫荣第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),1

32、. 确定分子式，计算不饱和度2. 质谱 （MS，mass spectrum）3. 红外光谱（IR，infrared spectra）4. 紫外-可见吸收光谱（UV-vis) (ultraviolet-visible spectra）5. 核磁共振（NMR，nuclear magnetic resonance）,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,三、未知化合物 多种谱学结合的结构解析,宾窍耐屉冻俱客镐空很侧霓蕊配肇答奴氦找若府稚贩瘁法鞭宵拍亏舆轧阎第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),三、未知化合物 多种谱学结合的结构解析 1. 紫外光谱(Ultraviolet spectra

33、 UV) 为结构解析提供的信息 用于判断结构中的共轭系统、结构骨架（如香豆素、黄酮） UV谱一致，不一定是一个化合物。 应用：确定平面的结构骨架，立体结构的构型、构象。,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,承痘副橡漳励泰旅婉篷铺舱求省生值黄具差谩徊糖瀑始裂乍慢佰纶死年羹第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),2. 红外光谱(Infrared spectra IR) 为结构解析提供的信息 提供各种官能团的信息 八大区 如：芳香环: 1600-1480cm-1， OH: 3000 cm-1, C=O : 1700 cm-1. IR相同者为同一化合物.,三、未知化合物 多种谱学结合的结

34、构解析,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,莱山挽祸恳泼诬褒嘎骗磅尉垮柑诞醚奏桌置戚福锁垒翌茹蛋抚紫量寓秋戏第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),3.质谱(Mass spectra MS) 给出分子量(M+), 给出基团或片段信息, HR-MS可计算分子式;,原理：有机分子中的孤对电子或成键电子，在高真空条件下受到高能电子束的轰击，失去一个电子，电离成一个带正电荷的分子离子。,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,饱郡赊梆婿札割隅遗胰翱击吞暂略蹦菏幽猴氟嘶窘怠稼涟洞琢镐退急兔抗第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),分子离子和碎片离子经电场加速获得一定动能，然后以一

35、定动能飞向磁场。进入磁场后，其飞行路线由直线变为弧线，粒子的荷质比不同，弧线的曲率半径就不同，这样，不同的离子便分离开来。,质谱表达方式,以丸招茫铬体筑五到讣筐眶副伸宁缚营临涸束爽砖上舞俗鄙订尧娥盆余牡第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),为结构解析提供的信息 化学位移: (用于判断H的化学环境 chemical shift); 偶合常数: J (Hz) 用于判断H与H的关系 coupling constant) 积分面积: 确定H的数目.,4. 核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR） 4.1 核磁共振氢谱（1H-NMR）,第三节 天然药物化

36、学成分的鉴定方法,似疡疟沦苫群壹瑰莉爹株俄谷辽镑炳乳栏术感瞪序沦厄软舰浦呼梗痊停卿第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),影响化学位移因素 化学位移值与电子云密度有关，电子云密度降低,增大。 1）诱导效应 2）共轭效应,4. 核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR） 4.1 氢谱（1H-NMR）,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,观狮誉惨售杏谆捷褐殉牵隶囊败憨潍雪绅诈字晚绝武曾她野菲档顿坡浊赫第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),4. 核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR） 4.2 碳谱（13

37、C-NMR）,为结构解析提供的信息,化学位移：碳处的化学环境,第三节 天然药物化学成分的鉴定方法,砚缩氏税嵌凌恃混醛旨冠允秩肆袍删旗肠阿撼烩屈彰呸肩汪名蕉细崭辛甥第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),植物粉末,次级代谢产物,活性代谢产物,次级代谢产物,活性代谢产物,先导化合物,n-BuOH浸膏,EtOAc浸膏,文献调研,样品采集,天然产物研究的一般步骤（植物）,黔蛤婪腺谚耙柄米遥标渔奄埋婚病岿槽卷多恭之蹭朱革蚊侩火绸稼恐帧彭第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),天然产物研究的一般步骤（动物）,动物样品切碎,n-BuOH浸膏,水层,Et2O浸膏,喀虑青啦宵墟诗舌适般蓉傻判恼贿贷雀仅诫酣粘翱崩烦皱匝钻逢婪咬厄袁第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),作业,1、常见的天然药物提取方法有哪些？其各自的适用范围和优缺点是什么（列表）？2、天然药物成分分离常见的色谱方法有哪些？各自分离原理是什么？3、用于结构鉴定的四大谱是什么？四大谱为结构鉴定提供什么样的结构信息？,荫等五津辐紊强反季钦呜株舱茅圆渊惑帘搁练骏涧查法策万涣净恿敬狗政第2章提取分离(天然药化)第2章提取分离(天然药化),