清洁验证GMP培训课件.ppt

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1、深圳九新药业有限公司,清洁验证徐影,2022年11月10日,深圳九新药业有限公司清洁验证2022年9月24日,讲座内容,清洁验证目的法规要求什么要求清洁验证了解清洁过程方案内容标准样本类型测试方法类型与问题,2022年11月10日星期四,2,讲座内容24 九月 20222,清洁验证目的,提供文件依据证明清洁程序能够有效地将产品残留和清洁剂残留去除到不会危害到病人安全的水平。,3,清洁验证目的3,法规要求,中国新版GMP:第八十四条应当按照详细规定的操作规程清洁生产设备。生产设备清洁的操作规程应当规定具体而完整的清洁方法、清洁用设备或工具、清洁剂的名称和配制方法、去除前一批次标识的方法、保护已清

2、洁设备在使用前免受污染的方法、已清洁设备最长的保存时限、使用前检查设备清洁状况的方法，使操作者能以可重现的、有效的方式对各类设备进行清洁。如需拆装设备，还应当规定设备拆装的顺序和方法；如需对设备消毒或灭菌，还应当规定消毒或灭菌的具体方法、消毒剂的名称和配制方法。必要时，还应当规定设备生产结束至清洁前所允许的最长间隔时限。,2022年11月10日星期四,4,法规要求中国新版GMP:24 九月 20224,法规要求,第一百四十三条清洁方法应当经过验证，证实其清洁的效果，以有效防止污染和交叉污染。清洁验证应当综合考虑设备使用情况、所使用的清洁剂和消毒剂、取样方法和位置以及相应的取样回收率、残留物的性

3、质和限度、残留物检验方法的灵敏度等因素,2022年11月10日星期四,5,法规要求第一百四十三条清洁方法应当经过验证，证实其清洁,欧盟法规,清洁验证12.70 清洁程序通常应当经过验证。一般来说,清洁验证应当针对那些如果污染或偶然带入异物对原料药质量产生最大威胁情况或工艺步骤。例如,在早期的产中,设备清洁程序可能不需验证,在此遗留物可以在后续的精制过程中除去。12.71 清洁程序的验证应当反映出设备实际使用的模式。如果有不同的原料药或中间体在同一设备中制造,并且用相同的方式对设备进行清洁,应当选用一种具有代表性的中间体或原料药来进行清洁验证。这种选择应当跟据溶解性以及不同的清洁难度,药效,毒性

4、和稳定性计算出残留限度来进行。,2022年11月10日星期四,6,欧盟法规清洁验证24 九月 20226,12.72 清洁验证方案中应当对所要清洁的设备,程序,物料,可接受的清洁水平,监测和控制的参数,以及分析方法进行描述。该方案同样应当阐明得到样品的类型,以及如何进行取样和标识。12.73 取样应当包括擦拭法,冲洗法或其他可用的方法(即,直接萃取),如果可能,同时检测可溶解或不可溶解的残留。所使用的取样方法应当能够定量测量清洁后在设备表面残留水平。在由于设备的设计和/或工艺限制(即,软管的内表面,导管,小口反应器或处理毒性物料,以及小的复杂,如微粉机和微型流化床),产品接触表面不容易接触的时

5、候,设备擦拭取样可能不切实际。,2022年11月10日星期四,7,12.72 清洁验证方案中应当对所要清洁的设备,程序,物料,12.74 所使用的分析方法应当经过验证,具有检测残留物或污染物的灵敏性。每一种分析方法的检测限度应当具有足够的灵敏度来检测已经制订的残留或污染接受水平。应当制订该方法的回收率水平。残留限度应当具有实用性,可操作性,可证实性,以及最有害的残留。限度可以制订在已知的原料药或其最有害成份的药理学,毒理学,或生理学活性基础上。12.75 对于需要降低原料药中的的总微生物数或内毒素的工艺,或担心此类污染的其它工艺(如,用于生产无菌产品的非无菌原料药),设备清洁/消毒的研究应当着

6、眼于微生物和内毒素污染。,2022年11月10日星期四,8,12.74 所使用的分析方法应当经过验证,具有检测残留物或污,12.76 进行验证后,应当在适当的间隔对清洁程序进行监测,以便保证这些程序在日常生产中有效。如果可行,应当用分析检验和目测检查来监测设备的清洁程度。允许以目测的方法测定用其他取样和/或分析方法不能测定的小区域大致的污染程度。12.8 分析方法验证12.80 分析方法应当经过验证,除非所采用的是相关药典或其它公认参照的标准方法。,2022年11月10日星期四,9,12.76 进行验证后,应当在适当的间隔对清洁程序进行监测,FDA的要求,在FDA的GMP211.67章节中规定

7、了设备清洁验证的要求： 建立书面标准操作程序（SOP），其中必须详细规定设难关备各部件的清洗过程； 必须建立书面的清洗方法验证通则； 清洗方法验证通则应规定执行验证的负责人、批准验证工作的负责人、验证标准（合格标准）、再验证的时间； 对各生产系统或设备部件进行清洗验证之前，应制定专一特定的书面验证计划，其中应规定取样规程、分析方法（包括分析方法的灵敏度）。,FDA的要求 在FDA的GMP211.67章节中规定了设备清,FDA的要求,按上述验证计划进行验证工作，记录验证结果。 做出最终的验证报告，报告应由有关管理人员批准，并说明该清洗方法是否有效。,FDA的要求,2022年11月10日星期四,1

8、2,什么需要验证,一般来说只有对设备与产品接触的表面进行清洁的程序需要进行验证。对于产物可能转移到的非接触部件，如密封，法兰，搅拌轴，烘箱的风扇，加热装置等，应给予考虑。一般来说在连续批次生产的情况下，无需在每一批次完成后进行清洁。但是清洁间隔与方法应该被确立。 PICS JUL 2004,24 九月 202212什么需要验证一般来说只有对设备与产品,2022年11月10日星期四,13,什么需要验证: FDA“当清洁只用于同一产品的不同批次生产中（或在原料生产中同一中间体的不同批）时，公司只需要满足设备的“看的见的清洁”即可。这种批次间清洁工艺无需验证.”FDA 清洁工艺的验证 1993年7月

9、,24 九月 202213什么需要验证: FDA,清洁验证的失败案例,1992年，FDA对一家进口原料厂发出警告，该厂使用同一台设备生产甾体及非甾体类物质，FDA认为清洁验证不当，只对前一种产品残留做了验证，但用TLC法对后一产品淋洗水检测发现了副产物及降解物的证据。,2022年11月10日星期四,14,清洁验证的失败案例1992年，FDA对一家进口原料厂发出警告,监管要求最终的目标,降低交叉污染的风险使得产品受污染报废的可能性最小患者的负面效应可能性最小降低产品投诉的发生率降低卫生部门或其他机构检查不合格的风险延长设备的使用寿命,2022年11月10日星期四,15,监管要求最终的目标降低交叉

10、污染的风险24 九月 202215,化学污染 ，如活性成分、产品、清洁剂残留,污染类别,16,污染类别16,物理污染，如机械杂质、外来异物,污染类别,17,污染类别17,微生物污染特别注意那些具有促生长和含有大量水分的物料,污染类别,18,微生物污染污染类别18,19,污染控制,厂房：温湿度、流型、换气次数及微生物监测 设备：设计和材质的可清洁性、规定的清洁和维修规程人员：更衣、清洁和人流物料和废物流向,19污染控制厂房：温湿度、流型、换气次数及微生物监测,20,清洁等级,不同产品的批次之间 Product residue 产品残留 Cleaning agents residue, if ap

11、plicable 清洁剂残留（如适用） 同一产品的批次之间 Cleaning agents residue, if applicable 清洁剂残留（如适用） Degradants 降解物,20清洁等级,清洗方法,手工清洗由操作人员用檫洗或用高压软管进行的清洗自动清洗由自动控制对容器及管道进行高压冲洗直至干燥的清洗半自动清洗结合以上两者的清洗过程,2022年11月10日星期四,21,清洗方法手工清洗24 九月 202221,清洁需注意的要点清洁速率同流速的关系,湍流公式： NRe=VD/其中：V：流速D：特征距离（管子/管道直径） ：流体密度 ：动态流体粘度,清洁需注意的要点清洁速率流 速层流

12、湍流湍流公式：管子或,清洁需注意的要点,湍流的清洁速率大大大于层流的清洁速率；盲管和垂直管道中的清洁液的速率要大于湍流所需的速率，通常要求大于1.52米/秒（5英寸/秒）； 在设备设计时需要考虑盲管的清洁问题，通常要求L/D2.0 喷淋球的覆盖率检查；溶液分布在喷淋球上部的25%-30%区域 CIP清洗中避免设备底部的积水； 有效、可靠和反复的清洁要求湍流。,清洁需注意的要点 湍流的清洁速率大大大于层流的清洁速率；,24,时间限度,生产完成至清洁开始清洁完成至干燥开始 同一产品的生产周期中批次之间的清洁频次 对未用的、已清洁的设备进行额外清洁,24时间限度生产完成至清洁开始,清洁规程的制定,制

13、定SOP是清洁验证的先决条件； 通常参照设备的说明书制定详细的规程，规定每一台设备的清洁程序，保证每个操作人员都能以可重复的方式对其清洗，并获得相同的清洁效果。,清洁规程的制定 制定SOP是清洁验证的先决条件；,清洁规程应考虑以下因素：设备的设计，如材质、可拆卸程度、难清洗的位置等,26,清洁规程,清洁规程应考虑以下因素：26清洁规程,清洁规程应考虑以下因素：生产工艺：待去除残留物的特性（如油性、脂肪性、水溶性等）,27,清洁规程,27清洁规程,制造产品的类型和数目产品处方/材料的特性评价清洁过程的潜在问题,制造产品的类型和数目,清洁规程应考虑以下因素：操作人员：人工清洗或在线清洗,29,清洁

14、规程,清洁规程应考虑以下因素：29清洁规程,物料和工具物料和工具的控制清洁剂的选择变更控制规程应对任何的清洗物料和清洗工具的改变进行评估,30,清洁规程,物料和工具30清洁规程,SOP 内容,准备程序,文档记录程序,拆卸程序清洁程序完成程序检查程序干燥程序,打包/覆盖/储藏程序,清洁后文档记录程序,设备清洁失效程序,使用前检查程序,准备空间，工具与清洁剂,状态标签，检查单，清洁与使用记录,Exploded diagrams or digital photos或数码照片Step-Wise, Tools, TACT, Measures工具，篮筐，推车的清洁方法与工具，检查部位环境/控制,材料，处理

15、，部位,再次标签，清洁与使用记录,Dating Requirements, 再清洁要求,失效验证，包裹/封盖的完整性,第4模块 SOP制定第28页,SOP 内容准备程序文档记录程序拆卸程序打包/覆盖/,清洁验证程序,包括以下内容:策略可接受的残留限度 计划及执行,32,清洁验证程序包括以下内容:32,清洁验证策略,包括以下步骤进行选择： 最坏条件产品 最坏条件设备 定义污染限度的科学依据 取样方法 分析方法,33,清洁验证策略包括以下步骤进行选择：33,最坏条件产品-目标化合物选择,一般药品都由活性成分和辅料组成。对于接触多个产品的共同设备，所有这些残留物都是必须清洁干净的，在清洁验证中不必为

16、所有残留物都制定限度标准并一一检测通常清洁的过程是个溶解的过程从各组分中确定最难清洁（溶解）的物质，以此作为参照物质。相对于辅料，人们最更关注活性成分的残留，因为它可能直接影响下批产品的质量、疗效和安全性。,最坏条件产品-目标化合物选择一般药品都由活性成分和辅料组成,毒性 在清洗时的溶解度 已知难于清洗，如对设备表面材质有一定附着力 包含色料、芳香剂或矫味剂的产品 设备的生产量（生产频率高的产品相应的清洗频率也高） 清洗过程中如果使用清洗剂，则其残留物也应视为标记物,最坏条件产品的选择,毒性最坏条件产品的选择,36,最坏条件产品的选择,基于以下条件： Pharmacological activ

17、ity 药理 Solubility 溶解性 Concentration 浓度 Analytical detection 分析检测限度根据产品的相似性进行分组，如活性成分相同但规格不同，或活性成分相同但辅料不同 类似的毒性类似的处方在清洗溶剂中的溶解特性类似的管理方法和危险水平产品在类似的设备上进行生产并采用相同的清洁程序,36最坏条件产品的选择基于以下条件：,目标化合物选择,目标化合物选择产品名称毒 性溶解性已知的颜色香味与味道产 量,目标化合物选择依据,从活性成分的毒性来讲，A的毒性最大，其他依次为B，C，D 从溶解性方面来讲，D产品属于微溶 除产品D外，其他均没有已知的清洗问题 除产品D外

18、，其他产品均没有颜色及气味的问题 基于上核定帅，产品A与产品D确定为清洗验证的标记产品,目标化合物选择依据 从活性成分的毒性来讲，A的毒性最大，其他,39,最坏条件设备的选择,如果设备具备以下条件，可进行分组：完全相同，可互换，并采用相同的清洁规程多个活性成分共同接触某个产品/活性成分单独使用哪些设备是包括在清洁验证中的，哪些设备是不包括在清洁验证中的操作原理相同，清洁规程相同，可是产品的接触表面积不同（产品接触面积以计算残留限度的接受标准。 ），但可互换产品接触的设备-直接接触产品的设备，例如：溶液罐、储存桶。对于产品接触设备的无效清洁可能造成产品间的交叉污染；,39最坏条件设备的选择 如果

19、设备具备以下条件，可进行分组,非产品接触的设备-在生产工艺中涉及，但没有和产品直接接触的设备，例如：封闭设备的外表面。对于非产品接触设备的无效清洁一般不会造成产品间的交叉污染；非直接或偶然接触产品的设备-在生产工艺中涉及，没有和产品直接接触，但有可能污染产品的设备，例如：冷冻干燥仪或盘式干燥仪的内表面、机械监护装置的内部，还有某些情况下地面、墙面和天花板。对于非直接产品接触设备的无效清洁，有可能造成产品间的交叉污染。 通常清洁验证包括产品接触的设备，不包括非产品接触的设备，非直接产品接触的设备是否包括在内依实际情况而定。一次性单用途设备（如硅胶管）可不包括在清洁验证中。,非产品接触的设备-在生

20、产工艺中涉及，但没有和产品直接接,2022年11月10日星期四,41,难清洗位置,24 九月 202241难清洗位置,残余物标准: PICS“在后续产品的日最大剂量中，任何其他产品不得超过其正常有效剂量0.1%的”“任何产品中其他产品不得超过10ppm”,残余物标准: PICS,ISPE-CCPIE CHINA CONFERENCE 2009,残余物标准: PICS“.在完成清洁程序后，设备不得有任何肉眼可见残余物。”“对于特定的致敏成分，青霉素，头孢菌素或强效类固醇激素与细胞毒药物，其限定值应低于目前最佳分析方法的检测值”“实践中，这标志着这些产品是由特定的专门工厂生产的”,ISPE-CCP

21、IE CHINA CONFERENCE 20,残余物标准: FDA“FDA并非试图为决定清洁程序的验证设立接受标准或方法。”“业届代表在文献或讲座内提出了某些限定值，包括分析检测水平如10ppm”“生物学活性水平，如正常治疗剂量的1/1000”“感官感知水平，如无肉眼可见残余物 ”FDA 清洁工艺验证检查指南 1993 年7月,残余物标准: FDA,45,定义污染限度的科学依据选择,基于以下数据：毒理学数据药理剂量绝对限度污染物浓度的log减少度,45定义污染限度的科学依据选择,污染限度和接受标准,（1）目测洁净，干燥&无嗅限度 在每个清洗验证的方案中都必须包括该接受限度； 在每次清洗完成后都

22、必须进行检查并对检查结果进行记录 目测检查时应包括地面、墙面和天花板等； 应该作为清洗验证接受限度的第一个接受标准。 注意：在进行无嗅检查时考虑到产品的安全问题。,污染限度和接受标准 （1）目测洁净，干燥&无嗅限度,限度和接受标准,（2）化学残留可接受限度浓度限度：十万分之一（10ppm） 在下一产品中的残留物数量级别应不超过十万分之一（10ppm）最高允许十万分之一残留源于食品法规，食品法规允许某一有害物质作为食物链存于动物和家禽中存在的水平。,限度和接受标准,计算接受残留限度需考虑的要素,计算接受残留限度需考虑的要素影响因素最小日溶解度批量最大日接,2022年11月10日星期四,49,24

23、 九月 202249,2022年11月10日星期四,50,24 九月 202250,2022年11月10日星期四,51,24 九月 202251,参考资料：当代结构药物全集（上）The Complete Works of Contemporary Structure-based Drug (1st Volume)半数致死量数据来自化学品安全技术说明书（MSDS）数据库,2022年11月10日星期四,52,参考资料：当代结构药物全集（上）24 九月 202252,设备表面积的确定： 1、应测定每个设备的产品接触面积，以计算残留限度的接受标准； 2、产品接触面积测定的准确度应具有实际意义，不必绝对

24、地精确。可将复杂设备转化成基本几何图形以便于计算和测量； 3、测量的原始记录和计算将作为原始数据进行保存。,设备表面积的确定：,附录1 产品列表,2022年11月10日星期四,54,附录1 产品列表24 九月 202254编号产品水溶解度MT,2022年11月10日星期四,55,选择MTDD的最小值，以及批量与LDSD比值的最小值,选择LD50的最小值，以及批量与LDSD比值的最小值,选择最小的批量值,24 九月 202255选择MTDD的最小值，以及批量与LD,最终选择：0.16,2022年11月10日星期四,56,最终选择：0.1624 九月 202256,清洁剂的限定值, 清洁剂的组分不

25、应该具有治疗作用, 为了确定清洁剂的安全性，各家公司经常采用唯,一可知的清洁力活力的指标-LD50, LD50 根据动物模型的不同 (e.g., 大鼠, 几内亚猪,小鼠等) 以及给药方法的不同 (e.g., 口服, 外用,静脉注射, i.p., 皮下等）, 由于我们希望保证残余量对于使用下一剂药物的,患者是安全的，我们不能直接引用LD50的数据。, 因而大部分公司首先计算ADI（可接受的每日摄,入）或NOEL（无观察效应水平）这两个值, NOEL或ADI公式的形式与药理学特性限定值的,形式相同,清洁剂的限定值 清洁剂的组分不应该具有治疗作用 为了确定,清洁剂的限定值NOEL，根据大鼠口服给药的

26、LD50得出的典型公式为：NOEL = LD50 mg/kg x (5.6 x 10-4) x 70 kg,转换因子与安全因子将大鼠口服的 LD50 转换为人体的NOEL注意: 安全因子可以防范: 个体反应差异, 因剂量 / 应答曲线变异而可能造成的最坏情况，以及使得未观察到的效应被外显出,来。,平均成人体重 注意: 可能更安全的方法是采用儿童体重或不考虑，尽管前文所述的安全因子被更多认为已经可以弥补这一问题。,Ref: Doursan and Stara, J. Regulatory Toxicology and Pharmacology , 3, 224-238, 1983.Other R

27、efs: D.W. Layton, et al., J. Regulatory Toxicology and Pharmacology , 7, 96 1987.Doursan, Toxicology , Vol. 1, No. 1, pp. 35-48, 1986.Doursan, Toxicology and Industrial Health , Vol. 4, No. 4, pp. 23-33, 1985.,清洁剂的限定值转换因子与安全因子将大鼠口服的 LD50,清洁剂的限定值采用NOEL的全部公式为：,Result,x Rinse or Diluent Volume,Surface

28、Area,x Recovery (decimal),LD50 mg/kg x (5.6 x 10-4) x 70 kg x BatchNP,1,x,Size,x,DoseNP,SFopt,Sampled 大部分公司仍执行1/1000的安全因子；就像基于治疗剂量的公式一样，尽管计算出的值是“可接受”的，这并不意味着你希望下一名患者摄入该剂量。 采用的安全因子的数值经常会由公司慎重决定，并且取决于生产环境的危险因素，可能受到污染的产品的风险以及残留物的性质。第6模块 限定值第 34页,清洁剂的限定值Resultx Rinse or Dilu,清洁剂残留可接受限度 清洁剂残留的可接受标准一般对最终淋

29、洗水取样分析清洁剂和溶剂的总残留，瞬息的分析方法如下： TOC（总有机碳）1010-6 紫外分光光度法吸光度0.05，波长范围210-360nm,限度和接受标准,清洁剂残留可接受限度限度和接受标准,2022年11月10日星期四,61,微生物残留可接受标准 清洗的微生物验证应该和清洗的化学验证同步进行； 棉签擦拭法：洗出液取样或压痕法采样； 淋洗液法：取定量的淋洗液过滤后，取滤膜培养。,24 九月 202261 微生物残留可接受标准,应该考虑何种微生物残余物，何时考虑?,如果您的最终产品，根据产品规格，需要限制生物负荷与内毒素，清洁验证则必须包括这两项 生物负荷包括细菌，酵母菌与霉菌。它们可以在

30、水系统与环境中出现，可能由原材料，设备与人员产生。 内毒素是一种脂多糖，见于葛兰氏阴性细菌的细胞膜；当细菌死亡时释放，进入血液循环时会引起患者发热。第6模块 限定值第 36页,应该考虑何种微生物残余物，何时考虑?如果您的最终产品，根据产,微生物与内毒素污染的特征是什么?, 生物负荷是由活体生物造成的，内毒素由活体系统产生，所以致热源负荷与生物负荷水平主要取决于环境条件, 设备是干燥，覆盖并密闭的吗?, 环境是否为无菌环境或至少清洁生产区域以减少活体/非活体微粒水平，并对温度与相对湿度进行控制？（对于生产与清洁设备储存都适用）, 环境条件由于四季更替会产生多大的变化？, 就像环境监测一样，生物负

31、荷与致热源评估不是一次,性行为, 推荐做法是，应该对生物与内毒素负荷水平进行监测，设定警报与行动值，并且在每一次超过限定值后进行适当的纠正行动。,第6模块 限定值第 37页,微生物与内毒素污染的特征是什么? 生物负荷是由活体生物造,微生物与内毒素污染的预防 可以采用某些方法以减少残余物，方法包括：去除法（如冲洗，擦洗）与杀灭/灭活法（如化学处理，干热） 杀灭微生物污染可能造成内毒素污染的可能性，除非杀灭方法同时也是一种去内毒素工艺（如干热） 清洁与消毒不能在一个步骤中完成： 残余物会影响化学制剂的穿透 冲洗，例如常用的清洁后冲洗可能引入额外的生物负荷 用于消毒的制剂往往是弱清洁剂，而清洁剂又不

32、适于,用于残余物消毒,第模块 限定值第 38页,微生物与内毒素污染的预防用于残余物消毒第模块 限定,65,取样方法的选择,有以下所知的三种取样方法：Swabbing Method 棉签擦拭法Rinse Sampling Method 冲淋取样法Placebo method 模拟法,65取样方法的选择 有以下所知的三种取样方法：,66,棉签擦拭法,优点： 直接对表面污染进行评估能将不溶物或难溶物从设备表面实际去除在最后数据评价中能够包括可接触但难于清洗部位的数据,66棉签擦拭法优点：,67,棉签擦拭法,缺点：不易在大型设备上实施从小面积获得的结果外推至设备的整个产品接触表面 不易对难接近的区域进

33、行取样,67棉签擦拭法 缺点：,68,棉签擦拭法,需考虑以下因素：Swab characterization, e.g. absorption capacity and interference 棉签特性，如溶剂吸收能力、干扰性Swab recovery, e.g. 70% 棉签回收率，如 70%Sampling locations and number of samples 取样位置和取样数量Sample surface area, e.g. 25 100cm2 取样面积，如25 100cm2Swabbing technique, e.g. direction and numbers of

34、strokes 取样方法，如擦拭方向和次数Saturation and extraction solvents 浸湿和萃取溶剂,68棉签擦拭法需考虑以下因素：,69,冲淋取样法,Advantages: 优点： Ease of sampling 易于取样 Evaluation of entire product contact surface 对整个产品接触表面进行评价 Evaluation of inaccessible equipments or ones that cannot be easily or routinely disassembled 可对难以接近、不易拆卸或日常生产中不拆卸

35、的设备进行评价,69冲淋取样法Advantages:,70,Disadvantages: 缺点： No physical removal of contaminant 不会实际去除污染物 Rinsing solvent may not reach inaccessible parts 冲淋溶剂或许达不到一些难以触及的部件 Use of organic solvents for water insoluble materials 对一些不溶于水的物质使用有机溶剂进行溶解,冲淋取样法,70Disadvantages: 冲淋取样法,71,模拟法,设备清洁干燥后，在该设备内进行模拟物料处理，然后取一部

36、份进行测试Discouraged vigorously by regulatory authorities due to： 法规部门强力不推荐使用此法，原因如下：No means to ensure residues are uniformly distributed throughout the equipment 无人能确保残留均匀地遗留在设备整个表面Residue of larger particle size not uniformly dispersed in placebo 较大颗粒的残留不能均匀地分散到模拟物料中,71模拟法设备清洁干燥后，在该设备内进行模拟物料处理，然后,72,

37、分析方法的选择,Basic requirements: 具备以下基本要求：Appropriate sensitivity to the calculated limit 适宜的灵敏度，可检测到计算出的限度Practical and rapid, as much as possible use instrumentation existing in company 实用、快速，尽量使用公司现有的仪器Be validated in accordance with ICH, USP, EP and Chinese Pharmacopoeia requirements 按照ICH、美国药典、欧洲药典和

38、中国药典进行了验证Include a recovery study to challenge sampling and testing method 应包括回收率测试，该测试对取样方法和测试方法进行了挑战,72分析方法的选择Basic requirements:,73,分析方法的选择,Specific Methods: 特定法：Chromatographic method Highly specific, sensitive and quantitative (e.g. LC/MS, GC/MS, HPLC) 色谱法：具有高专属性、高灵敏度，并且可定量（如液质联用仪、气质联用仪、液相色谱仪）T

39、hin layer chromatography (TLC) Highly specific, moderately sensitive, semiquantitative 薄层色谱法：具有高专属性、适度的灵敏性，可半定量Specific ion meter Quantitative, only be used if active ingredient alone posses a specific ion 特定离子计：可定量，但只有当活性成分本身拥有一个特定离子时才能采用,73分析方法的选择Specific Methods:,74,分析方法的选择,Nonspecific Methods: 非

40、特定法：Spectrophotometric method in visible, infrared or UV ranges 分光光度法（可见区、红外区或紫外区）Total organic carbon (TOC) 总有机碳Other methods, e.g. pH, conductivity 其他方法，如酸度、电导率,74分析方法的选择Nonspecific Methods:,75,分析方法的验证,Should demonstrate the followings: 应证实以下要素： Accuracy (recovery) and range 准确度（回收率）和范围 Precision

41、精确度 Linearity 线性 Selectivity选择性 Detection limit 检测限度 Quantitation limit 定量限度 Stability of standard and sample solution 标准溶液和样品溶液的稳定性,75分析方法的验证Should demonstrate t,分析方法的验证,通常清洁分析方法验证包括取样方法验证和检验方法验证 棉签取样方法的验证： 取样过程需经过验证，通过回收率试验验证取样过程的回收率和重现性。通常取样回收率和检验方法回收率结合进行，总回收率一般（企业可以根据实际情况确定）不低于70%，多次取样回收率的相对标准偏

42、差应不大于20%； 棉签取样过程的验证实际上是对取样棉签、溶剂的选择、取样人员操作、残留物转移到取样棉签、样品溶出（萃取）过程的全面考察。,分析方法的验证 通常清洁分析方法验证包括取样方法验证和检验方,棉签取样方法的验证（续）,验证方法如下： 1）准备一块与设备表面材质相同的板材，如平整光洁的316L不锈钢板； 2）在钢板上划出100100的区域； 3）将5倍限度量的待检测物溶液，定量装入校验的微量注射器； 4）将其溶液尽量均匀地涂布在100100的区域内； 5）自然干燥或用电吹风温和地吹干不锈钢板； 6）用选定的擦拭溶剂润湿擦拭棉签，按下图所示进行擦拭取样； 7）重复以上规程3次；,棉签取样

43、方法的验证（续） 验证方法如下：,棉签取样方法的验证（续）,8）将擦拭棉签分别放入棉签管中，加入预定溶剂5ml，超声； 9）用经验证的检验方法检验，计算回收率和回收率的RSD。 下图为棉签擦拭取样方法：,第一步,第二步,棉签取样方法的验证（续） 8）将擦拭棉签分别放入棉签管中，加,2022年11月10日星期四,79,24 九月 202279,淋洗液取样方法的验证,通常淋洗法限度检查不需做回收率验证：定量检查应做回收率验证，可以利用淋洗溶剂冲洗已知量（在限度附近）的分析物确定回收率，回收率通常应不低于95%； 淋洗的取样方法为根据淋洗水流经设备的线路，选择淋洗线路相对最下游的一个或几个排水口为取

44、样口。分别按照微生物检验样品和化学检验品的取样规程收集清洁程序最后一步淋洗即将结束时的水样； 淋洗法样品可对冲洗液直接检测，也可对冲洗液做稀释后检测；无论直接检测还是稀释检测都应在接到样品后首先将样品同空白溶剂做视觉检查，确定是否有颜色差异和异物存在；如果有述现象发生，可直接判定样品不合格。,淋洗液取样方法的验证 通常淋洗法限度检查不需做回收率验证：定,取样方法和取样点的确认,（2）取样点的确认 通常可能擦拭设备的全部表面，因此，应该选择设备的最差区域作为取样点。这些区域应在清洁难度和残留水平方面代表着对清洁规程最大程度的挑战，例如：料斗的底部、桨拌桨叶底部和阀门的周围。 如果进行微生物取样，

45、取样计划应包括微生物的可能最差区域，例如：较难靠近的地方以及可收集水的排水区域。微生物和化学取样应在不同区域进行，测试方案中应包括设备及其取样点的描述或图表。,取样方法和取样点的确认 （2）取样点的确认,分析方法的验证,通常清洗分析方法分为限度检查和定量检查，不同的检查方法验证的参数也不相同。 （1）回收率 回收率的分析方法验证已在取样方法的验证中详细描述，不在此赘述。 （2）精密度 精密度系指在规定的条件下，从同一个均匀样品中，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。通常用相对标准偏差（RSD）来表示。定量检查的RSD应不大于10%。 淋洗法和棉签法用于限度检查通常不需要做精密度实验。,分析方

46、法的验证 通常清洗分析方法分为限度检查和定量检查，不同,分析方法的验证,（3）线性/范围 线性系指在设计的范围内，测定结果与试样中被测物浓度呈正比关系的程度。 范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 定量检查应至少测试5个浓度范围并且包含清洁的最低限和最高限度，线性的相关系数应不低于0.98%；浓度范围应达到残留物限度的50%-150%。 淋洗法和棉签法用于限度检查时不需做线性/范围验证。,分析方法的验证 （3）线性/范围,分析方法的验证,（4）检测限和定量限 检测限系指在确定的试验条件下，试样中被测物能被检测出的最小量；定量限系指在确定的试验条件下，试样

47、中被测物能被准确测定的最小量，其测定结果应具有一定准确度和精密度。 淋洗法和棉签法用于限度检查只需做检测限实验。 通常检测限是指信噪比为3：1时被分析物的浓度，定量限是指信噪比为10：1时被分析物的浓度。,分析方法的验证 （4）检测限和定量限,分析方法的验证,（5）专属性 专属性系指在其他成分（如：杂质、降解产物、相似物等）存在下，分析方法能准确测出被测物的特性。 评价空白溶剂、分析系统、棉签本身是否有干扰。 通常采用的验证方法为：进针空白溶剂评价溶剂干扰、进样量为0评价系统干扰、进针棉签浸泡的溶剂评价棉签干扰。 （6）样品溶液稳定性 通常样品室温或5冰箱冷藏放置24-72小时，测定结果应不低

48、于原值的90%。,分析方法的验证 （5）专属性,分析方法的验证,（7）系统适用性 定量检查测定时，应制备2份对照品，对照品一致性检查应为不超过5%；对照品的RSD不应超过10%。 （8）限度检查时溶液的进样顺序 限度检查测定时测定顺序依次为空白溶剂、样品、对照品。 下面是限度检查和定量检查时所需验证的参数：,分析方法的验证 （7）系统适用性,限度检查和定量检查时所需验证的参数,检查方法,参 数,限度检查和定量检查时所需验证的参数,88,计划及执行,一般来说，以下部门参与清洁验证： Production 生产部 Engineering 工程部 Research & Development 研发人

49、员 Validation 验证人员 Quality Control 质量控制 Quality Assurance 质量保证,88计划及执行一般来说，以下部门参与清洁验证：,89,计划及执行,应编写一个综合的清洁验证主计划，其至少包括以下内容： Purpose 目的 Overview of site/facility/area 厂房/设施/区域的概括描述 Overview of manufacturing processes 生产工艺概括描述 Overview of cleaning methods 清洁方法的概括描述 Responsibilities of various department

50、s 各部门的职责 Cleaning validation policy 清洁验证的策略,89计划及执行应编写一个综合的清洁验证主计划，其至少包括以,90,计划及执行,清洁验证主计划应至少包括以下内容（续）： List of equipments and products 设备和产品明显表 Product and equipment group, if applicable 产品和设备组（如适用） Worst-case product and equipment, if applicable 最坏条件产品和设备（如适用） Calculation of contamination limit 污染