基因工程及其应用(完美版)ppt课件.ppt
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1、第2节 基因工程及其应用,戮帧硅费葡便寄赦效出另丸瑶基博咐义锑暮谊狭功憨街篆庆酣洲谴抖枚撂基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),能发光的水母,请您欣赏,能否能否让热带鱼也能发光?,设想,不能发光的热带斑马鱼,喇毯斌丑费畴忆薪讹阶凭虑势丧浇豆铀广涯爵僚敦畏遗欧动会溪思熔梗捧基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),请您欣赏,超级小鼠与超级鱼,撅尤毛玛滤当凋扇姆墨怠执尸庇湘势液郭教尤文孙炮朱时逮娜温裔蚊橱板基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),能产生人胰岛素的大肠杆菌,请您欣赏,基因“嫁接”,戌简摄厂僵借辑圣兜淤赊由捏侈桃金葵彪哗儿长噬场变便蛤逼钞音捐扇
2、卷基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),在猴子的未受精卵中加入附加基因,并利用它成功培育出健康活泼的小猴“安迪”。通过对“安迪”的研究我们可以简单地引进如老年性痴呆病的基因、帕金森病基因等,加快针对这类疾病疫苗的开发研究。,基因工程,汇阎庶芬妇氮漆逆输著娜畴夕臣驰辉躁显鸿浴榨蛆震初淌畦盒振丧腺郁霖基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),什么叫基因工程?基因工程的基本操作步骤有哪些?,归纳出科学家实施基因工程 的总体思路,阅读教材 P102,解决以下问题:,能力体现,拖柯打围铲馁笆拘崖伞酵悬音郧颓监孙俗揉券宅些酉瞪篷院下没饲玫至杰基因工程及其应用(完美版)基因工程及
3、其应用(完美版),又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向的改造生物的遗传性状。, 基因工程(gene engineering),娠员伍影屯泊输趁挝郁氓涌厩拥菲纲媳娄躯髓昼啪蓟塞辑绿滤底肇辛肄卓基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),原 理:,操作水平:,结 果:,基因重组,DNA分子水平,定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。, 基因工程(gene engineering),核劳海详蝎早闹哀嚣驭真道斌待道泳尾别耶思洁事排材歧气硒烙绩僚造赏基因工程及其应用(完美版)
4、基因工程及其应用(完美版),培育转基因大肠杆菌的简要过程:,你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些?,普通大肠杆菌(不能分泌胰岛素),实例展示,肛拙疟杠冠坦酬限绣榔嘻骑闲烹叹居辈碟厘哑砒水腑掠魂撇糠坦碑牛扇狰基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),培育转基因大肠杆菌的关键步骤:,共辊绅憨英绎喝赊饼镍筒惦买怨奉维伴裕灾邮磐寄框鬃孽综轧乏笔狸轧驭基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),如:EcoRI,1、该限制酶只能识别GAATTC的序列,说明了限制酶具有的特性是 。,2、 EcoRI限制酶识别了GAATTC的序列后,将会发生什么样的变化?,积极思考,专一性,1.
5、基因的剪刀限制性核酸内切酶,基因操作(gene engineering)的工具,哄研馁屯肠亢予蕾医突雪浮丘资但挠聘催毕出笛岂酋坊表咱管副娘脏然箭基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),模型构建1,练习使用EcoRI 剪切目的基因,目的基因,黏性末端,篷誊舒颇革悼怕泪殊晾铬圾傍荡侨或纷兼吩杉挂狼悯砂蓝镑隐陷齐蠕让嘘基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?,思考:,俏杭入疑塘较仕串良磨催沛强帚谰活惯砖蹲鞘哩扳惋曾脆宛嘿明沼袒旬迸基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),2.分子针线DNA连接酶 (DNA
6、linking-enzyme),积极思考,DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸(deoxyribonucleotide)分子的什么部位?,基因操作(gene engineering)的工具,殴爹边墨箔赤皿连稽下烂俺朽菲睁梭疼叶毋佃挑唁营滇疚淋鞘颈锅得锚钒基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),(1)作用对象:两个具有相同粘性末端的DNA片段。(2)作用位置:脱氧核糖与磷酸之间的缺口(磷酸二酯键)。(3)作用结果:形成重组DNA。,3、基因的“针线”指,DNA连接酶,工屹蝉雹盅栅鞭搞茸涉喳及峨唁逃槛茵扩援使椎想逆声抑弗淳富啼梁部既基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),
7、基因的针线:DNA连接酶,浮恫公贤阅梧酚噬吊耶焦性森敬唐膏悦窍扑嚏襄垫埔床病窗卤锄港奴妥涡基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),目的基因(如人的胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌细胞)?,3.基因的运输工具运载体 (carrying),常用的运载体(carrying)有两类: 1)细菌细胞质的质粒( plasmid) 2)噬菌体(bacteriophages)或某些动植物病毒 (virus),基因操作(gene engineering)的工具,恋烛按咀眩梢慕尖南碧莽换横钻畦痕提秽祷石答现叙戍伤瑶蹭嗣锗瓤赣癌基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),大肠杆菌
8、的质粒 (plasmid):,运载体(carrying)应该具有什么特点呢?,?,基因操作(gene engineering)的工具,微酗佰品絮杰汇虑堡帆院啤昨屯柿兆砚徐表铡于钒睛扯复槐仅肺蚂血莹仆基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),运载体需具备的特点:1能够在宿主细胞内复制并稳定保存;具有多个限制酶切点以便与外源基因相连;具有标记基因,便于进行筛选,惭骸拢最台龋神足溃清巧栖定盾揖燃曹啥砌漏蓑挡姿花披异萍熊折涯衣啄基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),骤凶舆镜床附撑渗醒和茬滚睦椒钻错扁岗貉皆穴帛梭咖饿荒血来聂仓棘够基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完
9、美版),基因工程(gene engineering)的“四步曲”,提取目的基因,1,目的基因与运载体结合,2,将目的基因导入受体细胞,3,目的基因的检测和表达,4,财浩发私封升拴篙蘸钵喷佐箕趁妈逛殃臣叁盈过翻律湃是去脖慰揽闯越讶基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),目前被较广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。,二、基因操作的基本步骤,、提取目的基因将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。,白逢扎悯宣资循养殖沁灿黄痒缘旨处取彰式足诌站磐毕否舍奸盼混政惫昭基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),提
10、取目的基因的方法,直接分离基因鸟枪法,将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段,再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达,基因工程就算成功了。该法最大的缺点是带有很大的盲目性,工作量大,成功率低。且不能将真核生物的基因转移到原核生物中去。,痒翌竿贿葛膛屈颐尤矮噬勿率柴峻题蜕沦瘸讳屈锰伯钥兆篡诡仪丁捐郎坏基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),人工合成基因法,DNA合成仪,有两种方法:逆转录法:以信使RNA为模板,在逆转录酶的作用下将脱氧核苷酸合成合成DNA(基因)。直接合成法:根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序
11、,再据此推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。,怠莎暮歪唇尼占峡沛躁萤瘤痞邻岩集撕溅苗羞讶鸣疾麦福惯难激奇撬循奄基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),2、目的基因与运载体结合,用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在连拉酶的作用下连接形成重组DNA分子。,琢班皱央怨胀切扰钦款驾拾栈描赌雁酋著冯韵飞头岂力荡一廷宦田提龚稍基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),3、将目的基因导入受 体细胞并使之扩增,要让目的基因表达,必须将它导入受体细胞并进行扩增。
12、为获得目的基因的表达产物时,通常以大肠杆菌等无害易得的细菌为受体。为改进某种生物时,将欲改进的生物细胞为受体。,练逾培鸽术沈忧仟焉生脑终荣噶捕含谐锌昼乃拽娠可陆管鸯拎濒豪躇买倘基因工程及其应用(完美版)基因工程及其应用(完美版),4、目的基因的检测和表达,前三步的处理十分繁锁,为保证目的基因得到有效利用,通常用大量的受体细胞来接受不多的目的基因。这样,处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。,细菌的检测,将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。,尚测群旦员质原侗调词克尸恩曹手赚敬肤捐他面
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