二章染色体与DNA3课件.ppt

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1、第二章 染色体与DNA3 PPT课件,第二章 染色体与DNA3 PPT课件,第二章-染色体与DNA3-课件,第二章-染色体与DNA3-课件,第二章-染色体与DNA3-课件,该系统识别母链的依据来自Dam甲基化酶，它能使位于5GATC序列中腺苷酸的N6位甲基化。一旦复制叉通过复制起始位点，母链就会在开始DNA合成前的几秒种至几分钟内被甲基化。,该系统识别母链的依据来自Dam甲基化酶，它能使位于5GAT,图2-29碱基错配修复过程示意图,图2-29碱基错配修复过程示意图,2.5.2 切除修复,碱基切除修复（Base-excision repair）所有细胞中都带有能识别受损核酸位点的不同的糖苷水解

2、酶，能特异性切除受损核苷酸上的N-糖苷键，形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。,2.5.2 切除修复 碱基切除修复（Base-exc,图2-30 DNA分子中常见的几种核苷酸非酶促转变反应a.脱氨基反应,图2-30 DNA分子中常见的几种核苷酸非酶促转变反应,图2-30 DNA分子中常见的几种核苷酸转变反应b.脱嘌呤反应（N-糖苷键被水解）,图2-30 DNA分子中常见的几种核苷酸转变反应,DNA repair bybase excision,DNA分子中一旦产生了AP位点，内切酶就会把受损核苷酸的糖苷-磷酸键切开，移去AP位点附近小片段DNA，并由DNA聚合酶I和DNA连接酶共同完成修复

3、。,DNA repair byDNA分子中一旦产,核苷酸切除修复（nucleotide-excision repair）,当DNA链上相应位置的核苷酸发生损伤，导致双链之间无法形成氢键，则由核苷酸切除修复系统负责修复。,核苷酸切除修复（nucleotide-excision r,DNA repair bynucleotide excision,损伤发生后，首先由DNA切割酶(excinuclease)在已损伤的核苷酸5和3位分别切开磷酸糖苷键，产生并移去DNA小片段，然后由DNA聚合酶合成新片段，并由DNA连接酶完成修复中的最后步骤。,DNA repair by损伤发生后，首先由,大肠杆菌和人

4、类细胞中的核苷酸切除修复过程示意图,大肠杆菌和人类细胞中的核苷酸切除修复过程示意图,在原核生物中受损核苷酸3端的第5位，5端的第8位磷酸糖苷分别被DNA切割酶切开。在人类细胞中，受损伤核苷酸3端第6位，5端的第23位磷酸糖苷键分别被DNA切割酶切开。,在原核生物中受损核苷酸3端的第5位，5端的第8位磷酸糖苷,2.5.3 重组修复(Recomhinant repair),又称“复制后修复”，发生在复制之后受损伤的DNA链复制时，产生的子代DNA在损伤的对应部位出现缺口。完整母链DNA与有缺口子链DNA进行重组交换，将母链上相应片段填补子链缺口处，而母链出现缺口。以另一条子链DNA为模板，经DNA

5、 pol合成一新DNA片段填补母链缺口，最后由DNA ligase连接完成修补。,2.5.3 重组修复(Recomhinant repair),2.5.4 DNA的直接修复（direct repair）,生物体内还存在DNA损伤直接修复而并不需要切除碱基或核苷酸的机制。DNA光解酶（photolyase）能把在光下或经紫外光照射形成的环丁烷胸腺嘧啶二体及6-4光化物（6-4-photoproduct）还原成为单体。,2.5.4 DNA的直接修复（direct repair）,紫外光诱发形成嘧啶二体,紫外光诱发形成嘧啶二体,此外，生物体内还广泛存在着使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基化的甲基转移酶，以防止

6、形成G-T配对。,O6-甲基转移酶使O6甲基化鸟嘌呤恢复成鸟嘌呤,此外，生物体内还广泛存在着使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基化的甲基转,2.5.5 SOS反应（SOS response）,SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。修复结果只是能维持基因组的完整性，但留下的错误较多，又称为错误倾向修复（error-prone repair），使细胞有较高的突变率。,2.5.5 SOS反应（SOS response）,SOS反应主要包括DNA的修复：有利于细胞存活产生变异：导致细胞癌变或进化,SOS反应主要包括,2.6 DNA的转座（DNA Trans

7、position）,DNA的转座，或称移位（ransposition），是由可移位因（transposable element）介导的遗传物质重排现象。,2.6 DNA的转座（DNA Transposition）,2.6.1转座子的分类和结构特征,转座子（transposon，Tn）是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 转座子分为两大类： 插入序列（insertional sequence） 复合型转座子,2.6.1转座子的分类和结构特征 转座子（transp,插入序列（insertional sequence，IS）,最简单的转座子不含有任何宿主基因而常被称为插入序列（inse

8、rtional sequence，IS），它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。一个细菌细胞常带有少于10个IS序列。,插入序列（insertional sequence，IS）最,常见的IS序列都是很小的DNA片段（约1kb），末端具有倒置重复序列，转座时常复制宿主靶位点415bp的D N A形成正向重复区。大部分IS序列只有一个开放读码框，翻译起点紧挨着第一个倒置重复区，终止点位于第二个倒置重复区或附近。IS1含有两个分开的读码框，只有移码通读才能产生功能型转座酶。,常见的IS序列都是很小的DNA片段（约1kb），末端具有倒置,第二章-染色体与DNA3-课件,表2-14 IS序列的结

9、构特征比较,表2-14 IS序列的结构特征比较,复合式转座子（composite transposon）,是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。一旦形成复合转座子，IS序列就不能再单独移动，因为它们的功能被修饰了，只能作为复合体移动。,复合式转座子（composite transposon）是一,第二章-染色体与DNA3-课件,除了末端带有IS序列的复合转座子以外，还存在一些没有IS序列的、体积庞大的转座子（5 000bp以上）TnA家族。常带有3个基因，一个编码-内酰胺酶（AmpR），另两个则是转座作用所必须的。所有TnA类转座子两翼都

10、带有38bp的倒置重复序列。,除了末端带有IS序列的复合转座子以外，还存在一些没有IS序列,2.6.2真核生物中的转座子,1.玉米中的控制因子（controlling element）玉米中的控制因子分为两类， 自主性因子：具有自主剪接和转座的功能； 非自主性因子：单独存在时是稳定的，不能转座，当基因组中存在与非自主性因子同家族的自主性因子时，它才具备转座功能。同一家族的自主性因子能为非自主性因子的转座提供反式作用蛋白（转座酶）。,2.6.2真核生物中的转座子1.玉米中的控制因子（contr,（1） Ac-Ds系统,在著名的Ac-Ds体系中，自主转座子Ac长4563bp，转录生成3 500bp

11、的单一成熟RNA。Ac转座子的两翼有11bp的倒转重复序列，在其靶DNA位点复制形成8bp正向重复。,（1） Ac-Ds系统在著名的Ac-Ds体系中，自主转座子A,已知所有Ds都是Ac转座子的缺失突变体，其两端有完整的转座特征序列。,已知所有Ds都是Ac转座子的缺失突变体，其两端有完整的转座特,Spm-dSpm系统,Spm（suppressor-mutator）和En（enhancer）属于另一类转座子。Spm和En几乎是完全相同的，它们只有不到10个碱基的差异，两端各有一个13bp的倒置重复序列，在其靶DNA位点复制形成3bp正向重复。,Spm-dSpm系统Spm（suppressor-mu

12、tat,转座子Spm/En和dSpm非自主转座子的结构比较,转座子Spm/En和dSpm非自主转座子的结构比较,Spm和En的转录区（即tnpA基因）有8300bp，成熟mRNA为2500bp。tnpA基因产物的主要功能是切割转座子序列。另有两个开放读码框位于tnpA基因的内含子中，其mRNA的含量大约只有tnpA基因产物的1%。由tnpB基因编码的这两个蛋白可能直接与转座子两端13bp倒转重复区相结合，有利于DNA的切割和转移。所有dSpm（defective Spm）都是功能型Spm的缺失突变体。,Spm和En的转录区（即tnpA基因）有8300bp，成熟m,2果蝇中的转座子,果蝇中的Co

13、pia转座子具有数百bp的末端正向重复和类似于酵母Ty转座子及RNA肿瘤前病毒的结构，能以高速度转录并产生有多聚腺苷化末端的RNA。只具有一个长的可阅读框架，基因产物与RNA肿瘤病毒逆转录酶有较高的同源性。,2果蝇中的转座子果蝇中的Copia转座子具有数百bp的末端,图2-38真核生物细胞内存在不少结构上类似于反转录病毒的反转录转座子。这类转座子都编码一个与反转录病毒中的反转录酶高度同源的转座酶，左右两边都是与病毒边界序列LTR同源的重复序列。,图2-38真核生物细胞内存在不少结构上类似于反转录病毒的反转,P转座子（P element）属于非复制型，两翼都有31bp倒置重复序列，转座后导致靶D

14、NA复制产生8bp正向重复序列。有实验证明，P转座子插入果蝇基因组W位点引起杂种不育。,P转座子（P element）属于非复制型，两翼都有31bp,P转座子的原初转录产物为2.5或3.0kb，包括外显子0、1、2、3及3个内含子。,P转座子的原初转录产物为2.5或3.0kb，包括外显子0、1,P转座子与杂种不育,P转座子与杂种不育,转座引起插入突变。各种IS、Tn转座子都可以引起插入突变。如果插入位于某操纵子的前半部分，就可能造成极性突变，导致该操纵子后半部分结构基因表达失活。转座产生新的基因。如果转座子上带有抗药性基因，它一方面造成靶DNA序列上的插入突变，同时也使这个位点产生抗药性。,转座的遗传学效应主要有以下几方面：,转座引起插入突变。各种IS、Tn转座子都可以引起插入突变。,转座产生的染色体畸变。当复制性转座发生在宿主DNA原有位点附近时，往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组，引起DNA缺失或倒位。若同源重组发生在两个正向重复转座区之间，就导致宿主染色体DNA缺失；若重组发生在两个反向重复转座区之间，则引起染色体DNA倒位转座引起的生物进化。由于转座作用，使一些原来在染色体上相距甚远的基因组合到一起，构建成一个操纵子或表达单元，也可能产生一些具有新的生物学功能的基因和新的蛋白质分子。,转座产生的染色体畸变。当复制性转座发生在宿主DNA原有位点,