总胆固醇标准操作规程（TCh）.docx

版本：VI：AO执行日期：-05-02共6页标准操作程序StandardOperatingProcedures标准操作程序项目：总胆固醇方法：酶法文件编号ELK-SH-SOP-07-09编写者日期审核者日期批准者日期颁发部门或个人接收部门或个人院长办公司保管者院档案室保管者医务科保管者检验科主任临床化学检验室发布日期：年4月2日实施日期：年4月3日为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量,特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISOI5189医学实验室关于质量和能力的特殊要求及WS/T227-2002临床检验操作规程编写要求的有关规定并结合产品实际情况制订,作为本产品的标准操作程序。本规程从年5月2日起实施，每2年复审1次。本规程由有限公司编制。本规程起草单位：伊利康生物技术有限公司技术部。本规程主要起草人：XXXXXXX、XXXXXXXXXX、XXXo本规程首次起草。有限公司技术部年4月2日1检验申请32标本采集与处理33试剂及成份44方法原理45仪器46校准液及校准模式47质控品与室内质控规则48标本检测步骤59结果计算510操作性能511试剂使用的注意事项512参考范围及医学决定水平513检验结果的报告及范围514临床意义615结果审核分析以及相关项目的联系616威胁生命的“紧急值”及报告规定617有关引用程序与文件618参考文献附录AXXX型生化分析仪参数总胆固醇测定标准操作规程L检验申请单独检验项目申请：血清总胆固醇（TotaIChoIeStero1；,缩写TCH）测定；组合项目申请：血脂测定。临床医生根据需要提出检验申请。2.标本采集与处理2.1 受检者的准备：采血前2周保持平时的饮食习惯，3d内避免高脂饮食，24h内不饮酒，空腹12h后采集标本。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2 标本采集2.2.1 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。2.2.2 检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。2.2.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.2.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.2.5 下列标本为不合格标本2.2.5.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.252对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、黄疸和浑浊的标本。2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。2.254其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.3标本处理2.3.1 接收标本在30min内将标本离心分离出血清。吸出血清/血浆。处理样品时要将其当成生物污染品。2.3.2 标本保存时间：室温（1525°C）下可稳定Id,普通冰箱中（28）稳定7d。-20°C可保存数月；-70°C至少保存半年；避免反复冻溶。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过Id的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.3.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置28冰箱内保存7d。2.4标本的注意事项2.4.1 不建议采集抗凝标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。2.4.2 妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。2.4.3 采血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。2.4.4 血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。3 .试剂及成份3.1 试剂本科使用的总胆固醇检测试剂盒，由技术有限公司生产,产品货号为:XXX,试剂为液体试剂，其组份如下：主要组成份浓度Good,S缓冲液100mmolL4-APP0.25mmolL4-羟基苯甲酸钠4mmolL胆固醇酯酶300U/L胆固醇氧化酶500U/L过氧化物酶2500U/L3.2 试剂盒保存及效期未启封试剂盒在28保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定28do开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。新打开试剂不宜与己用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。3.3 试剂盒准备液态试剂型，即开即用，无特殊准备。4 .方法原理4.1 测定方法：终点比色法。4.2 原理：胆固醇酯水解酶（CEH）将血清中的胆固醇酯（CE）水解成游离胆固醇（ChOL）,胆固醇氧化酶（CHOD）将水解生成的胆固醇和血清中原来存在游离胆固醇氧化成A4-胆番烯酮，并产生过氧化氢（H202）,最后在过氧化物酶（POD）的作用下H202与4-氨基安替比林（4-AAP）和酚（三者合称PAP）缩合，生成红色醍亚胺色素（Trinder反应）。醛亚胺在500-55Onln波长处有吸收峰，吸光度与标本中胆固醇呈正比。胆固醇酯酶胆固醇酯+H2O胆固醇+脂肪酸胆固醇氧化酶胆固醇+02胆淄烯酮+H2O2过氧化物酶H2O2+4-氨基安替比林+苯酚醍亚胺+H2O5 .仪器XXXX型号仪器。6 .校准品与校准模式6.1 校准品：使用复合校准血清或使用试剂盒提供的水标准液。6.2 标准类型和校准点数目：线性模式，n个校准点。6.3 校准周期：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标。7 .质控品与室内质控规则7.1 质控品采用由XXX公司提供的两个不同水平定值质控血清。7.2 质控液重建方法：用蒸储水溶解质控品，轻轻混匀，20min后即可使用。7.3 质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控血清各一次。7.4 质控规则：采用WeStgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。8 .标本检测步骤装载试剂一进行校准-进行质控-输入标本检测项目-加载标本-标本测定-结果复核-报告。9 .结果计算Asi®血清中总胆固醇浓度（mmolL）=XCA标准式中：Aifl标本管吸光度；A标准标准管吸光度；C校准中液总胆固醇浓度（mmol/L）；10 .操作性能10.1 精密度：批内CVW4%,批间相对极差CVW6%。10.2 准确度：测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。10.3 线性范围：15mmolLL（血清与试剂用量之比为1:100时）10.4 方法的有限性及干扰因素：10.4.1 血清中多种非胆固醇富醇液可参加与测定反应，但一般人血清中非胆固醇备醇约占总胆固醇的1%,因此这种影响可以不计。10.4.2 血红蛋白高于2gL时会引起正干扰；胆红素170molL时有明显负干扰。抗坏血酸0.5gL时会引起负干扰。高甘油三酯血症（血清混浊）一般无明显影响。11 .试剂使用的注意事项11.1 本试剂仅应用于体外诊断。11 .2扔弃废物应符合当地的法规要求。12 .参考范围及医学决定水平合适胆固醇范围：2.835.17mmol/L临界高胆固醇范围：5.176.45mmol/L高胆固醇范围：>6.45mmol/L13 .检验结果的报告及范围13.1 结果的报告13.1.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。13.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。13.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。13.2 报告范围：血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为15mmolL0超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。14 .临床意义14.1 总胆固醇除了可以作为高胆固醇血症的诊断指标之外，不是其他任何疾病的诊断指标，对于动脉粥样硬化和冠心病而言，TCH是一个明确的危险因子，与冠心病的发病率呈正相关，总胆固醇水平每增加1%,冠心病的危险性增加2%。14.2 影响总胆固醇水平的因素有：年龄与性别，TCH水平往往随年龄上升，但到70岁或80岁后有所下降，中青年女性低于男性，50岁后女性高于男性；长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使总胆固醇增高；遗传因素；其他，如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使总胆固醇升高。14.3 高胆固醇血症有原发性与继发性两类。原发的如家属性高胆固醇血症、低密度脂蛋白受体缺陷症、家属性apo-B缺陷症、多源性(PlOygeniC)高胆固醇、混合性高脂蛋白血症。继发的见于肾病综合征、甲状腺机能减退、糖尿病、妊娠等。14.4 低胆固醇血症也有原发的与继发的，前者如家属性的无B或低B脂蛋白血症；后者如甲亢、营养不良、慢性消耗性疾病等。严重肝病病人血清总胆固醇不一定很低，但由于血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶活力低下，血清胆固醇酯占总胆固醇的比例可低达50%以下。14.5 不应凭一次血脂检测结果作出血脂水平异常的诊断，有怀疑时应在两月内进行再次或多次测定，且两次测定至少要相隔一周；在判断是否存在高脂血症或决定防治措施之前，至少应有两次血脂检验的记录。15 .结果审核分析以及相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3 相关项目：审核与血脂其他指标和载脂蛋白等的关系，总胆固醇浓度主要与LDL-C、HDL-C呈正相关。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 .威胁生命的“紧急值”及报告规定通常无威胁生命的“紧急值”。17 .有关引用程序与文件17.1 XXX型自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2 生化检验室内质控标准操作程序。17.3 检验结果审核程序。17.4 标本送检和接受程序。18 .参考文献18.1 .技术有限公司总胆固醇检测试剂盒说明书。18.2 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第三版）东南大学出版社2006附录AXXX型生化分析仪参数