委陵菜叶斑病病原菌分离纯化.docx

委陵菜叶斑病病原菌分离纯化对委陵菜病'杏标本进行病原菌的分离纯化，初步认为采集病需标本为两种病害，分别为白菜软腐病和黑腐病，查阅文献病原菌分别为野油菜黄单胞杆菌野油菜黑腐病致病变种(XanthomonasCampestrisp.cane.stris)和欧氏杆的属细菌(ErwiniacamtovoraPV.Carotovoru),具体内容如卜.：1材料与方法1.1 材料委陵菜病叶，2016年来自1.2 分离方法采用组织分离法，选取病斑明显的叶片，在无菌操作条件卜.，以75%乙静浸泡30s后,用无蓄水冲洗3次后放入0.1%升汞中浸泡5min,再用无菌水冲洗4次。将经过表面消毒的叶片，用无菌戏纸吸干水分，在其病健交接位置切取05cmXO.5cm的组织块，将其接种于9On直径的马铃第菊翻糖琼脂培养基(PDA)平板上，于25C恒温培养箱中光照培养3-5<1.将分离得到的菌落接种于PDA上纯化,并将纯化得到的菌株置于P1.)A斜面中，4C低温保存.1.3 致病性制定采用伤口离体接种法，即刺伤接种部位再进行接种。