WATERS_2695,2487,2414,2998高效液相色谱仪操作规程.doc

WATERS 2695/2487/2414/2998高效液相色谱仪操作规程1. 目的：为使对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用规范化，特制定本规程。2. 范围：涉及对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用。3. 职责：QC检验员应严格遵守本规程。4. 内容： 4.1开机4.1.1接通电源，打开电脑主机、显示器的开关，进入Windows画面。4.1.2 打开Alliance 2695系统的电源，仪器进行自检，“Idle”状态表示开机测试正常。 4.1.3 Wet Prime冲洗：少量气泡，执行Wet Prime。A利用方向键将光标移至“composition”字段，将欲Wet Prime的溶剂输入100%。B按“Direct Function”功能键，选择Wet Prime，按“OK”。C选择流速和冲洗时间，按“OK”。D重复上述步骤直至所有溶剂做完Wet Prime。4.1.4 Dry Prime冲洗：大量气泡或者通道走空，执行Dry Prime。A按“Direct Function”功能键，选择Dry Prime，按Enter。B利用方向键将光标移至各通道，选择待Dry Prime的通道。B同时打开阀门，用注射器帮助排液D重复上述步骤直至所有溶剂做完Dry Prime。 4.1.5设定溶剂：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“composition”字段，将所需溶剂输入适当的百分比。4.1.6设定流速：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Flow”字段，输入所需流速。4.1.7脱气：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Degasser”位置，按Enter，利用上下键选择所需要的模式（On:除气装置开启；Off：除气装置关闭）4.1.8置入转盘A打开样品转盘舱门，屏幕会显示A、B、C、D、E五个转盘，按A可取出A盘（每个转盘上可放置24个样品瓶，共计120个）。B将样品瓶放入样品转盘内并记录各瓶号名称。C当所有转盘都放入时，关起舱门转盘会自动定位。4.2根据样品检测的需要，打开检测器电源，仪器进行自检。4.2.1 2487双通道紫外可见检测器/2998二极管阵列检测器自检后，同时按shift和lamp，根据仪器画面的提示开灯。4.2.2示差检测器自检后，按“shift”键，再按“1”，控制面板左上角出现图标，显示参比池开通，用流动相低流速冲洗过夜；再按“shift”和“1”键，用流动相平衡样品池，直至极限平稳。4.3登陆Empower工作站：打开电脑显示器及主机，双击“Empower登录”，在用户名处输入“hanmi”，在密码处输入“123456”,在“高级”处选择“pro”，按“确定”，计算机进入Empower Pro的操作页面。4.4Empower工作站的操作4.4.1新建项目A单击鼠标左键进入“配置系统”B选中“项目”后，单击鼠标右键，选择“新建”-“项目”。C出现“新建项目向导”，在“选择新父项目”栏中为要创建的项目选择父项目，单击“下一步”。可以选择仪器自带的项目Defaults，也可选择其他项目。注意：不要随意更改Defaults项目！Ø 表空间中，接受默认值。如果需要，“”选“支持全面审计跟踪”，单击“下一步”Ø 单击“下一步”Ø 访问控制，单击“下一步”Ø 在“复制”中，接受默认的选项，单击“下一步”Ø 输入项目名称及注释D关闭窗口4.4.2数据采集A单击左键进入“运行样品”。B在左栏选择采集数据的项目，在右栏选中2695_2487或2695_2414或2695_2998（根据样品检测的需要），单击“确定”进入操作页面。C在“编辑”菜单中，选中“新建方法组”D出现对话框，点击“确定”E出现“新方法组-选择仪器方法”，可以在现有的仪器方法选择一个，或者单击“新建”来创建新的仪器方法Ø 如果单击了“新建”，就会出现“仪器方法编辑器”Ø 根据需要，编辑每个仪器的参数Ø 然后单击“文件”-“保存”或“另存为”，出现“保存当前的仪器方法”对话框Ø 在“名称”后的空格输入“仪器方法名”，单击“保存”保存仪器方法Ø 关闭“仪器方法编辑器”Ø 新建的仪器方法出现在仪器方法列表中F选中所要的仪器方法，单击“下一步”，出现“选择缺省方法”G选择“处理方法”与“报告方法”，如尚未建立合适的方法，也可不选。单击“下一步”，出现“命名方法组”，输入方法组名，必要时输入注释，单击“完成”H出现“方法组编辑器”。可根据需要进行编辑，或者暂不编辑，然后关闭窗口，回到运行样品窗口。I在“方法组”下拉菜单中选择欲使用的方法组，同时在右下方的“仪器方法”下拉菜单中，选择欲使用的仪器方法。J单击“监视器”键，观察基线K待基线平稳后，单击“停止”键，终止观察基线。L设定采集的参数样品名、功能、样品瓶、样品体积及运行时间，最后单击“运行”4.4.3数据的处理A建立处理方法Ø 单击鼠标左键进入“浏览项目”Ø 选择欲浏览数据所在的项目，然后单击“确定”进入该项目Ø 在“通道”选项卡中选择欲处理的数据，单击“查看”打开，或者双击打开Ø 在“查看”窗口，单击“处理”“提取色谱图”，设定处理波长（PDA检测器进行此项操作）Ø 在“查看”窗口，单击“文件”“新建处理方法”，或者单击“处理方法向导”选择编辑或新建处理方法，单击“确定”Ø 出现“新处理方法”对话框注意：PDA液相检测器选“PDA”，非PDA液相检测器（紫外、示差）选“LC”，“”选“使用处理方法向导”，然后单击“确定”Ø 在“积分-峰检测1”用鼠标选最窄峰宽以设定峰宽或者默认值，单击“下一步”Ø 在“积分-峰检测2”用鼠标选定一段基线设定积分阈值，单击“下一步”Ø 在“积分-积分区域”直接输入保留时间或者用鼠标左键拖拽选定积分区域，单击“下一步”Ø 在“积分-剔除峰”设定最小峰面积和/或最小高度，或者不做改动，单击“下一步”Ø “校正-普通”，单击“下一步”Ø 选择“否”Ø 在“校正-名称和保留时间”页中，在“名称”栏中，输入组分名称或不做改动。注意，输入组分的名字必须与组份表中的组分名称一致！Ø “校正-缺省量”单击“下一步”Ø 在“校正-内标样”依照方法选择“外表校正”或“内标校正”，单击“下一步”Ø 在“PDA纯化/匹配”针对“峰纯度”测试选择“是”；“PDA谱库匹配”选择“否”。注意：此项选择针对PDA检测器，非PDA检测器无此选项！Ø 在“PDA光谱对照”设定“噪音间隔”，用鼠标选取一段最平滑的基线设定纯度测试阈值，这段时间大于30s。注意：此项选择针对PDA检测器，非PDA检测器无此选项！Ø 在“处理方法名”中输入方法名，如果需要，输入“注释”，单击“完成”结束“处理方法向导”。注意，非PDA检测器的处理方法已设定完成！Ø 回到“查看”，选择“窗口”-“方法组”命令。注意：此项选择针对PDA检测器，非PDA检测器无此选项！Ø 确认“处理方法”和“波长”，然后，在“文件”项下，选择“保存”-“方法组”Ø 如果想同时计算多个通道（波长）的数据，可在提取一个或多个通道（波长），加入到方法组中Ø 添加通道（波长）后，也要保存到方法组中Ø 命名方法组，然后保存Ø 退出“方法组编辑器”：单击“文件”“退出”B数据的处理Ø 填写标准样品含量：回到“项目”窗口单击“项目”“改变样品”，选中所需的标准样，单击“工具”-“改变样品”Ø 再出现的“修改样品”菜单，选“编辑”-“含量”Ø 在出现的“组分编辑器”选“组分”-“从处理方法复制”Ø 选择建立好的处理方法，选择“打开”Ø 将处理方法中的峰名字拷入“组分编辑器”界面，填入标准样品相应组分的含量，点“确定”Ø 回到“修改样品”界面，选“文件”-“保存”，然后“退出”此界面，回到“项目”界面Ø 在“进样”或“通道”标签下，选择要处理的样品，选“工具”-“处理”Ø PDA检测器，选择“使用指定的方法组”命令，然后“确认”Ø 非PDA检测器，选择“使用指定的处理方法”命令，然后“确认”C 数据的查看Ø 在“结果组”或“结果”栏，点“更新”按钮，显示最新处理结果，选中相应的样品，点右键选“查看”命令Ø 查看谱图4.4.4数据的打印A单击“浏览项目”B选择欲打印数据所在的项目，然后单击“确定”，进入该项目C在“结果”选项卡中选择欲打印的结果，单击（预览出版）D出现“打开报告方法”对话框E选择“使用对选中的数据使用的报告方法”，或者在“使用一下的报告方法”下拉菜单中选择适当的报告方法，然后单击“确定”此时若选择“峰综合报告”格式，可计算峰面积/保留时间的重现性等统计信息F在屏幕的右侧即出现报。单击可预览报告G如预览后无误，单击打印报告4.4.5权限A新建用户时，设置用户类型，4.4.6项目的备份A进入“配置系统”B选择欲进行备份的项目，单击右键，出现快捷菜单，选择“属性”，出现“项目属性”窗口。在“数据文件”中查看数据大小。关闭窗口。C选择欲进行备份的项目，单击右键，出现快捷菜单，选择“备份项目”D出现“项目备份向导”Ø 输入“备份注释”，建议将数据文件大小输入，单击“下一步”Ø 在“选择目的地”页中，选择备份文件存放的路径，单击“下一步”Ø 在“备份显示”中，等待数据备份结束后，单击“下一步”Ø 单击完成，结束Empower软件对数据的备份4.4.7项目的还原A进入“配置系统”B在空白处单击右键，出现快捷菜单，选择“还原项目”C出现“还原项目向导”Ø 选择被还原的项目的路径，单击“下一步“Ø 在“输入磁盘空间配额”页中，输入项目名，并注意此处的“表空间配额”应不得小于欲还原的项目原有的配额（数据文件大小），单击“下一步”Ø 在“还原显示”中，等待数据还原结束后，单击“完成”Ø 被还原的项目出现在项目列表中4.4.8关机：A使用各页面右上角的关闭图标，依次关闭各页面，在Window 2000界面的左下角选择“开始”下的“关机”，单击“确定”，关闭计算机。B关闭检测器电源。C关闭Alliance 2695系统的电源（预先使流速为零）。D关闭稳压电源。4.实验中已收集满的废液瓶，贴上废液标签统一销毁。5.用潮湿的干净抹布擦拭仪器表面。6.当仪器5天以上不用时，需将液相仪的所有通道中充满甲醇，以免通道内长菌。