常见细胞因子及其检测方法.docx

常见细胞因子及其检测方法细胞因子是由免疫细胞(如单核、巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等)和某些小免疫细胞(内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等)经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子畏白质。其作用是通过结合相应受体调节细胞生长、分化和效应，调控免疫应答。细胞因子，是细胞分化和行使功能时的产物，相当于人体内各类细胞间相互交流的“信使”。它们被广泛地应用于医学诊断、抗癌治疗、免疫调节、以及自身免疫等多种领域。一、常见细胞因子细胞因子可分为白细胞介素(inter1.eukin,I1.)、干扰素(interferon,IFN)、肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)、集落刺激因子(co1.onystimu1.atingfactooCSF)、生长因子、趋化性细胞因子等。众多的细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用，同时具有多效性、重叠性、拮抗性、协同性等多种生理特性，从而形成较第杂的细胞因子调节网络，参与人体多种市要的生理功能。铀胞因子来源功能/效应I1.-1.a,I1.-IB单核、巨噬、树突状细胞、NK,B、内皮细胞通过增强细胞因子(如I1.-2及其受体)表达共刺激T细胞活化：增强B细胞增殖和成熟、NK细胞毒性：诱导巨噬细胞的I1.-1.1.1.-6、I1.-8、TNE,GM-巨F和PGE2的表达；诱导趋化因子和内皮细胞的ICAM-1、YCAM-1的表达起到促炎症作用：诱导发热急性期蛋白表达、书吸收。I1.-2Th1.诱导活化T细胞和活化B细胞的增殖；增强NK细胞毒活性，增强堆核细胞和巨噬细胞杀伤肿癌细胞和细菌能力。I1.-3T、NK、肥大细胞造血细胞前体生长和分化；肥大细胞生长。I1.-4Th2、TC2、NK、NKT、yT.肥大细胞诱导Th2细胞：刺激活化B、T、肥大细胞的增殖：上调B细胞、巨噬细胞MHCI类分子和B细胞的CD23;下调1.72产生从而抑制Th1.分化：增强巨噬细胞胞吞作用：诱导免疫球蛋白切换至IgG1.和IgE.I1.-5Th2、肥大细胞诱导喑酸和活化B细胞增殖：诱导免疫球蛋白切换至I1.-6Th2、单核、巨噬、树突、骨能基质细胞促进他系干细胞分化，促进B细胞分化为浆细胞：诱导急性期蛋白表达：增强T细胞增殖：对ThI7和Tfh.I1.-7骨髓和胸腺基质细胞诱导淋系干细胞分化为T系祖细胞和B系祖细胞：活化成熟T细胞。I1.-8CXCIS单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞介导中性粒细胞的趋化和活化。I1.-9Th诱导胸腺细胞的增殖：增强肥大细生长：与I1.-4诱导免疫球蛋白切换至gG1.和IgE有协同作用.I1.-IOT1.uTc.B、单核细胞、巨噬细胞抑制小鼠IFNy分泌,抑制人I1.-2分泌,抑制Th1.细胞:下调单核细胞、巨噬细胞、树突细胞的MHCH类分子和细胞因子（I1.T2等）产生,从而抑制Th1.分化：抑制T细胞增殖：增强B分化。I1.-I1.骨髓基质细胞促进早期B细胞和巨核细胞的分化：诱导急性期蛋白表达。I1.-12单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、B细胞Th1.分化关键性细胞因子；诱导Th1、CD8+T、yT,NK的增殖和IFNy的产生。增强NK细胞和CD8+T细胞毒作用.I1.-13Th2、肥大细胞抑制巨噬细胞的活化和细胞因子分泌：共剌激B细胞增殖；上调B细胞和单核细胞的MHCII1类分子和CD23表达：诱导免疫球蛋白表达切换为gG和IgE:诱导内皮细胞VCAM-I表达。I1.-15T、NK,单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、B细胞诱导T、NK、活化B细胞增殖,诱导冰CD8+T的细胞因子产生：T细胞的趋化因子之；刺激小肠上皮细胞生长.11-16Th、Tc诱导CD4+T、单核、嗜酸：诱导MHC1.类分子表达。I1.-17T细胞促炎性作用：刺激TNF、I1.-IB、I1.-6、I1.-8、G-CSF等因子表达。I1.-17ATh1.7,NK,中性类细胞促炎性作用；刺激上皮细胞、内皮细胞、纤维母细胞表达TNF、I1.TB、1.-6、I1.-8、G-CSF等因子。I1.-17FTh1.7、NK.中性粒细胞与I1.-17A相似。I1.-18巨噬细胞、树突状细胞诱导T细胞产生IFNy:增强K细胞毒作用.I1.-19单核细胞调节Th1.活性。I1.-20单核细胞、角质形成细胞调节皮肽炎症反应。I1.-21Th调节造血作用：NK分化；B细胞活化：T细胞共剌激：Tfh定向分化和存活。I1.-22T细胞抑制Th2的I1.-4产生。I1.-23树突状细胞诱导ThI培殖和IFNy产生;诱导Th1.7扩增和存活;诱导巨噬细胞表达促炎性因子（如I1.T、I1.-6、TNF）I1.-21Th2、单核细胞、巨噬细胞诱导TNF、I1.-1、I1.-6表达，诱导抗肿瘤活性。I1.-25Thk巨噬细胞、肥大细胞诱导I1.-4、I1.-5、I1.-13表达，诱导Th2相关病理变化。I1.-26T细胞、NK细胞增强上皮细胞产生I1.-8和I1.-IO.I1.-27树突状细胞、单核细胞诱导Th1.反应：增强IFNy产生。I1.-28树突状细胞、单核细胞1型IFN样活性，抑制病毒史制。I1.-29树突状细胞、单核细胞1型IFN样活性，抑制病毒及制。I1.-30抗原递至细胞1-27异聚体的P28亚单位,调节初始T细胞对I1.-12的反应能力：与I1.-12呈协同作用诱导IFNy表达。I1.-31T细胞促进皮肤炎症反应。11-32NK细胞、T细胞促进炎症反应：在活化介导的T细胞凋亡中起若定作用。I1.-33基质细胞、树突状细胞诱导Th2因子产生：介导嗜喊粒细胞和肥大细胞的趋化作用。I1.-34基质细胞、树突状细胞刺激单核细胞增殖和巨噬细胞前体形成。I1.-35Trcg对Th1、Th2、Th1.7产生免疫抑制作用,刺激Trcg增殖。I1.-360、I1.-36、I1.-36y角质形成细胞、其它屏障组织、中性粒细胞活化单核细胞、巨噬细胞、角质形成细胞产生多种促炎性因子，共刺激T细胞。I1.-37未知抗炎症作用,可能是I1.T8R的拮抗剂;小鼠中不表达。I1.-38未知抗炎症作用，I1.-36u同构体，可能是1.-36受体的拮抗剂。GM-CSFTh、巨噬细胞、纤维细胞、肥大细胞、内皮细胞刺激单核、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞的生长：活化巨噬细胞G-CSF纤维细胞、内皮细胞刺激中性粒细胞前体的生长。M-CSF纤维细胞、内皮刺激单核细胞前体生长.细胞、上皮细胞S1.F骨髓基质细胞刺激干细胞分裂（c-ki配体）TNF(TNEa)Th、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞、NK细胞、B细胞肿痛细胞毒作用；可导致恶液质：诱导细胞因子分泌：诱导内皮细胞E选择素产生;活化巨噬细胞:抗病毒。淋巴毒素（TNF）Th1、Tc肿油细胞毒作用；增强中性粒细胞和巨喙细胞的胞乔作用：参与淋巴器官发育：抗病毒。IFNa白细胞抑制病毒史制：增强MHCH类分子作用。IFN纤维母细胞抑制病毒宏制：增强MHC1.1.类分子作用。IFNyTh1、TcKNK抑制病毒及制：增强MHCn类分子作用:活化巨噬细胞:诱导免疫球蛋白表达切换至1.gG2a:拮抗I1.-4作用：抑制Th2增殖。TGFTh、B细胞、巨噬细胞、肥大细胞促炎性作用，例如诱导单核、巨噬细胞趋化作用：也可以抗炎性作用，例如抑制淋巴细胞增殖，诱导免疫球蛋白切换到IgA：促进组织修史1.1.F胸腺上皮细胞、计临基质细胞诱导急性期蛋白表达。E1.a-IT细胞刺激巨噬细胞的I1.-12产生，抑制I1.-10产生。OncostatinMT细胞、巨噬细胞诱导急性期蛋白表达。二、常见细胞因子检测方法1、E1.ISA测定陶联免疫吸附测定（E1.ISA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚藻乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。特点：稳定性好、提高检出率、分子量大，操作简单、快速、敏感性高、特异性强、实验设备要求简单、应用范围广泛、无放射性污染、能定性及半微量、微量、超微量定量分析，是目前应用最广，发展最快的前免疫学技术方法。2、CBA测定CytomctricBeadArTay(CBA)是指细胞因子微球检测技术。即微量样本多指标流式蛋白定量技术是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋臼定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。特点：样本用量少，多指标检测：操作方便，节省时间：同一样本同时检测，误差小，精密度高；标准曲线自动测定，专用软件自动计算，检测范围宽，灵敏度高；无酶-底物背景干扰。3、FCM测定流式细胞术是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术(门。WCytOMetry,FCM)是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。特点：可以检测依托流式平台检测同时检测多指标。4、RT-PCR测定细胞因子的mRNA寿命短且拷贝数低，因此难以在小量样本中进行检测。RT-PCR是一种能检测细胞内低丰度特异RNA的方法，其原理是首先以RNA为模板，在逆转录甑的催化下，合成与RXA互补的cDNo然后以CDNA为模板，用PCR技术对靶序列进行扩增,使微量细胞因子的RNA经放大后检出。RT-PCR能检出单个细胞中少于10个拷贝的特异RNA,如同时放大内参照物（如-ACt的），即可对RT-PCR检出的细胞因子mRNA进行定量。