加味桃红四物汤含量测定、指纹图谱以及抗氧化活性研究.docx

背景介钿桃红四物汤(TaoIioriKSiwuDccoclion,TSD)由红花、桃仁,当归、白芍、川芽、地黄6味药材组成，具有活血祛瘀、养血网经的功效.近年来随着对该方药理作用的深入研究，发现除传统功效之外，挑红四物汤还可表现出一定的神经保护、抗炎、降血脂等作用.踪此之外，桃红四物汤可表现出一定的抗氧化活性，其中的芳香酸类及其苜类成分被认为是桃红四物汤发挥抗氧化作用的主要效应物质基础.本文亮点1建立了加味桃红四物汤的HP1.C指纹图谱脂认并测定没食子酸、苦杏仁甘、绿原酸等12种成分的含,结果表明分商良好，化学成分信息丰富；2评价其抗轼化活性，为经典名方桃红四物汤在传统功效之外的开发利用提供理论依据.内容介绍1实验部分1.1 主要仪器与试剂1.2 色谱条件1.3 混合对照品溶液分别取I12号成分对应标准品(没食子酸、苦杏仁甘、绿原酸、芍药内酯甘、运基红花黄色素A、芍药昔、阿魏酸、洋川苜内酯I、毛混花糖苗、1.4-二4-(前萄糖氧洋基Q异丁基苹果酸酯、苯甲酸芍药昔、最本内酯）适量，精电称取后置于容量瓶中，加甲酹溶解并定容，分别得到质量浓度为3.33、5.72.2.86,3.16、2.68、3.33、3.39、3.18、2.95、3.23、3.29、4.00mg/m1.的对照品储卷液.1.4全方供试品溶液取I2g加味桃红四物汤标准煎液，将具温压浓缩后充分干燥，得到5.1g无流动性浸膏.2结果与讨论2.1 方法学考察2.1.1 由复性实验取加味桃红四物汤样品，分别根据1.4中方法平行制备6份供试品溶液。2.1.2 精密度实验取加味桃红四物汤样品，根据1.4中方法制得供试品溶液，平行6次注入HP1.C色谱仪.2.2 图谱生成及相似度评价根据1.4中方法制备IO批样品溶液（编号SI-SlO）,色诺条件同1.2,记录图谱，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，采用中位数法及多点校正，时间宽度0/min,生成对照图谱（见图1）.1.*J4-2卜一一11一A-.tuJA>_IaXA.-.*1.vUJj.J1.J-1.jJ.a.t.，.,斗-u.j卜一JabM-*>JAX*ft*1.*三k<-Aa.,GJ-1.J>uk1.V_XJ1.X11。批样居HPlC所仪黑iflHg.1HPlC11ng<fprnufor102th0，of“mpk>2.3鬃类分析使用HCIHmaPInUSIraIor软件,根据样品测定结果图2所示）.A.一.Ma.->-1-«4»一A-._Id4-M进行聚类分析（结果如2.4OP1.S-DA分析为了进一步研究不同批次间12种指标成分的具体含量差异r对样品测定结果进行正交偏最小二乘判别分析（OP1.S-DA）,分析结果见图3、4.0.100.05SI0三二N二一-0.05-0.10SS.S3-0.15一,一,一11一,-,一1-0.08-0.0400.040.08l.132t(lR2Xolj=0.385F1.IIipfte:Hotellir310廿样从的OPlS9A制分用JOPtS-OAxore仪5of10batcheso*M11>p'e¾412加成分的ViPtflF.4VlPMUQof12<omcc*nts3结论本研究建立了加味桃红四物汤HP1.C指纹图谱，同时测定了没食子酸.苦杏仁甘、绿原酸、芍药内酯昔、羟基红花黄素色，芍药甘、阿魏酸、洋川莒内酯I、毛茬花糖甘、1.4-二4-（葡萄糖氧）卡基1-2-异丁基苹果酸酯、茶甲酰芍药音、豪本内酯的含量，井测定其抗氧化活性.本方法采用指纹图谱定性与有效成分定相结合，出究结果表明其分离度良好，化学成分信息丰富,可对加味桃红四物汤进行整体性评价并反映其内在质量差异，为该制剂的质量控制提供了科学性参考，同时也为经典名方桃红四物汤在传统功效之外的开发利用提供理论依据.