酵母载体特点.docx

酵母载体特点酵母载体是携带外源基因在酵母细胞中复制、扩增和表达的载体,包括克隆载体和表达载体。酵母表达载体多为穿梭载体，既可以在大肠杆菌中繁殖，获得足够的载体DNA进行体外操作，又可以在酵母中复制、表达和选择。它的宿主菌为:GS115（缺陷型）,X33（野生型）。载体pPIC9K、pPIC3.5K对应的宿主菌是GS115,pGAP系列对应的宿主菌是野生型X33o依其能否独立复制可分为结合载体和复制载体。结合载体：没有复制序列，必须嵌入酵母菌的染色体内才能随着细胞分裂时分裂。复制载体：有与复制相关的序列，可分为2质粒和ARS质粒。酵母表达载体多为穿梭载体,既可以在大肠杆菌中繁殖,获得足够的载体DNA进行体外操作,又可以在酵母中复制、表达和选择。胞内表达载体，常见的载体是pGAP系列和pPIC3.5Ko胞内表达载体的优势是将目的基因表达在胞内，可避免酵母的糖基化，适合于通常在胞浆表达或不含二硫键的非糖基化蛋白，相对于胞外分泌表达水平高但纯化相对复杂。胞外表达载体，常见的是载体pPIC9Ko胞外表达载体的优势在于为分泌到胞外的表达载体。选择这种载体的优势在于酵母本身分泌的外源蛋白很少，将外源蛋白分泌到胞外，有利于目的蛋白的纯化和积累。