食品科学与工程毕业论文-薄荷精油的抑菌活性研究.docx

石河子大学毕业论文题目：薄荷精油的抑菌活性研究院（系）：食品学院专业：食品科学与工程学号：2022113174姓名：李山指导教师：陈计峦完成日期：2022年3月目录摘要1关键词11 BU11.1 1概述11.2 国内外研究现状11. 2.1研究现状11.2. 2发展趋势2实验研究目的和意义31.31f目31.3.2研究目的32材料与方法32.1实9此原料及试剂32.2仪器与设备42.3实验方法42. 3.1薄荷精油的性质及化学成分43. 3.2流程54. 3.3操作要点53结果与分析85. 1薄荷精油对不同微生物的抑菌圈测定83. 2薄荷精油对不同微生物的最低抑菌浓度(MIC)的测定104,"i104. 1薄荷精油对不同微生物的抑菌效果104. 2薄荷精油对不同微生物的最低抑菌浓度(MIC)104. 3j11%116. 4总结11参考文献12致谢.13薄荷精油的抑菌活性研究学生：李山(2022113174)指导老师：陈计峦(石河子大学新疆)摘要：本文对薄荷精油的抑菌作用及抗氧化作用进行了研究，选用薄荷精油为原料,对薄荷精油抑菌圈、最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)进行了测定,研究了薄荷精油的抑菌能力。以大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌、青霉菌为指示菌,通过抑菌圈的测定,薄荷精油对微生物的抑菌作用表现为:青霉菌金黄色葡萄球菌枯草芽胞杆菌大肠杆菌酵母菌。不同浓度薄荷精油对指示菌种的MIC值和MBC值表明:薄荷精油对青霉菌、金黄色葡萄球菌抑制作用最强。薄荷精油对其他几种菌均有抑制作用,但是相对青霉菌的抑制效果要稍差。关键词：薄荷；薄荷精油；抑菌活性PeppermintessentialoilbacteriostaticactivityofstudyGraduate:zhangyan(2009113174)Instructorchenjiluan(ShiheziUniversity,XinjiangProvince,832003)Abstract：Thispaperstudiesonantimicrobialactivityandanti-oxidationofpeppermintessentialoil.ThroughtestPeppermintessentialoil'sinhibitionzone,theminimuminhibitoryConcentration(MIC)andminimumbact-ericidalConcentration(MBC),findthewaythatPeppermintessentialoilinhibitE.eoli,Baeillussubtilis,StaPhyloeoecusaureus,microzyme,penicilliumvirideandothermicrrganismsinhibition.keywords：peppermint；peppermintessentialoil；bacteriostasis1前言1.l概述薄荷是一种重要的香料植物，其干燥地上部分可入药，具有疏风、散热、解毒的功效，用于治疗风热感冒、头痛、目赤、咽喉肿痛、牙痛等，是我国常用的传统中药之一。薄荷广泛分布于北半球温带地区，少数见于南半球。薄荷属植物全世界约有30种，其中薄荷包含了25种，少数为1年生植物，大部分为具有香味的多年生植物。野生的薄荷有椒样薄荷、欧薄荷、留兰香等，根据中国植物志记载，我国有薄荷属植物有12种，主要分布于东北、华东、新疆地区。薄荷(MenthahaPloCa-IyXBriq.)为唇形科薄荷属植物，是我国常用的传统中药之一，也是一种重要的香料植物,其精油具有一定的抑菌作用。薄荷具有抑菌、抗氧化等多种作用，成为天然食品防腐剂以及抗氧化剂的重要来源，研究其抑菌性具有广阔的应用前景。国内外研究现状1.2.1植物精油的研究现状目前国内外对植物精油抑菌活性行了大量研究，并呈现以下特点：一是，很多被研究的植物本身就是药用植物；二是，生物活性研究多集中在离体条件下，活体生物活性测定的报道相对较少；三是，研究手段有了进一步的提高，部分学者采用电子显微镜对处理后的病菌进行了形态观察，对精油作用机理进行了一定的研究。今后在继续筛选植物精油抑菌活性的同时，有必要在前人研究的基础上，进一步开展活体生物测定，明确精油具体的活性成分、作用机理、环境卫生毒理等，以期开发出更多的植物精油。国内外一些学者对薄荷属植物的挥发油及其他提取物对各种病原菌的抑菌活性分别作了报道。Singh对日本薄荷精油研究表明，在200mgkg的浓度下对稻长蠕抱(H.oryzae)等15种真菌的抑制作用达100%。吴新安等研究了几种中草药提取物对植物病原菌的抑菌活性，发现薄荷的95%乙醇抽提物对苹果炭疽病菌第二天和第三天的抑制率分别为41.7%、21.7%。周峰等报道了薄荷挥发油有较强的抑菌作用，对6种供试菌MlC在1/320T/1280之间；薄荷滤液只对黄色葡萄球菌有抑制作用，M.C.TeixeiraDUarte等研究了巴西常见的35种药用植物的抗白色念珠菌活性，发现13种植物的挥发油具有该活性，其中包括M.arvensis.M.piperita,Menthasp,而乙醇提取物不具有抗白色念珠菌活性。DYadegarinia等研究发现伊朗Mpiperita挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌有抑制活性。薄荷的95%乙醇提取物对大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌均有一定的抑制作用用。王薇等对薄荷精油抑菌活性的研究结果表明，枯草芽抱杆菌及变形杆菌出现最大的抑菌环。MIC实验中，薄荷精油的浓度范围为5.00%-0.039%,在所选的8种菌种中，变形杆菌的MIe及MBC值最低，分别为0.625%及1.25%。MGulluee等发现MJongifoliaLssp.Longifolia挥发油对待测30种微生物均有很强的抑菌活性而甲醇提取物几乎没有活性。M.Mahboubi等对M.pulegiumL.挥发油的抑菌性进行了分析，认为以胡椒酮（38.0%）、胡椒烯酮（33.0%）、a-松油醇（4.7%）、胡薄荷酮（2.3%）为主要成分的该挥发油对微生物有显著活性特别是对革兰氏阳性菌的抑制圈的直径为8-21mm,MlC为0.25-4LmL,但是对革兰氏阴性菌特别是大肠杆菌的抑制活性最低。李琼芳等研究了三种不同方法提取的薄荷浸提液对于七种食品细菌及真菌的抑菌性，结果表明：不同浓度的三种薄荷浸提物，对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、大肠杆菌、根霉、黑曲霉等六种细菌及真菌都有比较明显的抑制作用。但对红曲霉的抑制效果比较差。马英姿等人网采用水蒸气蒸储法制备樟树叶精油和天竺桂叶精油,并测定了这两种精油对4种供试菌种（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、青霉和黑曲霉）的抑菌效果,结果表明:樟树叶精油的含量为0.52%,而天竺桂叶精油的含量为0.53%；天竺桂叶精油对除青霉外的菌种都有较好的抑制效果,而樟树叶精油则对所有的供试菌种都有明显的抑制作用。钟瑞敏等人研究了小茵香精油的抑菌活性，结果显示,小茵香精油对所研究的9种供试菌种表现出了广谱抑菌性,并且对其中的副溶血性嗜盐菌和黑曲霉表现出了极强的抑制效果。这些研究表明薄荷属植物的化学成分特别是挥发油在食品、制药工业以及植物源农药中有广阔的应用前景。我国植物资源丰富，在日益强调环境保护，关注人类生存的今天，我们应加大对植物资源的开发利用，为人类造福。国内外对植物精油的抑菌活性已做了大量研究。植物精油表现出的优良抑菌活性和广谱性,将有助于人们找到更为理想的天然防腐剂,这也符合人们追求，绿色健康理念的需要，与世界上的植物资源总量相比，目前的研究工作还远远不够,因此在抑菌植物的开发与利用方面还需做进一步的努力。1.2.2发展趋势植物源抑菌物质在自然界广泛存在，WiIking和BOard于1989年报道了有1389种植物有可能作为抑菌剂，其中包含了许多不同类型的化合物”叫植物体内的抑菌化合物是植物体产生的多种具有抑菌活性的次生代谢产物，包含了菇烯类、生物碱类、类黄酮类、蛋白质类、有机酸类和酚类化合物等）。植物抑菌作用是指一种植物的提取物在体外能抑制微生物生长繁殖或具有杀灭作用。广谱高效、抑菌性强、安全无毒、性能稳定的天然抑菌物质就成为食品、医药及新农药研究的热点。天然抑菌物质主要来源于植物、动物、微生物及矿物。其中植物源抑菌物质最丰富，也将会在天然抑菌物质的领域有很大的发展空间。1.2 实验研究目的和意义1.2.1 研究目的本文以薄荷精油为试材，利用其抑菌抑菌成分对食品中常见的5种细菌和真菌进行抑菌活性实验，对食品细菌及真菌的抑菌性研究。采用滤纸片法研究薄荷精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽泡杆菌、酵母菌、青霉菌的抑菌活性。对薄荷精油抑菌圈、最低抑菌浓度(MlC)、最低杀菌浓度(MBC)进行了测定,研究了薄荷精油的抑菌能力。1.2.2 研究意义薄荷是一种重要的香料植物，其干燥地上部分可入药，具有疏风、散热、解毒的功效，用于治疗风热感冒、头痛、目赤、咽喉肿痛、牙痛等，是我国常用的传统中药之一。薄荷广泛分布于北半球温带地区，少数见于南半球。薄荷属植物全世界约有30种，其中薄荷包含了25种，少数为1年生植物，大部分为具有香味的多年生植物。野生的薄荷有椒样薄荷、欧薄荷、留兰香等，根据中国植物志记载，我国有薄荷属植物有12种，主要分布于东北、华东、新疆地区。薄荷(Menthahaploca-IyxBriq.)为唇形科薄荷属植物，是我国常用的传统中药之一，也是一种重要的香料植物，其精油具有一定的抑菌作用。薄荷具有抑菌、抗氧化等多种作用，成为天然食品防腐剂以及抗氧化剂的重要来源，研究其抑菌性具有广阔的应用前景。2材料与方法2.1 实验原料及试剂薄荷精油(新疆石河子大学实验室)，精油浓度约为98%,用棕色或褐色瓶子在避光阴凉处存放。牛肉膏、络蛋白酸性水解物、琼脂、可溶性淀粉；氯化钠、氢氧化钠、盐酸、丙酮溶液(以上试剂均为分析纯)。2.2主要仪器与设备序号仪器名称型号生产厂家1恒温振荡器THZ-98太仓市华美生化仪器厂2电炉EH20Aplus北京伯泰科仪器有限公司3电热恒温培养箱HPX-9272MBE上海博讯实业有限公司医疗设厂4微生物洁净工作台SW-CG-ICV苏净集团安泰公司5冰箱BCD-265F海尔公司6电子天平（d=0.1mg）BS2000S北京赛多利斯天平有限公司7高压灭菌锅LAC-5040SKOREA2.3实验方法2.3.1 薄荷精油的性质及化学成分（1）薄荷精油的性质在常温下易挥发，涂在纸片上不留油迹；有特殊而强烈的气味，在常温下多为液体；具有较高的折光率，有光学活性；比重在0.851.065g.cm-3左右；可溶于多数有机溶剂，也能溶于高浓度的乙醵中，但几乎不溶于水；对空气、日光及温度的影响比较敏感。（2）薄荷精油的化学成分氨基酸薄荷属植物薄荷的叶、茎中都含有丰富的氨基酸，包括甘氨酸、天冬氨酸、缀氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸、丙氨酸、天冬酰、亮氨酸和异亮氨酸、苯丙氨酸等。挥发性成分到目前为止，薄荷植物中的挥发油是研究最为深入的一类成分。研究表明，油中的主要化学成分为醇、酮、酯、菇烯、菇烷类化合物，且这些成分的种类、含量随薄荷品种的不同、产地的不同以及采集时间的不同而变化。一般来说，新鲜薄荷叶中含挥发油0.3-1%,干茎叶含1.3-2%。油中主要成分为左旋薄荷酮，含量77-87%,左旋薄荷醇，含量10%。还含有异薄荷酮，胡薄荷酮，乙酸薄荷酯，茨烯，柠檬烯，旅烯，薄荷烯酮，乙酸癸酯，苯甲酸甲酯，侧柏烯，3-戊醇，2-己烯，3-辛醇，右旋月桂烯，桂叶素，OT松油醇，香芹酮等。黄酮类成分薄荷属植物中的黄酮类化合物绝大多数是黄酮化合物，少数是黄酮醛类化合物。菇类成分薄荷属植物中已报道的菇类成分按结构类型可分为五环三菇和单环单菇两类，其中以五环三拓为主。有机酸包括迷迭香酸、咖啡酸、苯甲酸、反式桂皮酸等。醍类成分包括大黄素、大黄酚、大黄素甲醛、芦荟大黄素等。以二羟基二氢蔡二竣酸为母核的多种成分。2.3.2 流程2.3.3 操作要点（1）培养基的制备MH琼脂培养基（MHA）（细菌用）配方：牛肉粉6g、可溶性淀粉1.5g、络蛋白酸性水解物17.5g、琼脂17g、蒸储水IooomL,pH7.3÷O.l;铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）（真菌用）配方：马铃薯（去皮切块）200g、葡萄糖20g、琼脂20g、蒸储水IoOOmL,pH5.6±0.1°（2）平板的制备将配制好的培养基倒入250mL锥形瓶中，121高压蒸汽灭菌20min,冷却至50-6OC,在超净工作台上，向已灭菌的培养皿中倒入15mL皿培养基,冷却为固体培养基,备用。（3）滤纸片的准备将滤纸用打孔器打成直径为6mm的圆片,并将滤纸片装在空培养皿内，高压蒸汽灭菌备用。（4）实验样品的制备薄荷精油在-20条件下棕色瓶子避光保存。（5）灭菌及菌种培养将培养皿、试管、移液管、移液枪枪头、实验所用培养基、250mL蒸馈水放入121°C高温高压灭菌锅中灭菌30min,灭菌过程中装有培养基的试管要竖立放置,勿使培养基污染棉塞而影响实验结果。高温灭菌后，需要做斜面的试管,应趁热及时摆放斜面,斜面的斜度需要适当,斜面的长度不超过试管的六分之一。本实验采用圆滤纸片扩散法进行,使用食品学院实验室提供的打孔器,将干燥滤纸打制成直径为6mm的圆纸片（不要有毛边，以免实验数据不准），将其放到玻璃培养皿中，用报纸包好,放到高温高压灭菌锅中干热灭菌2h（严格控制温度121左右,勿超过170C,否则会引起纸片自燃）后备用。（6）菌株的分离与活化融化培养基：牛肉膏蛋白陈琼脂培养基放入水浴中加热至融化。倒平板:待培养基冷却至50C左右，按无菌操作法倒2只平板（每皿约15ml）,平置，待凝固。作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120左右（平板转动一定角度约60C）,以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。划线操作a.挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。b.划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯（这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁），右手拿接种环先在A区划3-4条连续的平行线（线条多少应依挑菌量的多少面定）。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方（不要放入皿盖内）,以防止杂菌的污染。c.划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区（菌源区）将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。无菌实验室先用紫外灯灭菌30min,无菌操作台用酒精擦拭一遍，从冰箱中取出大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、青霉菌,靠近火焰用接种环接种到培养基中，进行划线,然后放到数显不锈钢恒温培养箱中，根据不同菌类的生长情况进行培养（细菌：37/24h；酵母菌:28/48h；霉菌:28/48h）培养。（7）菌种培养无菌实验室先用紫外灯灭菌30min,无菌操作台用酒精擦拭一遍，从冰箱中取出大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、青霉菌,靠近火焰用接种环接种到培养基中,进行划线,然后放到数显不锈钢恒温培养箱中，根据不同菌类的生长情况进行培养（细菌：37/24h；酵母菌:28"C/48h；霉菌:28/48h）培养。（8）0.5麦氏比浊管的制备称取氯化钢（BaC12.2H2O）1.17g,用蒸僧水在干净烧杯中溶解、搅匀，然后用玻璃棒将溶液移入100mL容量瓶中,用蒸储水将烧杯洗2-3遍,洗净里面的氯化钢液,最后定容至100mL,此溶液氯化电贝溶液的浓度相当为0.048molL,用移液管移取浓硫酸ImL至装有50mL蒸僧水的烧杯中,搅拌均匀,然后定容至100mL,此硫酸溶液的浓度相当为0.18molL,分别吸取0.5mL0.048molL氯化钢溶液99.5mL0.18molL的硫酸溶液,将两种溶液混合均匀，置螺口试管中，在室温下放置于暗处保使用前混匀，有效期为6个月。应用时,可目测或使用比浊仪即可。（9）菌悬液或抱子悬浮液的制备从培养箱中拿出培养好的菌种,用无菌蒸馈水冲洗菌落,用接种环刮下菌落,此过程中注意不要将培养基弄烂，以免影响实验效果,将菌悬液移入另外一只比浊管中，然后和0.5麦氏比浊管比较,如浊度不够,继续用无菌蒸储水将菌悬液稀释到0.5麦氏比浊标准,将调配好的溶液在避光无菌处放置好，这样采用比浊法可以将菌种配成最终浓度为106cFUmL左右的菌悬液和lOKFU/mL左右的抱子悬浮液。（10）不同浓度的薄荷精油溶液的配制本实验的溶液配制采用二倍稀释法,用移液枪吸取3mL薄荷精油和3mL丙酮溶液到无菌有盖离心管中摇匀配制50%浓度的薄荷精油溶液,然后从中吸取3mL溶液到另外一个无菌离心管中，再吸取3mL丙酮溶液到第二个无菌离心管中摇匀,分别配制浓度为25.00、12.50、6.25、3.13、1.56、0.78(vv)的溶液，以丙酮溶液为空白作对照实验。(11)滤纸片扩散法无菌移液枪吸取OJmL已经制备好的菌悬液,分别加入到MHA培养基或PDA培养基的固体平板上,用无菌涂布棒涂布均匀,制成带菌平板，在无菌条件下，用银子将灭菌后直径6mm的滤纸片平铺在培养基上,准确吸取10L精油样品滴加在滤纸片上,每一处理设3次重复。贴好滤纸片的含菌平板倒置放入培养箱恒温倒置培养(细菌37培养24h,真菌28培养48h),取出后观察菌落生长情况,用游标卡尺测出滤纸片抑菌圈直径大小,实验结果取平均值，比较抑菌效果。(12)薄荷精油最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)的测定本实验的溶液配制采用二倍稀释法,薄荷精油最低抑菌浓度(MlC)的测定。采用二倍稀释法，以丙酮为溶剂,配制一系列梯度浓度的精油溶液,加入已融化好的培养基中，混合均匀，使培养基中精油的浓度分别为25.00、12.50、6.25、3.13、1.56、0.78lmlo待培养基冷却凝固后，平板划线接种,按前述条件培养,观察结果,每一精油浓度梯度做3组平行实验,与对照组(菌落正常生长)比较，肉眼可见菌落生长者为无抑制作用，以完全没有菌落生长的最低精油浓度为其最低抑菌浓度(MIC),以丙酮作对照。把上述没有长菌的培养皿按上述培养条件继续培养,取出观察以完全没有菌生长的最低浓度作为该薄荷精油的最低杀菌浓度(MBC)以丙酮溶液作对照，分别测得薄荷精油对几种指示菌的MBC03结果与分析3.1薄荷精油对不同微生物的抑菌圈测定大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、青霉菌的平板培养图如下。酵母菌金黄色葡萄球菌枯草芽泡杆菌大肠杆菌青霉菌通过对薄荷精油对微生物抑菌圈的测定,不同微生物抑菌圈如下表五种微生物抑菌圈直径（mm）菌种抑菌圈直径（mm）大肠杆菌12.4枯草芽抱杆菌14.5金黄色前萄球菌8.5酵母菌11.45青霉菌完全抑菌实验表明，薄荷精油对不同微生物都有明显的抑制作用，其中，青霉菌的抑制效果最好,属于完全抑菌:金黄色葡萄球菌的抑制效果次之；枯草芽泡杆菌、大肠杆菌、酵母菌的抑制效果相对较弱。薄荷精油对5种常见菌的抑制作用大小顺序为:青霉菌>金黄色葡萄球菌枯草芽抱杆菌>大肠杆菌>酵母菌。3.2薄荷精油对不同微生物的最低抑菌浓度（MlC）的测定通过对薄荷精油对微生物的最低抑菌浓度（MIC）测定，不同微生物的最低抑菌浓度（MIC）如下表五种微生物最低抑菌浓度（MlC）菌种MIC(VV)MBC(VV)大肠杆菌25%>25%枯草芽抱杆菌50%>50%金黄色葡萄球菌0.78%>0.78%酵母菌12.5%>12.5青霉菌0.78%>0.78%抑菌圈实验和MlC值实验均表明，薄荷精油对青霉菌、金黄色葡萄球菌抑制作用最强。薄荷精油对其他几种菌均有抑制作用,但是相对青霉菌的抑制效果要稍差。4结论与总结4.1 薄荷精油对不同微生物的抑菌效果薄荷精油对不同微生物都有明显的抑制作用，薄荷精油对5种常见菌的抑制作用大小顺序为:青霉菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽抱杆菌大肠杆菌>酵母菌。4.2 薄荷精油对不同微生物的最低抑菌浓度（MIC）抑菌圈实验和MIC值实验均表明，薄荷精油对青霉菌、金黄色葡萄球菌抑制作用最强。薄荷精油对其他几种菌均有抑制作用,但是相对青霉菌的抑制效果要稍差。4.3 注意事项第一，实验过程中应注意恒温培养箱的清洁,实验前要用75%酒精溶液擦拭培养箱内壁,保证培养箱内没有杂菌干扰实验；第二，抑菌圈测定时,注意滤纸的摆放,滤纸位置不得随意移动，部分抑菌圈外缘不太光滑,可能是由于周围菌落大小及形状的影响。4.4 总结薄荷精油具有灭菌防腐性,其挥发性成分一般环境霉菌、酵母菌和细菌都有明显的抑制作用，应用时不需添加到培养基或食品中去，其在培养基或食品表面就能起到较好的防霉抑菌作用，具有实际应用于食品防腐保鲜的潜力。参考文献：1国家药典委员会.中国药典(I部)S.北京:人民卫生出版社,2000.2吴新安,花日茂,岳永德,等.几种中草药提取物对植物病原菌的抑菌活性研究J.安徽农业大学学报,2002,29(04):330-332.3周峰，籍保平，等.十二种中药挥发油及其滤液体外抑菌活性研究J.食品科学，2005,26(03):50-53.4胡仁火,任国祥.9种中药植物抑菌作用的研究J.安徽农业科学.2007,35(27):8534-853.5王微,吴楠,付玉杰,等.薄荷精油抑菌活性研究(英文)J.植物研究,2007,27(05):626-629.6赵丹.薄荷和留兰香资源挥发油抗菌活性和提取物抗氧化活性研究D.四川农业大学.20IL7李琼芳，刘明学，申秀娟.薄荷浸提液的抑菌效果研究JL科技信息(学术研%),2008,(24):344-345.8马英姿,谭琴,李恒熠.樟树叶及天竺桂叶的精油抑菌活性研究UL中南林业科技大学学报,2009,29(1):36-41.9钟瑞敏，肖仔君,张振明,等.小茵香籽精油成分及其抑菌活性研究J.林产化学与工业，2007,27(6):36-37.10吴铁青.使用天然抑菌化合物的保护作用J,农药译丛,19(3),18(3):9-12.11薛伟,宋宝安.抑菌植物的研究新进展J1.农药,2005,44(6):241-246.12陈屹,姚卫蓉.槐花精油的提取及其抗菌作用研究J.安徽农业科学,2008,36(11):279-281.致谢为期几个月的毕业论文实验终于结束了，这期间的实验生活，紧张，快乐而充实的。在此，感谢我的导师陈计峦老师的亲切关怀和悉心指导，是您在实验过程中严格的要求我，并且对于每一个实验的关键步骤都给以详细的指导。当然这篇论文的撰写也离不开您的细心指导。而您严谨的治学态度，一丝不苟的工作作风，缜密的实验思路以及对待学生认真负责的态度都深深的感动并影响着我。从课题的选择到项目的最终完成，陈老师都始终给予我细心的指导和不懈的支持。在此谨向陈老师致以诚挚的谢意和崇高的敬意感谢在实验过程中帮助过我的所有老师和同学，正是你们的帮助和支持，我才能克服一个个困难和疑惑，直至本文的顺利完成。四年的大学生活也快结束了，它短暂而充实，轻松而又惬意。回首四年，其中经历了太多的艰辛与困苦。但这无疑也是一个快乐而美好的四年一一有老师的谆谆教导，有同学的关心帮助，更有一次次的挑灯苦读感谢我的室友和朋友们，是你们和我共同维系着彼此之间姐妹般的感情，维系着寝室那份家的融洽。四年了，仿佛就在昨天。四年里，我们也曾有过磕磕绊绊，但这偶尔的不快在我们纯真而永恒的友谊面前却又是那么的不值一提。在此，再次感谢所有帮助过我的人，因为有你们才让我的大学生活丰富多彩。