23分型与HC2检测HPV的比较.ppt
23分型与HC2检测HPV的比较,什么是HPV？,HPV就是“人乳头状瘤”病毒（human papilloma virus,HPV），是一种非常小的DNA（脱氧核糖核酸）病毒。HPV有严格的嗜上皮特性，只能感染人的皮肤和粘膜层。根据HPV的组织嗜异性，可分为皮肤类和粘膜类。目前已有120多种HPV基因型被确定。,各型HPV可引起哪些疾病？,扁平疣3、10、27、28、41寻常疣1、2、4、7、27、29、40、54疣状表皮发育不良5、8、12、14、15、17、19、25 38、46、47、49、50尖锐湿疣6、11、16、18、31、33、34、35、39、51、64-68、70、73鲍温样丘疹病16、18、39、42宫颈上皮内瘤 6、11、16、18、31、33、35、43、44、51、56、58、61浸润性宫颈癌16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68阴茎癌16、18 女阴癌16、18,HPV与宫颈癌的关系,德国科学家哈拉尔德楚尔豪森由于发现HPV是导致宫颈癌的罪魁祸首，获得了2008年度诺贝尔生理学与医学奖。1995年，国际癌症研究机构(IARC)专题讨论会通过HPV感染是宫颈癌的主要原因，即HPV感染是宫颈癌发生的必要条件。也就是说，没有HPV感染，就没有宫颈癌。2005年，IARC/WHO（世界卫生组织）推荐把HPV检测用于宫颈癌筛查。,不同亚型HPV致癌的危险程度,依据不同亚型HPV与肿瘤发生的危险性高低，可将HPV分为低危型和高危型。高危型 16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,83,MM4 低危型 6,11,42,43,44,HPV的感染途径,性接触传播：处女通常检测不到HPV感染；非性直接接触感染：通过接触病变部位及病人分泌物感染；间接接触：通过病人的衣物和用品感染；母婴传播：母亲生殖道的HPV感染也可以传播至她们的婴儿的口腔中。,HPV感染的高危人群,1、有多个性伴侣或性交频繁者；2、初次性交年龄低的女性；3、其男性性伴侣有其他宫颈癌性伴侣的女性；4、现在或以往有单纯疱疹病毒感染的女性；5、艾滋病病毒感染的女性；6、患有其他性传播疾病，尤其是多种性传播疾病混合存在的女性；7、正接受免疫抑制剂治疗的女性；8、吸烟的女性；9、有过宫颈病变，如患有慢性宫颈炎不及时治疗、CIN及生殖道恶性肿瘤病史的女性。,感染了HPV就一定会患宫颈癌吗？,大部分妇女都是短暂性的HPV感染，通常在6-12个月消失，只有少数妇女会持续感染乃至最终发展成宫颈癌。同一高危型HPV持续感染是激发宫颈上皮恶性转化的最重要危险因素，是宫颈癌及癌前病变发生发展的必要条件。只有持续的同一高危型HPV感染才会发生癌前病变或宫颈癌。从高危型HPV感染到发展为宫颈癌大概需要1015年。,目前常用的HPV检测方法,23分型法HC2法,23分型检测原理,先利用PCR技术将目的基因扩增约1 000 000倍。大大提高检测的灵敏度。再利用反向杂交检测所感染的HPV类型。可以对HPV进行分型检测。,23分型(PCR结合反向杂交),HC2检测原理,先用试剂中的RNA与标本中的HPV病毒DNA杂交。RNA的稳定性是很难保证的。再用微孔板中的包被抗体捕获RNA-DNA杂交体，通过化学发光进行检测。由于所检测对象为13种病毒中的一种或几种，RNA-DNA杂交体的抗原性是很难保证的。由于没有扩增放大，该检测灵敏度低，且无法进行HPV分型。,HC2 基本原理与实验步骤图示,HC2与23分型可检出HPV的种类,23分型可以检出全部23种HPV感染。HC2只能检出13种HPV感染，漏掉了10种HPV感染，漏检率为：10/2343.5%。,HC2与23分型灵敏度的比较,23分型（灵敏度：5-10copies/ml）：只要标本中的HPV达到10copies/ml就可以检测出来，大大提高了HPV的检出率。HC2（灵敏度5000copies/ml）：当标本中的HPV少于5000copies/ml的时候用HC2法是无法检测出来的。这无疑会造成大量的假阴性结果，进一步漏掉大量的HPV感染者。,23分型与HC2检测报告的比较,23分型可具体报告出23种HPV中的某一种或某几种HPV病毒的感染，对随访有重要帮助。随访前后为同一亚型长期感染高危人群随访前后为不同亚型感染非高危人群HC2只能笼统地报告有无13种HPV感染，具体哪一种还是哪几种都无法确定。对阳性患者进行随访时，如仍为阳性，无法确定是原HPV感染未愈还是愈后又感染了另外一种HPV。,HPV不能定量测定,假如人的血液中含有HPV，是可以进行定量的。但是人的血液中一般不含HPV。在不同的位置取分泌物，HPV病毒的浓度不同。检测时无法将拭子所取到的分泌物进行定量加样。因此无法进行HPV定量测定。,谢谢！,
