蛋白质的盐析作用.ppt

蛋白质的盐析作用,实验目的,掌握盐析的原理和方法熟练使用基本仪器,实验原理,用中性盐类使蛋白质从溶液中沉淀析出的过程称为蛋白质的盐析作用.蛋白质是亲水胶体,当加入适量的轻金属盐类时蛋白质分子即处于高渗透压的溶液中,使蛋白质外周水化膜被破坏，同时盐类的离子中和了蛋白质分子的电荷,结果蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而沉淀;但此时蛋白质分子内部的结构没有改变,仍然保持其天然蛋白质的性质,即可复溶解于原来的溶剂中.沉淀蛋白质所需盐类浓度视蛋白质种类而异.呈粗分散系者(如球蛋白)较细分散系者(如清蛋白)容易盐析.,实验操作,取小试管或离心管加蛋清稀释液1ml及饱和（NH4）SO4（74.5%）溶液1ml混和后静置10分钟，球蛋白即沉淀析出，离心十分钟（2000转/分）。将离心后的上清液（含有清蛋白），吸出1ml加入另一支小试管，逐渐加入(NH4)SO4结晶粉末，每加一次需用细玻璃棒充分搅拌，直至粉末不再溶解而达到饱和状态为止，静置约十分钟，离心十分钟，倾去上清液，此时的沉淀即为清蛋白。向上述两个离心管的沉淀内各加水1ml，用细玻璃棒搅拌沉淀，观察沉淀能否复溶，此得出什么结论。,注意事项,加(NH4)SO4沉淀清蛋白时，一定加入适量，倘若太过量则清蛋白不能沉淀，而呈乳胶状物，其原因是因溶液浓度太大，使蛋白质不能下沉，而比重太轻。,