生化实验-蛋白质的变性、凝固及沉淀反应性质.ppt

蛋白质的变性、凝固 及沉淀反应,生物化学与分子生物学教研室,实验一,实验目的和意义,验证关于蛋白质的相关理论,学会分析蛋白质的基本实验方法,讨论蛋白质分析在科研和临床工作中的意义,血清、尿液中蛋白质分析与疾病诊断,蛋白质的变性,在某些物理和化学因素作用下，蛋白质理化性质的改变和生物学活性的丧失。,基本概念,蛋白质的变性,现象,蛋白质的变性,引起蛋白质变性的理化因素,加热,乙醇等有机溶剂,强酸、强碱,重金属盐,生物碱试剂,蛋白质的变性,学习蛋白质变性的意义,变性的可逆性 可逆变性：除去变性因素，蛋白质空间结构可以恢复原状。不可逆变性：除去变性因素，蛋白质空间结构不能恢复原状。一般轻度变性是可逆，过度变性是不可逆。,蛋白质的变性,蛋白质的沉淀,维持蛋白溶液稳定的因素：,蛋白质的沉淀,可逆沉淀,不可逆沉淀,结构和性质都不变,适当条件下可重新溶解,是分离和纯化的基本方法,结构和性质都发生变化,沉淀不再溶解于水,蛋白质的沉淀与变性,变性蛋白易于沉淀,沉淀蛋白不一定变性,蛋白质的凝固,接近于等电点附近的蛋白质溶液加热，可使蛋白质发生凝固,基本概念,不可逆变性状态,蛋白质的凝固,临床应用实例,水/无机盐/尿素,水/无机盐/尿素/蛋白质,蛋白质变性凝固,加热醋酸法,变性、沉淀、凝固之间关系,变性属于蛋白质本质的变化，沉淀和凝固属于一种现象,变性不一定沉淀，变性蛋白质只在等电点附近才沉淀，沉淀的变性蛋白质也不一定凝固,注意事项,逐滴加入，仔细观察酒精灯使用前注意酒精量的多少，加热时试管口不可对人，不用时熄灭酒精灯加热时，要进行晃动,避免局部高温,引起试管炸裂用过的枪头、滤纸放于污物缸苦味酸属危险试剂用过的试管仔细清洗,老年痴呆者脑血管中产生大量难溶性蛋白的诱因,讨论：蛋白变性与疾病,思考题,蛋白质变性、沉淀和凝固可在细胞、组织的哪些生命过程中出现？试举例与哪些疾病（或病变）的发生相关？,