高效毛细管电泳分析法.ppt
2023/11/6,第十一章高效毛细管电泳分析法,一、高效毛细管电泳仪high performance capillary electrophoresis apparatus二、流程与主要部件process and main assembly三、进样方式injection method,第三节高效毛细管电泳仪,high performance capillary electrophoresis,HPCE,high performance capillary electrophoresis apparatus,2023/11/6,一、高效毛细管电泳仪high performance capillary electrophoresis apparatus,2023/11/6,仪器2,2023/11/6,仪器3,2023/11/6,二、仪器流程与主要部件 process and main assembly,电压:030kV;分离柱不涂敷任何固定液;紫外或激光诱导荧光检测器;(可检测到:10-1910-21 mol/L),2023/11/6,1.高压电源,(1)030 kV 稳定、连续可调的直流电源;(2)具有恒压、恒流、恒功率输出;(3)电场强度程序控制系统;(4)电压稳定性:0.1%;(5)电源极性易转换;,2.毛细管柱(1)材料:石英:各项性能好;玻璃:光学、机械性能差;(2)规格:内径2075m,外径350400m;长度=1m,2023/11/6,3.缓冲液池,化学惰性,机械稳定性好;4.检测器 要求:具有极高灵敏度,可柱端检测;检测器、数据采集与计算机数据处理一体化;,类型 检测限/mol 特点紫外-可见 10-1310-15 加二极管阵列,光谱信息荧光 10-1510-17 灵敏度高,样品需衍生激光诱导荧光 10-1810-20 灵敏度极高,样品需衍生电导 10-1810-19 离子灵敏,需专用的装置;,2023/11/6,三、毛细管电泳的进样方式 injection method of HPCE,进样量:毛细管长度的1%-2%;纳升级、非常小;1.流体力学进样方式(1)进样端加压(2)出口端抽真空(3)虹吸进样,2023/11/6,毛细管一端插入样品瓶,加电压;,2.电动进样方式,进样不均:电歧视现象,淌度大的离子比淌度大的进样量大;离子丢失:淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去;特别适合黏度大的试样;3.扩散进样 试样通过扩散作用进入分离柱端口处。,2023/11/6,内容选择,结束,第一节 概述generalization第二节 高效毛细管电泳的理论基础basic theory of HPCE第三节 高效毛细管电泳仪器high performance capillary electrophoresis apparatus第四节 高效毛细管电泳的分离模式separate types of HPCE第五节 应用与进展applications and advances of HPCE,