工业微生物菌种制备.ppt

第二章 工业微生物菌种制备,第一节 微生物菌种的选育第二节 菌种的培养,第一节 微生物菌种的选育,一、发酵工业菌种的要求二、常用的菌种三、菌种的选育四、菌种保藏,一、发酵工业菌种的要求,(1)所需原料廉价。(2)培养条件易于控制。(3)生长快，发酵周期短。(4)满足代谢控制的要求。,一、发酵工业菌种的要求,(5)抗噬菌体和杂菌能力强。(6)菌种遗传稳定，不易退化。(7)发酵中泡沫要少。(8)菌种安全。,三、菌种的选育,（一）菌种的分离（二）菌种的选育,（一）菌种的分离,一是可以直接索取或购买。二是从大自然中分离筛选。,分离思路,菌种分离依照生产要求、菌种的特性，采用各种筛选方法。快速、准确把需要菌种挑选出来。实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌，也必须进行分离纯化。,新种分离与筛选的步骤,定方案：查资料，菌种的特性。采样：针对性。增殖：增殖培养，数量占优。分离：利用分离技术得到纯种。性能测定：菌种、发酵、提取等。,（二）菌种的选育,1、自然选育 2、诱变育种3、杂交育种 4、原生质体融合5、基因工程育种,1、自然选育,自然选育是最古老、最简便、应用广的选种方法。利用菌种自发突变选择优良菌。,2、诱变育种,目的：通过物理或化学等诱变剂的处理，使诱变对象细胞内的遗传物质发生变化。,变异菌的筛选方法,条件抗性突变型的筛选抗药性突变株的筛选抗生素抗性变异株的筛选营养缺陷型的筛选,3、杂交育种,原核微生物：接合、转化、转导真核微生物：有性生殖、准性生殖,四、菌种保藏,菌种退化 菌种复壮 菌种保藏,1、菌种退化,表现：发酵力或繁殖力(如孢子的产生)下降，发酵产品的得率降低等。,退化的原因,菌种保藏不当。菌种生长的要求没有得到满足，或是遇到某些不利条件，或是失去某些需要的条件。经诱变得来的新菌株发生回复突变，从而丧失新的特性的情况。,退化的原因,基因方面：突变、连续传代等环境方面：温度、湿度、培养条件等。,防止退化措施,控制传代次数选择合适的培养条件利用不同类型细胞进行传代选择合适的菌种保藏方法,2、菌种复壮,单细胞分离纯化。通过诱变再筛选。改变培养条件等。,3、菌种保藏,将菌种处于低温、干燥、无氧和缺乏营养的条件下，可以使菌种暂时处于休眠状态。,3、菌种保藏方法,斜面低温保藏法液体石蜡保藏法砂土管保藏法冷冻干燥保藏法超低温冷冻藏法,第二节 菌种的培养,种子条件：菌量适宜 菌龄适宜性能稳定 无杂污染,菌种制备任务,第二节 菌种的培养,种子制备过程发酵工业种子培养影响种子的因素,一 种子制备过程,实验室种子培养生产车间种子培养,1 实验室种子培养,斜面菌种保藏固体扩大培养：茄子瓶、培养皿等摇瓶培养,2 生产车间种子培养,种子罐接种种子罐级数种龄和接种量,二 发酵种子培养方法,表面培养固体培养载体培养液体深层培养,影响种子的因素,(1)培养基(2)种龄与接种量(3)温度(4)pH值(5)通风搅拌(6)泡沫(7)染菌控制(8)种子罐级数,第二章 工业微生物菌种制备,第一节 微生物菌种的选育第二节 菌种的培养第三节 种子培养基及制备（自学）,