实验-叶绿素的提取和分离.ppt

叶绿体及其色素,基质,基粒,类囊体,形态：椭圆球形结构：外膜、内膜、叶绿体基质、基粒(由单层膜的类囊体垛叠构成),叶绿体及其色素,一、叶绿体,叶绿体内的物质：酶（光合作用有关）光反应的酶叶绿体基粒 暗反应的酶叶绿体基质少量DNA和RNA色素,叶绿体及其色素,二、叶绿体色素,分布：叶绿体类囊体膜上分类：,色素,叶绿素,类胡萝卜素,叶绿素a（蓝绿色）,叶绿素b（黄绿色）,叶黄素（黄色）,胡萝卜素（橙黄色）,叶绿体及其色素,二、叶绿体色素,功能：选择吸收光能，传递和转化光能叶绿素：主要吸收红橙光和蓝紫光类胡萝卜素：主要吸收蓝紫光,叶绿素a叶绿素b叶黄素胡萝卜素,叶绿素a,光合作用,直接用于,(转化光能),吸收和传递光能,色素的提取和分离实验,一、实验原理,提取：叶绿体色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体色素。分离：纸层析法不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。（不同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带）,色素的提取和分离实验,一、实验原理,不同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带,色素的提取和分离实验,二、实验材料,材料：菠菜绿叶药品：混合的层析液，无水乙醇，石英砂，碳酸钙用具：干燥滤纸，带塞层析管，研钵，玻璃漏斗，纱布，滴管，载玻片，盖玻片，剪刀，试管，培养皿，药匙,色素的提取和分离实验,二、实验步骤,色素的提取和分离实验,提取叶绿体色素,取材：取2-3片菠菜叶，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。研磨：向研钵中放入少量石英砂和碳酸钙，加入一滴管无水乙醇，边加无水乙醇边研磨，进行充分地研磨至匀浆状态。过滤：在玻璃漏斗上放入单层纱布，将研磨液倒入漏斗，漏斗下端放置培养皿，过滤制备得到滤液。【注】加石英砂是为了使研磨充分加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏加入CaCO3和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少,色素的提取和分离实验,分离叶绿体色素,制备滤纸条：将干燥的定性滤纸制成如右图所示，用铅笔划线（已准备好）。画线：用盖玻片蘸取少量滤液，沿铅笔线均匀压出细线。待滤液干后，重复画线3-4次。【注】画滤液线时尽量画直、画细、画浓每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液线过宽，影响结果,色素的提取和分离实验,分离叶绿体色素,固定装置：将4mL层析液倒入层析管中，将画好线的滤纸条固定于右图装置中。观察现象：10min后，将滤纸条取出，风干。观察色素带及其颜色，作好记录。【注】放滤液条时，要避免滤液细线浸没到层析液。不要让滤纸条贴在层析管壁上。层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。,滤液细线,色素的提取和分离实验,三、注意事项,实验中各种用液很多有毒（丙酮、苯等）且易燃，属危险试剂，实验时保持通风，安全操作实验注重团队合作，组员们共同完成实验。,实验结果探究,一、实验结果,可以看出：色素扩散距离不同。色素带宽度不同；,？,实验结果探究,二、实验总结,最宽（最多）：叶绿素a最窄（最少）：胡萝卜素相邻距离最近：叶绿素a和叶绿素b色素在滤纸上自上而下分布依次为：胡萝卜素叶黄素叶绿素a 叶绿素b色素含量最多的是：叶绿素a,实验结果探究,二、课堂反馈,如果没有无水乙醇和菠菜叶片，要保证分离后的色素带清晰，可以用来代替的最佳实验材料是（）A丙酮和麦苗 B丙酮和大白菜 C蒸馏水和大白菜 D蒸馏水和麦苗在叶绿体色素的提取实验中，研磨绿叶时要加入无水乙醇，其目的是（）A防止叶绿素被破坏 B使叶片充分磨碎C使各色素充分溶解于乙醇 D使各色素在滤纸上扩散开来,实验结果探究,二、课堂反馈,叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离的原因是（）A色素提取液中色素已经分层B阳光的照射使不同色素彼此分开C乙醇有使色素溶解并彼此分离的特性D各种色素在滤纸上随层析液扩散的速度不同加SiO2、加CaCO3的目的分别是：研磨充分；保护叶绿素。为什么滤液细线越细、越齐越好？防止色素带之间部分重叠。为什么层析液不能没及滤纸条的滤液细线？防止色素溶解在层析液中，影响实验结果。,实验结果探究,三、课后思考,植物叶片呈现的各种颜色是怎么回事？,