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    激光诱导荧光技术.ppt

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    激光诱导荧光技术.ppt

    Planar Laser Induced Fluorescence,平面激光诱导荧光技术,平面激光诱导荧光技术,目 录,4,平面激光诱导荧光技术,PLIF介绍,激光(Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation,缩写为laser)是指窄幅频率的光辐射线,通过受激辐射放大和必要的反馈共振,产生准直、单色、相干的光束的过程及仪器。激光是20世纪以来,继原子能、计算机、半导体后,人类的又一重大发明,被称为“最快的刀”、“最准的尺”、“最亮的光”。它的亮度约为太阳光的100亿倍。,平面激光诱导荧光技术,PLIF介绍,荧光:当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出出射光(通常波长比入射光的的波长长,在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。,平面激光诱导荧光技术,可见光波长的红绿蓝激光(635nm,532nm,445nm),长颈瓶中不同尺寸的硒化镉(CdSe)量子点在紫外线的照射下发出荧光,平面激光诱导荧光技术,PLIF介绍,PLIF(Planar Laser Induced Fluorescence)即所谓的“平面激光诱导荧光”。所有应用片状光源照明,对被测对象所发出的由这种片状光源所激发(诱导)的荧光信号进行探测的实验技术都可以称作PLIF。,平面激光诱导荧光技术,PLIF原理,激光诱导荧光光谱利用一束脉冲激光将特定分子(或离子)由电子基态激发至激发态,稍后测量分子由电子激发态驰豫放出的光子,扫描激发激光的波长使它通过分子的吸收谱带,就可以把荧光强度描绘成激发激光波长的函数,得到激发光谱(Excited spectroscopy)。,平面激光诱导荧光技术,PLIF原理,荧光光谱的作用从荧光的分布,可以探测样品粒子的种类;从荧光的强弱,可得知粒子的浓度以及温度;利用其空间分辨性还可以测量粒子的空间浓度/温度分布。与普通的荧光光谱技术相比,具有更高的灵敏度、信噪比和光谱分辨率等优点,而且测量样品时无需进行复杂的预处理,便于在线分析。,平面激光诱导荧光技术,PLIF检测原理图,平面激光诱导荧光技术,PLIF优点,高空间分辨:可达到微米量级。快速时间响应:时间分辨最高可达纳秒量级,可对自由基等瞬态物质寿命进行检测。高灵敏度:探测下限最高可达106个粒子/cm3。干扰小:通过激光激发,而不涉及接触式的探针等器件,对等离子体,燃烧等干扰相对较小。,平面激光诱导荧光技术,LIF检测系统,LIF 检测系统主要包括激光器、检测光路、光电探测器、信号处理模块。目前常用的激光器是气体激光器,该类激光器结构简单、价格低廉,对应于这些激光器的发射波长,有很多商品化的荧光探针。激光诱导荧光检测器为正交型,即入射光、流动池和荧光检测三者相互垂直。,平面激光诱导荧光技术,Optical configuration of Zetalif 2000 LIFD(Picometrics,France),平面激光诱导荧光技术,LIF分类,Text,Text,Text,Text,Text,Text,测量目的,平面激光诱导荧光技术,举例:示踪平面LIF技术,采用YAG激光器的倍频532nm激光作为激发源。由于自然界中只有某些特殊的高分子有机染料分子可以被532nm激光激发而发出荧光,人们就用这种有机染料分子作为示踪物质加入到所要研究的流场中,观察并测量荧光信号的性质。,液体混合中的高分辨激光诱导荧光成像测量,平面激光诱导荧光技术,激光光源来照明流场,流场中的荧光示踪剂会吸收激光能量并辐射出更长波长的光。在图像采集系统(如PIV相机)的镜头前放置截止滤光片,就可以得到荧光的强度信息。而荧光的强度是与激光能量及示踪剂浓度/温度相关的函数,因此我们可以由该函数计算得到定量浓度/温度信息。,平面激光诱导荧光技术,研究LIF主要课题组,平面激光诱导荧光技术,LIFD主要生产厂家,Picometrics,Beckman,ABI,Unimicro,用于高效液相色谱、毛细管电泳、微流动分析系统等领域;光源为固态二极管激光器,用于毛细管电泳;光源为气体激光器,用于毛细管电泳、微流控系统;光源为气体激光器,光源为固体激光器;具有极佳的灵敏度和超强的稳定性能,平面激光诱导荧光技术,ZETALIF of Picometrics,以固态二极管激光器为激发光源,其光路系统采用共线型设计,所生产LIFD的激发波长范围300900nm,可用于高效液相色谱、毛细管电泳、微流动分析系统等分离领域。,平面激光诱导荧光技术,激光诱导荧光(LIF)检测作为目前灵敏度最高的检测技术,在生物、化学、医学等领域应用广泛。激光光束的高汇聚性使其非常适合于微区检测,LIF 成为微型化仪器和电泳芯片中应用最普遍的检测手段。另外,许多能发自然荧光环境样品和生物样品,通过衍生技术进行荧光检测,因而LIF 成为检测的首选技术。,平面激光诱导荧光技术,LIF应用及展望,平面激光诱导荧光技术,毛细管电泳-激光诱导荧光偏振分析装置与DNA缠绕检测,人常暴露于可造成DNA损伤的环境中,如紫外光、多环芳烃、重金属元素。如果损伤未能得到适当的修复,可引起基因突变,有可能进一步引发癌症或造成细胞死亡。DNA有自我修复功能,保护我们的细胞防止突变。利用荧光偏振特性,揭示DNA修复机器可识别多种不同化学结构DNA损伤的机制。,平面激光诱导荧光技术,水体污染的激光诱导荧光非接触监测技术与系统,在紫外光的激发下,污染水体中的溶解有机物(DOM)会产生特定的荧光光谱,因此利用激光诱导荧光(LIF)可对水体中的溶解有机物的含量进行定量分析,从而可估计出水体富营养化的程度。,平面激光诱导荧光技术,PLIF平面激光诱导荧光火焰燃烧检测系统(Planar Laser Induced Fluorescence Flame Analyzer),提供信息-燃料激光诱导荧光(LIF)成像,空气-燃料混合-火焰前锋可视化成像-火焰自由基分布(OH,NO,CH.)-火焰结构和稳定性-火焰和碳烟的温度-碳烟浓度和初级粒径,平面激光诱导荧光技术,LIF应用及展望,1.气体激光器发射波长单一、价格昂贵、维护费高和寿命短等缺点限制了LIF系统的推广普及。2.固态二极管激光器用于LIF,可以提高检测生物基质中超低量溶质的能力,同时可以保证源于生物基质的背景干涉最小。3.LIF在生物工程中的应用已经取得了丰硕成果,并有一部分成果转化为商品,随着激光、探测及电子等关键技术水平的不断提高,LIF将在生物分析的各个领域中发挥更大的作用。,平面激光诱导荧光技术,参考文献,1激光诱导荧光检测器的研制与性能评价M.北京.2关小伟,刘晶儒.利用平面激光诱导荧光技术测量燃烧场内NO的浓度分布J.强激光与粒子束,1999,11(5):560 564.3梁锡辉,区伟能.激光诱导荧光检测技术J.激光与光电子学进展,2008,25(48).4臧竞存,邹玉林.激光诱导荧光光谱法检测高纯激光晶体中的痕量稀土杂质J.分析仪器,2010,3(25).5杨仁杰,尚丽平.激光诱导荧光快速直接检测土壤中多环芳烃污染物的可行性研究J.光谱学与光谱分析2011,8(31):2148-2150.6孙红梅.激光诱导荧光法检测 SO2的浓度D.吉林:吉林大学,2004:1-32.7王宁.定量测试OH基浓度的PLIF技术研究及应用D.北京:国防科技大学,2009:56-65.8李卿硕.荧光光谱检测设计与研究D.长春:长春理工大学,2008:1-15.,Thank You!,

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