离体小肠段的生理特性.ppt

离体小肠段的生理特性,【目的要求】,学习离体肠段平滑肌的实验方法。了解肠段平滑肌的生理特性。,【实验原理】,哺乳动物消化管平滑肌具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。,这些特性可维持消化管内一定压力，保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化，在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。将离体组织器官置于模拟体内环境的溶液中，可在一定时间内保持其功能。,胃肠平滑肌的收缩反应主要由副交感神经控制，肠肌细胞膜上富含M胆碱能受体，M受体激动剂和拮抗剂均可明显影响其收缩反应。本实验以台氏液作灌流液，在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性，观察药物对离体肠管平滑肌的作用。,【动物和器材】,兔；台氏液；常规手术器械；张力传感器、生物信号采集处理系统恒温平滑肌槽、支架、烧杯、气囊、肾上腺素（1：10000）、乙酰胆碱（1：10000）、阿托品针剂（1支）。,1、调试实验装置,如图，浴槽外的水浴温度为37，浴槽内台氏液调温至370.5。调整好台氏液充气量，（小气泡接连不断）。,2、制备离体兔肠段,用立掌或木槌猛击兔后头延髓部，致其昏迷后立即剖开腹腔。找到胃幽门与十二指肠交界处，在十二指肠起始端扎一线，取出十二指肠、空肠，放入盛有预冷台氏液的表面皿内。先用注射器冲洗内容物，冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段（每一实验小组一段）在其两端结扎。,一端做一短线环固定在通气的L管下方或浴皿内，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中。,3、开启生物机能实验系统,固定L管并调节扎线与张力传感器，使肠段运动自如又能牵动传感器（注意：扎线不可贴壁或过紧过松）。调节增益与扫描速度，使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。,4、实验观察,（1）记录对照肠段运动曲线后，停止供气1分钟并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即恢复供气。用新鲜37台氏液冲洗，待恢复正常。注意作好标记,（2）记录对照肠段运动曲线后，加入25台氏液，并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即用37台氏液冲洗，待恢复正常。（3）同法加入45台氏液并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即用新鲜37台氏液冲洗并待恢复。注意作好标记,由于以上流出液中未加入药物，可以回收使用。以下加入药物的流出液不可再用。,（4）同法，加入2滴肾上腺素（1：10000），观察并记录曲线变化。（5）同法，加入12滴乙酰胆碱（1：10000），观察并记录曲线变化。（6）加入3滴阿托品后立即加入于（5）同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察曲线变化。同（5）比较曲线有何不同。注意作好标记,注意事项,1.温度控制：浴槽内台氏液要保持一定温度；加药前必须准备好更换用的37台氏液。2.游离及取出肠段时，动作要快，取兔肠及兔肠穿线时尽可能不用金属及手指触及。为保持离体肠段的活性，可先预冷充氧的营养液，游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。,3.实验中始终通气。4.上述药物剂量只是参考，效果不明显可补加，每次加药出现效果后，必须立即更换浴槽内的台氏液并冲洗3次，待肠肌恢复正常后在观察下一项目。5.注意作好标记,思考题,1、本实验是否可用麻醉动物的肠段？为什么？2、进行哺乳动物离体组织器官实验时，需控制哪些条件？3、为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化？其机理是什么？4、加入阿托品后再加入乙酰胆碱，肠段活动受到抑制，为什么？5、根据实验结果，说明平滑肌的生理特性。,探索性问题,