深部真菌检测.ppt

深部感染真菌,深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变,深部感染真菌分两大类：1.致病性真菌：此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；2.条件致病性真菌：是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。,一、白色念珠菌,白色念珠菌（canidia Albicans）又称白色假丝酵母菌，广泛存在于自然界，也存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病。为条件致病性真菌。,（一）生物学特性,卵圆形，大小2m4m，革兰氏染色阳性。有假菌丝。,培养特性：典型类酵母型菌落，表面光滑，呈灰白色或奶油色，有酵母气味。涂片镜检，可看到表层为卵圆形芽生细胞，底层有较多假菌丝。,（二）致病性和免疫性,白色念珠菌可侵犯人体许多部位，可引起：1.皮肤念珠菌病：好发于皮肤皱褶处；2.粘膜念珠菌病：鹅口疮、口角炎、阴道炎最多见。3.内脏及中枢神经念珠菌病：肺炎、肠胃炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等。机体可产生一定免疫力。,（三）检验方法及鉴定,1直接镜检：革兰氏染色镜检2培养特点：典型的酵母菌落。,3鉴定试验,1）芽管试验：取少许待检的白色念珠菌接种于0.5ml人或兔血清中，混匀，直37水浴2-3h后，取出一接种环菌液，涂片、镜检。有芽管产生者为白色念珠菌，其他念珠菌不产生芽管。,2）TZC试验：将白色念珠菌接种于含0.005氯化三本四氮唑的沙保培养基中，经2225，2448h培养，白色念珠菌不变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红色。3）糖发酵和糖同化试验：根据这两种试验可将常见的几种念珠菌进行鉴别。,4）动物实验：本菌对兔有致病力。给兔耳静脉注射本菌，经45天死亡。解剖可见肾、肝肿胀、充血，并有小脓肿，涂片及培养均可见本菌及其假菌丝存在。5）厚膜孢子形成试验：本试验亦是鉴定白色念珠菌的重要方法之一，在玉米粉聚山梨酯80琼脂培养基培养本菌，镜检观察到厚膜孢子及假菌丝。,4血清学诊断,用于诊断全身性念珠菌病。以念珠菌为抗原测定机体抗念珠菌抗体,二、新型隐球菌,新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。,（一）生物学特性,较大球形，直径可达520um，有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌，用墨汁阴性显影法镜检，可见到透明荚膜包裹着菌细胞，菌细胞常有出芽，但不生成假菌丝。,在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于25及37皆可生长，而非病原性隐球菌在37不能繁殖。酵母型菌落，呈白色。本菌能分解尿素，以此与酵母菌和念珠菌鉴别。,（二）致病性,本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿。,（三）微生物学检验,1直接镜检：常用墨汁涂片法。2分离培养：在沙保培养基上，室温、3723天即可长出典型酵母型菌落。有荚膜者菌落粘稠。,3糖同化及发酵试验：本菌不发酵各种糖类，但能同化葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。4酚氧化酶试验：在含多巴橘橼酸铁和咖啡酸培养基中，经天培养，新型隐球菌出现棕黑色菌落。尿素酶试验：新型隐球菌产生尿素酶，在尿素培养基（含尿素及酚红指示剂）中分解尿素形成氨和CO2，以致培养基的pH值升高，使酚红由黄变为粉红色为阳性，而白色念珠菌为阴性。,谢谢,