实验五显微镜的使用和细菌的运动观察.ppt

实验五 显微镜的使用和细菌的运动性观察,一、目的要求,了解普通光学显微镜的构造和原理，熟悉其正确的使用方法。学习并掌握油镜的使用方法，学会用压滴法或悬滴法观察细菌运动性的基本技术。,二、实验原理,（一）普通光学显微镜的构造：1.机械部分：镜座、镜臂、载物台、粗细调节器、物镜转换器、镜筒等。-支持、调节、固定等作用 2.光学系统：目镜、物镜、聚光器、照明装置等。,2.显微镜的分辨率:表示显微镜辨析物体（两端）两点之间最小距离的能力，可用公式表示为：D=/2NA=/2nsin(/2)式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。NA，即numerical aperture，是物镜的参数之一：入射光的波长（可见光平均0.55m)n:物镜和被检标本间介质的折射率。：镜口角（即入射角）。,显微镜的性能参数：1.放大倍数=接物镜放大倍数接目镜放大倍数,（二）鞭毛是细菌的运动器官,三、实验材料,显微镜、香柏油、醇醚溶液（或二甲苯）、擦镜纸、吸水纸等。细菌三种形态的染色标本。培养1218h的大肠杆菌或枯草杆菌。盖玻片、凹玻片、接种环、酒精灯。,四、实验步骤,显微镜（油镜）的使用：1、用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。2、打开光源，调节光亮度 3、低倍镜观察：粗调、细调 4、依次再进行中倍、高倍观察 5、油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。6、换片：另换新片，必须从第3条开始操作。7、用后复原：观察完毕，上旋镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。,(一)结合标本片的观察，掌握油镜的使用方法；观察各类微生物染色片，边观察边绘图。,（二）细菌运动性的观察,（1）涂凡士林：取洁净无油的盖玻片1块，在其四周涂少量的凡士林或香柏油。（2）滴加菌液：加1滴生理盐水于盖玻片的中央，用接种环从斜面中挑取适量菌点加到水滴中（注意不要涂抹）。（3）盖凹玻片：将凹玻片的凹槽对准盖玻片中央的菌液，并轻轻地盖在盖玻片上，使两者粘在一起，然后翻转凹玻片，使菌液正好悬在凹槽的中央，再轻压盖玻片，使玻片四周边缘闭合，以防菌液干燥。（4）镜检先用低倍镜菌滴的边缘，然后将菌液移到视野中央换高倍镜、油镜进行观察。由于菌体是透明的，镜检时可适当缩小光圈或降低聚光器以增大反差，便于观察。镜检时要仔细辨别是细菌的运动还是分子运动（即布朗运动），前者在视野下可见细菌自一处游动至他处，而后者仅在原处左右摆动。细菌的运动速度依菌种不同而异，应仔细观察。,1 悬滴法：,（1）滴加菌液：加1滴生理盐水于载玻片的中央，用接种环从斜面中挑取适量菌点加到水滴中（注意不要涂抹）。（2）盖盖玻片：（3）镜检：,2 压滴法：,1.绘出油镜下观察到的任何一种基本形态的细菌，并说明油镜观察应注意什么问题？2.油镜观察时，为什么要滴加香柏油？,五、结果与思考题,