实验三动物细胞的传代培养.ppt

,实验三 动物细胞的传代培养,实验目的,了解和掌握动物细胞传代培养的基本方法及其操作过程。,实验原理,1.贴壁生长细胞传代 采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25的胰蛋白酶液。2.半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打法使纫胞从瓶壁脱落下来，进行传代。3.悬浮生长细胞传代 离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除1/2一2/3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。,实验用品,器材：超净工作台、无菌细胞培养瓶、离心管、吸管、橡皮塞、酒精灯等试剂：PBS、75酒精及酒精棉球、含10小牛血 清的1640培养液、0.25胰蛋白酶消化液实验动物：贴壁细胞系,实验方法,（贴壁生长细胞传代）,消化数分钟,中止消化、吹散细胞,细胞传代,37、5CO2培养,思考题,简述动物细胞传代培养的操作程序及注意事项？,