实验1微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌.ppt

实验一 微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌,目的要求实验原理实验材料实验程序结果与思考题,目 的 要 求,认识微生物实验所需要的各种器皿，了解常用工具和仪器的名称、用途。掌握对玻璃器皿的清洗、包扎方法与干热灭菌的操作过程。,实验原理,微生物学实验要求较高的无菌状态，因此，实验所用的器皿，大多数要进行消毒、灭菌从而用以培养微生物，所以对其质量、规格、洗涤和包扎方法均有一定要求。清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，包扎方法要能保证防止污染杂菌。空的玻璃器皿一般用干热灭菌.,实 验 材 料,玻璃仪器：每人数：培养皿 3套；大试管 3只。每组数：三角瓶 6只；烧杯（500ml）2只；烧杯（1000ml）1只；小试管 6只；吸管（0.2ml 2支，0.5ml 2支，1ml 2支，5ml 2支）共8支 每橱数：量筒（500ml）1只；洗涤用品：去污粉、肥皂、清洗剂、毛刷等。包扎用品：棉花、扎绳、包扎纸等。,实验程序（仪器的认识、清洗与包扎）,（一）学习下列常用仪器的种类、规格和应用范围：培养皿；试管；三角瓶；烧杯；吸管；量筒。（二）学习玻璃器皿的洗涤方法：（三）学习各种器皿的包扎：,由一底一盖组成一套，常用的培养皿皿底直径90 mm，高15mm,皿底皿盖均为玻璃制成。制成平板，可用于分离、纯化、鉴定菌种、活菌计数以及测定抗生素、噬菌体的效价等。,根据其大小和用途不同，有下列三种型号：(1)大试管(约18mm180mm):可装倒平板用的培养基;可作制备斜面用（需要大量菌体时用）装液体培养基用于微生物的振荡培养。(2)中试管(1315)mm(100150)mm:装液体培养基培养细菌或做斜面用,用于细菌、霉菌、病毒等的稀释和血清学试验。(3)小试管(1012)mm100mm:一般用于糖发酵或血清学试验，和其它需要节省材料的试验。,三角瓶:100mL、250mL、500mL和1000 mL 用来装无菌水、培养基和振荡培养微生物等。烧杯:50mL、100mL、250mL、500mL和1000mL 用来配制培养基与各种溶液等。玻璃吸管:1mL、2mL、5mL、10mL,玻璃器皿的洗涤方法:,1、新玻璃器皿的洗涤 在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干净。2、旧玻璃器皿的洗涤（1）试管、培养皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗 A 装有固体培养基：刮掉，洗涤 B 带菌的器皿：2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时或煮沸0.5小时，然后洗涤 C 带病原菌培养物的器皿：先高压蒸汽灭菌，倒去培养物（2）玻璃吸管：吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，反复冲洗 a 吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立即投入盛有自来水的容器中浸泡，实验后集中冲洗。b 塞有棉花的吸管：用水将棉花冲出，然后冲洗 c 吸过含有微生物培养物的吸管：2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时然后洗 d 吸管内壁有油垢：洗涤液中浸泡数小时，再冲洗,洗涤后，若内壁的水均匀分布成一薄层，表示完全洗净，若还挂有水珠，则需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水冲洗。,洗净后的试管倒置于试管筐内，三角瓶倒置于洗涤架上，培养皿的皿底和皿盖分开，依次压着皿边排列倒扣在桌上,晾干.,培养皿的包扎：牛皮纸或旧报纸包紧，一般以58套培养皿包成1包吸管的包扎：1 在上端约0.5cm处，塞入一小段1.5 cm长的棉花（勿用脱脂棉），目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内，或不慎将菌液吸出管外。2 45 cm宽的长纸条.试管和三角瓶等的包扎：,实验程序（干热灭菌的原理和操作方法）,干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越少，凝固缓慢。与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（160170），时间要长（12h），但干热灭菌温度不能超过180，否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。,原理,实验程序（干热灭菌的原理和操作方法）,1装入待灭菌物品 将包好的待灭菌物品（培养皿、吸管等）放入电烘箱内，关好箱门。物品不要摆得太挤，以免妨碍空气流通；不要接触电烘箱内壁的铁板，以防包装纸烤焦起火。2升温 接通电源，拨动开关，打开电烘箱排气孔，让温度逐渐上升。当温度升至100时，关闭排气孔。3恒温 当温度升达到160170时，恒温调节器会自动控制调节温度，保持此温度2h。干热火菌过程，严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故。4降温 切断电源、自然降温。5开箱取物 待电烘箱内温度降到70以下后，打开箱门，取出灭菌物品。,操作方法,结果与思考题,1、通过本次实验你认识了微生物学实验常用的哪些器皿？2、简述玻璃器皿洗涤的基本要求。3、简述干热灭菌的操作步骤。,