基于fret机理的比率型次氯酸荧光探针.ppt

山东大学泰山学堂 2014级班长 李炫璋,指导老师：赵宝祥教授 小组成员：席龙龙 黄秒飞 曾文荟,目录,荧光探针的背景,次氯酸是血红素从过氧化氢和氯离子产生的强大的氧化剂髓过氧化物酶，它是由活化白细胞释放。次氯酸拥有有效的抗菌性能，但过量产生能够导致拥有一个在大范围的牵连的组织损伤人类疾病如神经元变性，心血管疾病，骨质关节炎，肾脏疾病及癌症等。近年来，利用小分子荧光探针可视化监测生物体内的次氯酸是化学和生物学领域的研究热点之一。,细胞中 浓度的普通检测方法,普通检测方法，如：?，需要复杂的事后处理而且会对样品造成损耗。在生物环境下，由于硫化氢的反应活性高，这些方法可能会得到不一样的结果。荧光技术具有很高的敏感性并且操作简单，因此，这一技术变得非常有用。,普通检测方法1.处理复杂2.损耗大3.敏感性低,荧光探针检测,荧光探针的背景,基于FRET机理的比率型荧光探针,单波长探测量的数据是单一波长处的荧光强度，而荧光强度易受外部环境（如温度）、样品本身（如浓度）、仪器条件（如光散射、光漂白、背景光）等因素的影响，需要严格控制实验条件才能得到较准确的结果。荧光比率测定法可消除光漂白，探针负载、留存及设备因素（照明稳定性）引起的数据的失真。,单波长荧光探针 荧光光谱,比率型荧光探针 荧光光谱,单波长荧光探针 荧光光谱,比率型荧光探针 荧光光谱,荧光探针的背景,单波长荧光探针 比率型荧光探针,单波长 两个波长 易受影响 受影响小 环境要求高 环境适应性高,当一个荧光团处于激发态时，由于能量过高，使得该荧光团不稳定，为降低自身能量，,基于FRET机理的比率型荧光探针,该荧光团会将自身能量转移给相邻的分子，实现能量由供体向受体转移，该过程就叫荧光共振能量转移（FRET）。,Fluorescence resonance energy transfer,through-space energy transfer,excitation,emission,荧光探针分子设计思路,荧光探针分子设计思路,我们设计一个比率型荧光探针,我们设计了一个比率型荧光探针，期望该探针能够有较好的水溶性，较长的发射和吸收波长，响应时间短，检测限低。我们用该探针可以与 发生加成的性质来检测 的浓度。,荧光探针的合成与应用,合成路线,合成路线,01,探针分子结构表征,NMR IR MS X-ray,02,03,荧光检测,生物比率成像,荧光探针的检测,选择性抗干扰性敏感性pH影响响应时间,细胞损伤程度，膜透性，光稳定性,响应时间短,激发波长长,水溶性好,细胞毒性小,结果预期,致谢,在此对支持帮助我们的所有老师同学致谢：感谢赵宝祥老师的悉心指导；感谢武文丽师姐的帮助；感谢各位老师、同学的聆听。,THANKS,for listening,