饲料中总磷的测定.ppt
实验6 饲料中总磷的测定,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,1.适用范围配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料、单一饲料中的总磷测定2.测定原理将试样中的有机物破坏，使磷元素游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的（NH4）3PO4NH4VO316M0O3，在波长400nm下进行比色测定,3.仪器和设备实验室用样品粉碎机或研钵分样筛：孔径0.42mm(40目)分析天平：感量0.0001g分光光度计，有10mm比色池，可在400nm下进行比色测定高温炉：可控温度在（55020）坩埚：瓷质容量瓶：50，100，1000mL刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10mL凯氏烧瓶：250 mL或500mL可调温电炉：1000W,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,分光光度计原理：分光光度计分析的原理是利用物质的对不同波长的光呈现选择性吸收现象来进行物质的定性和定量分析根据相对测量原理先设定参比样品（溶剂，蒸馏水，空气等）的透射比为100%，再测量待测样品的透射比，从而达到分析的目的,标准方形池上开口，Teflon（聚四氟乙烯，即特富龙。是一种树脂）盖子，不密封 两面透光 内部抛光，精细打磨 适用于所有标准池支架,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,4.试剂及配置盐酸溶液：11,V+V浓硝酸高氯酸磷标准溶液：将磷酸二氢钾在105干燥1小时，在干燥器中冷却后称0.219 5g，溶解于蒸馏水中，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml（？），用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，即成50g/ml的磷标准溶液,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,4.试剂及配置钒钼酸铵显色试剂：称取偏钒酸铵（分析纯）1.25g，加硝酸250ml，另取钼酸铵（分析纯）25g，加蒸馏水400ml加热溶解，冷却后，将此溶液倒入上溶液，加蒸馏水定容至1000ml，避光保存。如生成沉淀则不能继续使用钼酸铵：用作生产高纯度钼制品的基本原料健康危害：吸入、摄入或经皮肤吸收后对身体有害，对眼睛、皮肤、粘膜和上呼吸道有刺激作用环境危害：不燃，有毒，具刺激性,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,5.试样的选取和制备取有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,6.测定步骤（1）试样的分解干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料）：称取试样25g于坩埚中（准确至0.000 2g），在电炉上低温炭化至无烟为止，再放入高温炉于（55020）下灼烧3小时（或测灰分后继续进行），取出冷却，在坩埚中加入盐酸溶液（1+1，V+V）10ml和浓硝酸数滴，小心煮沸约10分钟，将此溶液转入100ml容量瓶中，并用热水洗涤坩埚及漏斗中滤纸，冷却至室温后，定容，摇匀，为试样分解液,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,6.测定步骤（1）试样的分解湿法：称取试样0.55g于凯氏烧瓶中（准确至0.000 2g）。加入硝酸（化学纯）30ml，小心加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入高氯酸（分析纯）10ml，继续加热煮沸至溶液无色，不得蒸干（危险!）。冷却后加蒸馏水50ml，并煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，为试样分解液,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,6.测定步骤（1）试样的分解盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）：称取试样0.21（精确至0.000 2g）于100ml烧杯中，缓缓加入盐酸溶液（1+1，V+V）10ml使其全部溶解，冷却后转入100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,6.测定步骤（2）标准曲线的绘制准确移取磷标准溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以50ml溶液中磷含量（g）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,PS：吸光度测试方法：1.按动“功能键”，切换至透射比测试模式2.调整测试波长3.置入遮光体，合上样品室，并使其进入光路，按动“调0%T”键调T零，此时仪器显示“00.0”或“-00.0。完成调T零后，取出遮光体4.按动“功能键”，切换至吸光度测试模式5.置入参比样品，按动“调100%T”键，此时仪器显示“BL”延时数秒后便显示“-.000”或“.000”6.置入待测样品，读取测试数据,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,6.测定步骤（3）试样的测定准确移取试样分解液110ml（含磷50750ug）容量瓶中，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测得试样分解液的吸光度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,6.测定步骤（4）测定结果计算试样中总磷的质量分数按下式计算W(P)=a*10-6(V/V1)/m式中：m:试样质量，gV:试样分解液总体积，mlV1:比色测定时所移取试样分解液体积，mla:由标准曲线查得试样分解液含磷量，g/50ml10-6:从g转化为g的系数所得结果应精确到两位小数,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,重复性:每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果含磷量在0.5以下（含0.5）以允许相对偏差3含磷量在0.5以下，允许相对偏差10,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,注意事项1.比色时，待测液磷含量不宜过浓，最好控制在1ml含磷0.5mg以下2.待测液在加入试液后应静置10分钟，再进行比色，但不能静置过久,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,问题：1.为什么在比色时，待测液磷的含量不易过浓？对测定结果如何影响？2.为什么待测液在加入试液后要静置10分钟再进行比色，但不可静置过久？3.试分析导致钼黄显色光度法总鳞测定结果偏高或偏低的的原因。,饲料中总磷的测定（钼黄比色法）,
