微生物实验实验一培养基的配制和灭菌法.ppt

,微生物学实验,本学期农业微生物学实验课共开设6个实验项目。培养基的配制及灭菌法；微生物测数技术；微生物菌落形态观察、纯种分离及接种技术；细菌的染色技术及基本形态、特殊构造观察；放线菌、霉菌形态观察；化学药剂对微生物的作用及拮抗微生物的筛选。,实验课课程安排,一个连续的大实验“环境微生物分离、纯化、观察及功能检测”,实验课考核办法,实验成绩（占课程总成绩30%）,平时成绩,技能考核：操作考试,实验报告:按时交。,操作：,实验室规则和要求,实验一 培养基的配制和灭菌法,培养基：按照微生物生长发育的需求，将不同组合的营养物质调制成的营养基质。,一、实验原理,营养成分,水分 碳源 氮源 无机盐 生长因子,不同微生物的生长对于培养基有不同的要求（细菌、放线菌：pH值中性至偏碱性；真菌喜好酸性）,天然培养基:用生物的组织、器官以及提取物配制成的培养基。通常其化学成分难以确切知道。,合成培养基：用成分和数量已知的化学试剂配制而成。成分明确，重复性好。,半合成培养基:部分天然材料和部分纯化学试剂配制而成。,培养基的种类,1.按照培养基成分不同分为：,培养基的种类,2.按照培养基形态的不同分为：,液体培养基：将配方中的成分溶解而成，不含凝固剂。固体培养基：加入琼脂凝固剂1%-2%.半固体培养基：加入琼脂凝固剂0.2%-0.5%。,培养基凝固剂,琼脂：常用；海藻多糖，不易被分解利用；透明度 好；凝固点：45，溶解点：96；,明胶;易被分解，融化温度低，不耐高温灭菌,硅胶：,基础培养基:,选择培养基：加富培养基 鉴别培养基,培养基的种类,3.按照培养基用途不同分为：,培养基配制流程,原料称量,加热溶解、搅拌,定容,调节pH值,过滤澄清,分装,塞棉塞和包扎、注明培养基名称、班级、组,高压蒸汽灭菌,冷藏、待用,牛肉膏蛋白胨培养基,高氏1号培养基,马丁氏培养基,马丁氏培养基,培养基配方,二、实验内容,1,以小组为单位，分别配制牛肉膏蛋白胨培养基（第一组、第四组）、高氏一号培养基（第二组）、马丁氏培养基（第三组）各400mL。,2,3,4,每组制备无菌水：1个90mL 三角瓶无菌水、6只9mL试管无菌水。,每人包1mL移液管一支。,学习灭菌、消毒方法；操作高压蒸汽灭菌。,灭菌和消毒技术（P16),灭菌：用物理或化学的方法杀死物体上全部微生物的过程。消毒：用物理或化学的方法杀死物体上大部分微生物(特别是 病原微生物)，尚存少数无害微生物。,灭菌（消毒）技术,过滤除菌,辐射杀菌,高温灭菌,化学药剂灭菌,实验作业：,微生物实验报告册P2：1-3,