实验五鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价.ppt

实验五 鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价,一、实验目的,1、掌握鸡新城疫的临诊要点。2、了解和掌握鸡新城疫的实验室诊断和免疫监测技术。,二、实验内容,1、鸡新城疫的临诊要点。2、鸡新城疫的实验室诊断。3、鸡新城疫的免疫效果评价。,HA和HI的原理,1、HA试验：许多病毒表面有血凝素，能与各种动物的红细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称为病毒的血凝现象。2、HI试验：病毒的红细胞凝集现象，可以被特异性免疫血清所抑制，称HI试验。,1、鸡新城疫的血凝试验(HA),【材料】新城疫病毒鸡胚接种尿囊液 1份 0.6鸡红细胞悬液 1管 生理盐水或PBS 1瓶 96孔微量血凝板 1块 微量加样器 1支,【病毒血凝试验的操作方法】,以100%凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价，即为一个凝集单位,单位：L,置于振荡器上振荡1分钟，静置后30 min开始观察结果，待对照孔红细胞已沉淀即可进行结果观察。红细胞全部凝集，沉于孔底，平铺呈网状，即为100%凝集（+），不凝集者（-）红细胞沉于孔底呈点状。以100%凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价，即为一个凝集单位。从表4-1看出，该新城疫病毒液的血凝价为1:128，则l:128为1个血凝单位，1:64、l:32分别为2、4个血凝单位，或将128/4=32，即1:32稀释的病毒液为4个血凝单位。,【结果判定】,2、鸡新城疫的血凝抑制试(HI),【材料】除血球凝集试验所用材料外，血清取鸡免疫血清或者取高免卵黄抗体。,【病毒血凝抑制试验的操作方法】,以100抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即HI效价。,单位：L,以100抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即HI效价。凡被已知新城疫阳性血清抑制血凝者，该病毒为新城疫病毒。从表4-2看出，该血清的HI效价为1:64，用以2为底的负对数(-log2)表示，即6log2。,【结果判定】,1、免疫鸡群发生新城疫流行有何特点？2、简述确证新城疫的实验室诊断方法。3、记录并分析HA、HI实验的结果。4、进行HA、HI实验时有哪些注意事项？,作 业,