实验五药物对离体肠的.ppt

实验七 药物对离体肠运动的影响,一、实验原理,本实验制备兔离体肠道标本，与张力换能器相连，在BL-420型生物信号显示与处理系统上显示用药后的肠运动状态（张力、幅度和节律），从而观察药物对离体肠运动的影响。,二、实验目的,学习兔离体肠道标本的制备方法观察药物对离体兔肠运动的影响,三、实验材料,（一）动物 家兔（二）器材 BL-420型生物信号显示与处理系统，数显恒温平滑肌槽，术剪，眼科镊，注射器，培养皿，缝针，棉线。（三）药品 0.05%硫酸新斯的明，0.01%肾上腺素，0.05%硫酸阿托品，0.001%乙酰胆碱，台氏液,四、实验步骤与观察项目,离体兔肠段标本的制备：取空腹家兔1只，左手持髂上部，右手握木棒，猛击枕骨部致死。迅速开腹，自幽门下6cm处剪取空肠，立即置入盛有冷台氏液的培养皿中，剪去肠系膜，清洗肠内容物，将肠管剪成 2 3cm 的小段，两端各穿一线备用。,2.连接实验装置 标本一端用线系于Z型沟的弯钩上，并置于数显恒温肌槽的内槽中，另一端系在已调好的BL-420型记录仪的张力换能器上，缓缓通入空气（每秒钟气泡12个）。浴槽的营养液以能浸没标本为宜。水浴温度为380.5。,3.软件操作打开分机，再开电脑。点击打开BL-420型生物信号显示与处理系统点击“实验项目”“消化实验”“消化道平滑肌的生理特性”，编辑标记条。,4.实验步骤1待离体肠适应后（收缩张力和频率规则后）,打开记录仪描记一段离体小肠平滑肌的正常收缩曲线，注意观察肠平滑肌张力及收缩幅度的变化情况。,2.给药,记录正常曲线后，在药槽中加入0.05%硫酸新斯的明0.5ml，观察肠平滑肌张力及收缩幅度的变化情况，放掉药槽中的台氏液，加入预先准备好的38新鲜台氏液，重复更换23次新鲜台氏液，待肠段活动恢复至对照水平时，进行下一项实验。在药槽中加入0.01%肾上腺素24滴，观察肠平滑肌张力及收缩幅度的变化情况。后续处理同上。在药槽中加入0.001%乙酰胆碱24滴，观察后续处理同上。观察及后续处理同上。在药数显恒温平滑肌槽中加入0.05%阿托品24滴，待作用明显后，描记变化情况，立即加入0.001%乙酰胆碱24滴，后续处理同上。,五.实验结果,对图形进行分析，比较给药前和给药后离体肠收缩曲线的张力、强度（幅度）、频率（次/10分钟），分析讨论药物对离体肠作用的特点和机理。打印曲线并粘贴在实验报告上。,六注意事项,1.游离及取出肠段时，动作要快，要轻柔。为保持离体肠段的活性，游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。2.悬挂肠段不宜在空气中暴露过久，以免影响其活性。3.加药时不要把药液直接加到肠管上，以免影响结果。4.记录电位时，要保持安静，避免振动实验台，以免影响实验结果。,七.思考题1进行哺乳类动物离体组织器官实验时，需控制哪些条件?2.加入阿托品后再加入乙酰胆碱，肠段活动将如何变化，为什么?加入阿托品后再加入乙酰胆碱，可观察到加入阿托品后肠断收缩力不变，再加入乙酰胆碱肠段的收缩不再被促进；同时加入一定量的阿托品和乙酰胆碱，曲线上升，但不如单纯加入相同浓度乙酰胆碱时上升的那么明显。这说明阿托品是乙酰胆碱的抑制剂，其主要的作用机理是：乙酰胆碱与肠道的平滑肌细胞上的特殊位点结合，促进钙离子在肌浆网中的传递，从而增强平滑肌的收缩；当加入阿脱品后，阿脱品与平滑肌细胞上的乙酰胆碱结合位点结合，竞争性阻碍了乙酰胆碱与平滑肌细胞的结合，从而抑制了乙酰胆碱的作用，但只加如阿脱品时对平滑肌的收缩没有影响。,介绍数显恒温平滑肌槽,1.控氧：打开供氧开关，调节通气量，以每秒钟气泡12个为宜；2.控温：打开设定开关，设定为37，调节恒温开关加热；关闭设定开关，打开测量开关，检测温度，当温度显示为37时，将恒温旋钮调至最低，此时开始保持恒温。由于很多仪器的数显不很准确，为避免影响实验，用温度计进行监控是可靠的办法。,3.冲洗：（1）放出内槽中的溶液：用夹子夹紧保温液和营养液之间的胶管，阻断水流。打开调节阀一，内槽溶液从换液口流出；（2）补充内槽溶液：待内槽溶液流尽后，关闭调节阀一，并用夹子夹住换液口的胶管，打开调节阀二，松开保温液与营养液之间胶管的夹子，溶液从外槽流向内槽。如此反复3次，即可将内槽中的药液冲洗干净。,