法医毒物分析绪论.ppt
LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,法医毒物分析绪论(2),LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,临床医生、法医及警察全面了解事件发生前后的全部情况。中毒者与家属及有关人员的年龄、性别、民族、职业、健康、嗜好、习性用药过敏史等方面的情况；事发现场是否进行过抢救及其它处理。事件发现或发生的始末（时间、地点、症状、救治、饮食等等）；中毒表现。,情况调查,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,提供全部有关情况与毒物分析工作者共同分析，探讨是否与毒物有关、可能涉及哪些毒物、要求毒物分析解决哪些问题、进行检验的可能性、估计能得到什么样的检验结果及其对法医学鉴定的意义等等。,情况调查,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,接受毒物鉴定或毒物检验任务时，除对上述情况充分掌握外，应重视医生诊断意见，尸体外观和尸体解剖或病理检验所见（姿势、尸斑、瞳孔、针眼、病变等），警察在勘察情况、侦查中的发现尤其与毒物有关的情况和事实依据。,情况调查,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,必要时毒物检验人应协同侦查人员亲自进行勘验检查。在化验进行的过程中，有时也需要提出补充调查的意见和要求。,情况调查,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,对怀疑中毒死亡者，应进行全面系统尸体解剖和组织学检验。解剖前应作好充分准备，如洗净、晾干解剖台；准备各种解剖器械、手套等；注意解剖用具不要沾染消毒液，配备收集检材的容器切勿用水冲洗。,尸体剖验,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,尸体剖验,观察尸体的衣着情况及尸体的外表征象，如衣着上是否有流注痕、呕吐物、分泌物和排泄物，口鼻有无特殊气味，皮肤是否有损伤、针孔或腐蚀痕迹，皮肤及尸斑颜色有无异常等。注意血液颜色及局部腐蚀等现象。,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,一般而言，大剂量急性中毒死者，尸检往往仅见肝、肾、脑等器官淤血而无特征性的病理改变；大剂量急性中毒而病程迁延或多次小剂量服毒致死的患者尸检则可观察到一些明显的病理改变。,尸体剖验,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,中毒物所致各器官改变及检查要点,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,毒物分析样品的收集和保存 重视运送程序中的每一环节，因为任何疏忽都可作为法庭上的证据，特别是有反方律师对这些环节提出异议的时候。,采集包装检材,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,不允许在其中添加任何防腐剂，因为这样会妨碍很多药毒物的检测，甚至无法检测。尸体解剖时应在用甲醛固定之前采取检材。检验材料是证明是否含有毒物的原始证据。真实可靠，严防混淆错乱。绝不容许更换替代。足够的数量。,毒物分析中样品的要求,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,1、体外检材 2、血液3、呕吐及胃内容物 4、尿液及粪便 5、肝和其他器官 6、毛发和指甲 7、尸体腐泥,各种检材的采集,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,采取 及时 应防被毁、分解、遗失等。合理 相符、全面、代表、对照。足量 胃内容物原则上全取。包装 玻璃、塑料、清洁、分装、大 小合适、密闭。保存 冷冻 尽量避免用防腐剂，尤其是甲醛。封签 名称、来源、数量、日期、地点、采取人。审查核对 检材是否真实，有无损坏或变换，与送检清单、标签及有关文件是否相符。,检材的采取与审查取材要求,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,如图所示某现场的杯、瓶、餐具及剩余的液体，应全部采取并分别包装、标注,分别包装、标注,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,接收任务 掌握实情目的 判断所提检验要求是否合理 寻找检验线索和方向 验证结果是否与了解的实情相符拟定检验方向 依据案情 中毒症状 解剖所见 检材疑点等,法医毒物分析的一般工作程序,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,内容 取哪些检材、取多少检材、如何处理 检材、如何预试和筛选、用什麽方法 定性和定量等等。依据 分析目的的明确程度、检材性状、药 毒物多少和性质、检验要求、可用的 仪器设备和方法、方法的应变性等,制定检验方案,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,常用的方法有化学法（chemical analysis）、免疫分析法（immunological analytical methods）和仪器分析法（equipmental analysis）。仪器分析法包括光谱分析法（spectra analysis）、色谱分析法（chromatogrphy analysis）、质谱分析法（mass spectra analysis MS）等。,毒物分析（toxicological analysis）,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,常用毒物分析方法,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,形态学方法外观性状鉴别,通过感观对天然药毒物的外观性状进行鉴别形状：根、茎、叶、花、果实、种子等大小：大小、长短、粗细等颜色：表面和内部的色泽表面特征：光滑还是粗糙，皱褶、槽沟、皮孔、毛茸等质地：软硬、脆韧、轻重、粘性、粉性等折断面：平整粗糙、致密疏松、断面纹路及颜色。,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,形态学方法显微形态鉴别,利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后含物的种类及形态等，通过与已知物核对进行鉴定。细胞种类包括纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞等。后含物包括如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,动物试验(animal test),大多毒性大，且具有较强的生理活性和特殊的中毒症状。体外检材充裕、新鲜时，可用动物作急性毒性试验或毒效试验，以预试是否有剧毒或有某类毒物存在。,青蛙毒性试验,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,免疫分析法,机理：抗原抗体特异性结合方法酶免疫法（enzyme immunoassay,EIA)放射免疫法（radio immunoassay,RIA)荧光免疫法（luoro immunoassay,FIA)薄层免疫法（thinlayer immunoassay,TIA)特点：简便、快速、灵敏，种类有限，试剂较贵。应用：吸毒者和运动员尿液中毒品或兴奋剂的筛查。,尿样滴入S孔内，样品在毛细效应作用下向前迁移。尿样中无吗啡存在或吗啡浓度低于阈值浓度时，使测试区（T）内出现一条紫红色的条带。当吗啡高于阈值浓度时，胶体金抗体全部与样品中的吗啡结合，未与吗啡偶联物结合，因此，在测试区不出现紫红色条带。,测试区（T）吗啡偶联物和被胶体金标记的抗吗啡单克隆抗体,质控区（C）,加样孔（S）,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,颜色和沉淀反应,机理 大多为生物碱，能与具有氧化性质的酸性试剂反应生成有色物质；或与某些试剂生成沉淀，甚至特殊晶体。方法 颜色反应:点滴板 沉淀或结晶反应：载玻片 显微镜选用原则 选择性和实用性,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,鸦片生物碱的颜色和结晶反应,吗啡 碘碘化镉钾 马尾松状结晶用于可疑毒品的预试。,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,常用毒物分析方法,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,紫外分光光度法（ultraviolet spectrophotometry）荧光分光光度法（fluorescence spectrophotometry）红外分光光度法（infrared spectrophotometry）原子吸收分光光度法（atomic absorption spectrophotometry）成分大多结构复杂，一般具有紫外吸收或荧光。现场收缴纯品药物制剂或较纯的毒品可直接用光谱法检验。植物、掺假毒品、生物检材，因成分复杂，一般需与色谱联用。,光 谱 法,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,气相色谱法（gas chromatography GC）高效液相色谱法（high performance chromatography HPLC）薄层色谱法（thin layer chromatography TLC）毛细管电泳法（capillary electrophoresis CE）,色 谱 法,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,Mechanism of Chromatograph,AbsorptionPartition Ion-pairSize exclusionAffinity,Solid phase Mobile phase Elute,CaCO3,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,Diagram of Chromatograph,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,毒鼠强中毒者血液提取物的GS-MS图谱检测分析条件：HP-1毛细管柱30m0.25mm，柱温100（1min）20/min280（15min），进样口温度250，接口温度280，离子源温度230，EI电压70ev。,C：选择离子检测方式总离子流色谱图；,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,根据物质分子量、断裂碎片质量大小及结构特征信息的质谱分析法。各类质谱法及多级色质联用法,质谱分析法（mass spectrometry MS）,SampleIntroduction,Ion Source,Mass Analyzer,+,+,+,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,Sample Introduction:Gas Phase(GC)Liquid Phase(LC)Solid,Ion Source:EICIESI FABSIMSAPCIMALDI,Analyzers:QuadrupolesSectorsIon TrapFTMSTOF,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,毒鼠强中毒者血液提取物的GS-MS图谱A：全谱扫描方式总离子流图；B：毒鼠强的质量碎片图；检测分析条件：HP-1毛细管柱30m0.25mm，柱温100（1min）20/min280（15min），进样口温度250，接口温度280，离子源温度230，EI电压70ev。,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,海洛因,O3-单乙酰吗啡,O6-单乙酰吗啡,乙酰可待因,海洛因及其相关药物质谱图,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,不可单凭缺少某一症状或偶然现象 轻易排除某种药毒物存在的可能。当案情或现场已发现某种毒物线索时，不可轻易排除其他药毒物存在或共存的可能。解剖已发现有其他致死原因时，如果案情有涉及毒物的疑点时，不能因已找到死因而排除毒物。,注意排除毒物时要慎重,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,要求有扎实的理论基础和熟练的操作技术外，还需有严密的科学思维。工作应由表及里、先简后繁。整个过程应有计量关系。不放过实验中的任何现象和线索，及时修订检验方案。防止污染。检材、溶剂和废液不能随意倾倒,检验结果和结论必须根据事实作出，不可主观推测。,检验过程,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,所有送请检验或鉴定的事件都应建立检验档案，按规则编号，将检验过程的全部文字材料、图片及能保存的实验结果归档保存备查。,法医毒物分析检验记录与鉴定书,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,全部案情 如事件的发生和发展、侦 察和现场勘察所得、抢救经过、尸体解剖所见、病理检验所得等等。检验全过程 分析方案的拟订和实 施、所用检验方法、操作步骤、现象和结果、工作失误、新的发现等等。记录要求详细、真实、完整,法医毒物分析检验记录与鉴定书,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,鉴定书是作为证据的正式法律文 件，由毒物分析鉴定人出具对一些查证死因的案件，通常由法医出具鉴定书，毒物分析人员一般只向法医出具检验报告。鉴定书和检验报告是证据之一，应以原始记录所记载的事实为依据。,法医毒物分析检验记录与鉴定书,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,内容 案件编号、送检日期、送检单 位、送检人、简要案情、检材情况（种类、数量、包装、新鲜程度等）、鉴定或检验目的和要求、检验方法和结果、鉴定或检验结论、鉴定或检验日期、鉴定或检验人、报告日期、剩余检材处理等。要求 客观，用词简练准确、结论依据充 分。,法医毒物分析检验记录与鉴定书,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,结果是判断中毒或中毒死 的重要依据，阳性结果 检材含被检测药毒物，对于毒性大且非体内正常成分，结合案情和解剖病理所见，可作为中毒鉴的依据。对药用或属于自然界普遍存在，人体内经常含有的，一般需根据 含量作出判断。阴性结果 说明检材中不含被测药毒物 或被测药毒物的浓度低于所用方法的灵 敏度。,法医毒物分析结果的意义和影响因素,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,阳性结果 正常用药、职业接触、环境污染、生活习性、腐败产生、死后污染等。阴性结果 取材不当；中毒量小且性质不稳代谢、排泄快；检材保存不当等。,法医毒物分析结果的意义和影响因素,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,网上资源已成为科技工作者的主要信息来源。在司法鉴定以及相关领域也有许多有关药物滥用及分析鉴定的信息。一、已有的文字资料（如专业期刊、文 摘、专业书籍）、电子版数据。二、网上电子杂志 国际上有关毒物分析、司法鉴定的一些重要专业刊物，如毒物分析杂志、法科学杂志、国际法科学杂志等都可在其主页上直接查询到各期杂志的目录及详细论文摘要，并可进一步检索全文。,分析工作信息平台,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,网上电子杂志,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,如美国法科学学会、毒物工作者协会、美国国家滥用药物研究所在网上发布了很多有关毒物学实验室建设、标准化建设、分析质量控制的信息和有关滥用药物的研究资料，在一些学会、协会的主页上，全球的毒物分析工作者可通过在线论坛，对有关主题发表意见、开展讨论和进行学术交流。,学术团体和机构,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,网上“数字化图书馆”、专业数据库是查找和阅读最新科技文献的主要途径。如通过万维网虚拟图书馆一毒物学(The World Wide Web virtual Library：Forensic Toxicology)，可查找到与法医毒物学、临床毒物学、环境毒物学等相关的网上资源并进行相关连接；通过TOXNET数据库，可检索到毒物的分子式、化学结构、物理化学性质及对人体的毒性资料。,网上数据库,可获取最新的滥用药物研究资料,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,法医毒物分析工作所出具的检验结果或鉴定结论必须科学、公正和权威。而鉴定工作涉及的检材复杂，且待检物未知，含量低微，所以分析质量控制尤为重要。除了对分析方法进行认证而外，对毒物分析实验室的规范化建设，建立有效的技术和质量管理体系也非常重要。,毒物分析实验室规范管理和分析质量控制基本框架,认证分析方法的主要项目纯度和收得率 方法的准确性分析方法的灵敏性线性与检测范围专属性耐用性论证的实施方法模拟试验 空白试验 已知对照试验 随行参比法,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,国际标准化组织（international standard organization，ISO）对行业实验室有国际化的认可准则。1991年法庭毒物学协会（society of forensic toxicology，SOFT）和美国法庭科学协会（American association of forensic science,AAFS）曾共同发布了法庭毒物学实验室准则（forensic toxicology laboratory guidelines），2002年又在该准则基础上进行了修改和完善，为毒物分析实验室的规范化提供了技术和管理要求。,毒物分析实验室规范管理和分析质量控制基本框架,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,质量控制应贯穿毒物分析实验室接受和实施毒物检测的各个环节.人员综合素质，环境设施条件，仪器设备验收、使用、保管、降级及报废制度，合格的实验动物，合格的标准对照品、基准物质，标准操作步骤（standard operating procedures，SOP），检材的采集及保护链，分析步骤，报告结果和资料归档等内容。最终的检验报告和鉴定结果应有行业质量控制专职人员进行质量分析和核查。,毒物分析实验室规范管理和分析质量控制基本框架,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.,谢谢各位！,
