动物细胞懂得融合与单克隆抗体制备.ppt
杂合的原生质体,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,温故知新:,植物体细胞杂交过程,动物细胞能融合吗？,自然融合,两个细胞正在融合,受精作用,1970年，有两位科学家做了一个人鼠细胞融合的实验。,人为诱导融合,2.2 动物细胞工程,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,【学习目标】：1.能够列表比较动物细胞融合与 植物体细胞杂交的异同。2.能够叙述单克隆抗体制备过程；明确各步骤目的；能举例说出其应用及意义。,一、动物细胞融合,(一)动物细胞融合的概念,动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。,.原理：,与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性。,.诱导方式：,物理法：,电激、振动、离心,化学法：,聚乙二醇（PEG）,生物法：,灭活的病毒,例如：仙台病毒,灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。,思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？,(三)动物细胞融合的应用,1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。,2.重要用途：制备单克隆抗体。,总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合,二、单克隆抗体,什么是抗体？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该 抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。,人们获得抗体的传统方法是?将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体这种方法的缺点是什么?,产量低，纯度低，特异性差,每一个效应B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体。如果利用单个效应B淋巴细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体单克隆抗体。,怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？,思考,在体外培养的条件下，一个效应B淋巴细胞能无限增殖形成细胞群吗？什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？,肿瘤细胞,不能,如果把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，所得到的融合细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体单克隆抗体。,制备过程：,免疫动物,灭活的仙台病毒,？种,BB、B瘤、瘤瘤、,杂交细胞,免疫B细胞和骨髓瘤细胞的制备,细胞融合,杂交瘤细胞的选择,杂交瘤细胞的筛选,分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立,单克隆抗体的大量制备,？,？,抗原,效应B细胞,筛选,筛选,注意提取方式！,单克隆抗体,杂交细胞,杂交瘤细胞,骨髓瘤细胞,特异性杂交瘤细胞,杂交瘤细胞系,提取,效应B细胞,动物细胞融合技术,动物细胞培养技术,单克隆抗体的制备过程：,特点：既能产生专一抗体又能大量繁殖,优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备,三、单抗隆抗体的应用,作为诊断试剂,用于体外诊断人类和动植物疾病及病原鉴定，纯度高、特异性强，具有准确、高效、简易、快速的优点。,定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病,利用同位素标记单抗，在特定组织成像,主要用于癌症治疗。生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。）,用于治疗疾病和运载药物,特异性强、灵敏度高 疗效高、毒副作用小 生物导弹单克隆抗体抗癌药物,练习：,1.动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是（）A、融合的原理 B、融合的优点C、融合的诱导手段 D、融合的过程,练习：,2.动物细胞融合的目的中最重要的是（）A、克服远缘杂交不亲和 B、制备单克隆抗体C、培育新物种 D、生产杂种细胞,练习：,3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 D、不经过免疫的B淋巴细胞,练习：,4只能使动物细胞融合的常用诱导方法（）APEG B灭活的病毒 C电刺激 D离心5.“生物导弹”是指（）A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单抗上连接抗癌药物,练习：,6.研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C抗癌物质在克隆细胞中大量合成D单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合,图中B为_过程，常用_作为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，既能_,又能_。,7.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案,该实验方案的目是；,A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生；,制备单克隆抗体,效应B细胞,专一抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌专一抗体,无限增殖,(1)从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_类物质。（2）假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成_ 种类型的C细胞，因此需用_培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是。,抗原,选择性,3,杂交瘤细胞,(4)在培养时通过_分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）_。（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_。,特异性强、灵敏度高,有丝,无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境,
