《动物细胞培养和核移植技术》参考课件.ppt

2.2.1 动物细胞培养和核移植技术,(基础技术),概念,过程,原理,动物细胞培养,组织离体,分散细胞、培养基、细胞生长和增殖,细胞增殖,条件,应用,动物组织块,细胞悬液,原代培养,传代培养,胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,幼龄动物的器官组织；动物胚胎,思考讨论：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？,胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。,思考：,2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？,1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等,因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强,3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？,4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？,成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养,不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体,思考：,有关概念,原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。,细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到4050代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。,有关概念,植物组织培养是在无菌的条件下，置于固体培养基上进行，培养基中要加入有机、无机营养物质和植物激素等,动物细胞培养条件：,1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等）3、温度和PH 36.5+（-）0.5度4、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）,保证细胞顺利的生长增殖,动物细胞培养的应用,1.大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）,2.获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮,3.培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性,4.为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据,植物组织培养和动物细胞培养的比较,概念,过程,原理,动物体细胞核移植,细胞核、去核卵母细胞、动物个体,应用,细胞核的全能性,胚胎移植,2.体细胞核移植技术的应用前景,克隆动物的研究意义,1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白2.改良动物品种 3.治疗人类疾病，作为供体4.保护濒危动物,体细胞核移植技术存在的问题：,许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是（）A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是（）A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A,D,练习,植物细胞杂交与动物细胞融合的比较,制备单克隆抗体,1、常规抗体获得的方法及其特点2、单克隆抗体制备的原理,利用 产生特异性抗体的功能。利用 无限增殖的特性。利用 技术将两种细胞融合获得 杂交瘤细胞。利用 技术大量培养杂交瘤细胞。,B淋巴细胞,骨髓瘤细胞,动物细胞融合,动物细胞培养,3、单克隆抗体的制备4、单克隆抗体的应用,骨髓瘤细胞,免疫小鼠,（选择培养基）,（抗体检测）,与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。,应用主要有：,1、临床诊断,2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤,单克隆抗体的应用,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是（）A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,练习,A,2、动物细胞工程技术的基础是（）A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,D,练习,3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（）A.容易产生各种变异 B具有更强的全能 C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强,D,练习,4、动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于（）A.培养基不同；B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。,A,练习,