KJWI-QA-09水质取样检验规范 .docx

文件修改记录版本修订次数日期修订内容0102011-6-27Page3of22中6.L4中的a井水取样检测频率改1次/12小时A12012-7-76.10水质异常纠偏措施：增加井水余氯大于0.3mgl,水质异常纠偏措施A22013-7-25修订6.2.1水样微生物检验分发号：（仅适用于控制文件）（仅盖有红色印章的文件才有效）1.0目的规定了生产用水检测的方法和标准。2.0适用范围适用水处理工序设备运行过程水质监控及水处理系统清洗消毒结果验证30术语3.1菌落总数：水样在营养琼脂上有氧条件下37培养48h后，所得Iml水样所含菌落的总数。3.2总大肠菌群：指一群在37培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。3.3耐热大肠菌群：用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分开，在44.5仍能生长的大肠菌群，称为耐热大肠菌群。3.4总碱度：是指水中能够接受H'离子即与强酸发生中和反应的物质总量。3 .5总硬度：水中钙、镁离子和其它金属离子的总含量。因其它金属离子的含量很少，一般情况下，总硬度表示钙、镁离子的含量。4 .0职责4.1 质检部负责水质检测和生产部门作业监控4.2 生产部负责设备设施及相应工序的操作5.O工作流程图（无）6.O内容及要求6.1标准6.L1原水、工艺水水质感官：无色、无味、无肉眼可见杂质；6.1.2原水水质必须达到以下要求：项目PH碱度mg/1硬度mg/1井水浊度NTU自来水浊度NTU菌落总数cfu/ml大肠菌群MPN/100m1余氯mg/1标准6.5-8.515045031100不得检出0.05-0.3注：其中硬度、碱度均以CaeO3计6.1.3工艺水水质必须达到以下要求:项目PH碱度mg/1硬度mg/1浊度NTU电导率s/cm余氯mg/1菌落总数cfu/ml大肠菌群MPN100ml标准6.5-8.5757512000.1100不得检出注：其中硬度、碱度均以CaCQ,计6.1.4取样时间与频率：a.生产过程中，原水（井水或自来水）理化指标检测取样检测频率1次/12小时b.生产过程中，工艺水理化指标检测取样检测频率1次/2小时c.井水、工艺水微生物检测取样检测频率1次/1周6.2水质测定6.2.1水样微生物检验6.2.1.1取样前的准备工作将带塞子的三角瓶（具体视取样点个数）放于高压灭菌锅内121°C灭菌30分钟后备用，再取一定数量的棉球（具体视取样点个数）放于塑料烧杯中，加入75%乙醇液至棉球全部浸没，浸泡30分钟以上（即酒精棉球）待用，同时将取样用的镜子（取样端）也放入上述75%乙醇液中浸泡消毒备用。6.2.1.2取样打开取样阀（开启度根据取样适合为宜）排水35分钟,取样前先用消毒后的镜子取一酒精棉球将取样口仔细擦试，再换取一酒精棉球将取样口重新擦试，然后用灭菌后的三角瓶取水样200ml左右，迅速盖上塞子，注意操作过程中手不要接触到瓶口内侧和塞子下端，以免造成操作上的污染，同时清理用过的酒精棉球,将样品带回微生物室待检。6.2.1.3样品的处理6.2. 取回的水样必须在2小时内进行菌落总数和大肠菌群的检验，以免过长时间的放置造成检验结果的不准。6.3. 1.4菌落总数（平皿计数法）I培养基与试剂：营养琼脂成分（gL）：蛋白豚IOg氯化钠5g牛肉膏粉3g琼脂15g配制：称取本品33克，加入100Oml蒸储水中，加热煮沸溶解，分装，121°C高压灭菌15分钟备用；II仪器高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、培养箱36±1、电炉、天平、冰箱、放大镜、PH计或精密PH试纸、灭菌试管、平皿（直径9cm）、刻度吸管、采样瓶等。III检验步骤以无菌操作方法用灭菌刻度吸管吸取ImI充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml已融化并冷却到45C左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36±1°C培养箱内培养48h,进行菌落计数，即为水样ImI中的菌落总数。IV菌落计数及报告方法作平皿菌落计数时，可用眼睛直接观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半平皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。i不同稀释度的选择及报告方法首先选择平均菌落数在30-300之间者进行计算，若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则讲该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例1）o若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30-300之间则视二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均数（如表1中实例2）。若大于2则报告其中稀释度较小的菌落总数（如表1中实例3）。若等于2亦报告其中稀释度较小的菌落数（见表1中实例4）。若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告（见表1中实例5）。若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例6）O 若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例7）O 若所有稀释度的平板上均无菌落生长，则以未检出报告之。如果所有平板上都有菌落密布，不要用“多不可计”报告，而应在稀释度最大的平板上，任意数其中2个拼版ICm2中的菌落数，除2求出每平方厘米内平均菌落数，乘以皿底面积63.6cm2,在乘其稀释倍数坐报告。菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告，大于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零也可用10的指数来表示（见表1”报告方式”栏）。表1稀释度选择及菌落总数报告方式实例不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落数之比菌落总数（cfuml）报告方式/（CfU11）IO1W2IO311365164201640016000或1.6X10422760295461.63775038000或3.8X10'32890271602.22710027000或2.7X10"4150308215001500或L5X1035多不可计1650513513000510000gc5.IXlO5627115270270或2.7X1027多不可计30512305003100O或3.1X106.2.1.5总大肠菌群（多管发酵法）I培养基与试剂i乳糖胆盐发酵培养基成分（g/1）：蛋白陈（20g）、乳糖（IOg）、猪胆盐（5g）、溟甲酚紫（0.0Ig）；配制方法：称取乳糖胆盐发酵培养基35g,加入100Onll蒸馄水中，加热煮沸溶解，分装于有倒立发酵管的试管中，115高压灭菌15min,备用；ii伊红美蓝琼脂成分：豚（IOg）s牛肉浸粉（3g）、氯化钠（5g）、曙红钠（0.4g）、亚甲蓝（0.065g）、乳糖（IOg）>琼脂（14g）；配制方法：称取本品42.5克，加入IOoOML蒸储水中，加热煮沸溶解，分装，121°C高压灭菌,20min后备用;Hi革兰氏染色液结晶紫染色液A成分：a结晶紫Igb乙醇（95%,体积分数）20mLc草酸铁水溶液（IogL）80mLB制法：将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸锈溶液混合。注：结晶紫不可用龙胆紫代替，前者是纯品，后者不是单一成分，易出现假阳性。结晶紫溶液放置过久会产生沉淀，不能再用。革兰氏碘液A成分：a碘Igb碘化钾2gC蒸储水300M1B制法：将碘和碘化钾先进行混合，加入蒸馀水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馈水。脱色剂乙醇（95%,体积分数）。沙黄复染液A成分：a沙黄0.25gb乙醇（95肌体积分数）IOmLc蒸馄水90mLB制法：将沙黄溶解于乙醇中，待完全溶解后加入蒸播水。染色法A将培养18h-24h的培养物涂片。B将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染Imin,水洗。C滴加革兰氏碘液，作用Imin,水洗。D滴加脱色剂，摇动玻片，直至无紫色脱落为止，约30s水洗。E滴加复染剂，复染Iinin,水洗，待干，镜检。II仪器培养箱：36±C.冰箱：OC-4、天平、显微镜、平皿：直径为90mm、试管、分度吸管：1矶,10疝、锥形瓶、小导管、载玻片。III检测步骤i乳糖发酵试验取IOmL水样接种到IOmL双料乳糖蛋白冻培养液中，取ImL水样接种到IOmL单料乳糖蛋白冻培养液中，另取ImL水样注入到9mL灭菌生理盐水中，混匀后吸取ImL（即OJmL水样）注入到IOmL单料乳糖蛋白陈营养液中，每一种稀释度接种5管。检验水源水时，如污染较严重,应加大稀释度，可接种1,0.L0.01mL甚至0.1,0.0.1,0.001mL每个稀释度接种5管，每个水样共接种15管。接种ImL以下水样时，必须作10倍递增稀释后，取ImL接种，每递增稀释一次，换用一支InlL灭菌刻度吸管。将接种管置36°C±1C培养箱内，培养24h±2h,如所有乳糖蛋白陈培养管都不产气产酸，则可报告为大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。ii分离培养将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，于36C±1°C培养箱内培养18h-24h,观察菌落形态，挑取符合下列特征的菌落作革兰氏染色、镜检和证实试验。深紫黑色、具有金属光泽的菌落；紫黑色、不带或略带金属光泽的菌落；淡紫红色、中心较深的菌落。Hi证实试验经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽胞杆菌，同时接种乳糖蛋白冻培养液，置36°C±1°C培养箱内培养24h÷2h,有产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在。iv结果报告根据证实为总大肠菌群阳性的管数，查MPN（moslprobablenumber,最可能数）检索表，报告每IoOmL水样中的总大肠菌群最可能数（MPN）值。5管法结果见表2,15管法结果见表3.稀释样品查表后所得结果应乘稀释倍数。如所有乳糖发酵管均阴性时，可报告总大肠菌群未检出。表2用5份IOmL水样时各种阳性和阴性结果组合时的最可能数（MPN）5个IOmL管中阳性管数最可能数（MPN）0<2.212.225.139.2416.05>16表3总大肠菌群MPN检索表（总接种量55.5Ml,其中5份IomL水样，5份ImL水样，5份0.1mL水样）接种量mL总大肠菌群/接种量mL总大肠菌群/1010.1(MPN/100M1)1010.1(MPN/100M1)000<2100200121014002410260035103800471041000591051201021104011411160126112801371131001491141201511115140204120602161218O22712210O23912312O241112415O251312517接种量mL总大肠菌群/接种量mL总大肠菌群/1010.1(MPN/100M1)1010.1(MPN/100M1)03061308031713110032913212033111331503413134170351513519040814011041914113042111421504313143170441514419045171452205091501305111151150521315217053151531905417154220551915524接种量mL总大肠菌群/接种量mL总大肠菌群/1010.1(MPN/100M1)1010.1(MPN/100M1)20053008201730111202930213203123031620414304202051630523210731011211931114212123121721314313202141731423215193152722093201422112321172221432220223173232422419324272252232531接种量mL总大肠菌群/接种量/矶总大肠菌群/1010.1(MPN/100MD1010.1(MPN/100M1)230123301723114331212321733224233203332823422334322352533536240153402124117341242422034228243233433224425344362452834540250173502525120351292522335232253263533725429354412553235545接种量mL总大肠菌群/(MPN/100M1)接种量mL总大肠菌群/(MPN/100M1)1010.11010.140013500234011750131402215024340325503584043050476405365059541017510334112151146412265126341331513844143651411041542515130420225204942126521704223252294423385231204244452415042550525180接种量mL总大肠菌群/接种量mL总大肠菌群/1010.1(MPN/100M1)1010.1(MPN/100MD430275307943133531110432395321404334553318043452534210435595352504403454013044140541170442475422204435454328044462544350445695454304504155024045148551350452565525404536455392045472554160045581555>1606.2.1.6耐热大肠菌群I培养基与试剂iEC培养基成分：胰蛋白陈（20g）、三号胆盐（L5g）、乳糖（5g）、硫酸氢二钾（4g）、氯化钠（5g）、磷酸二氢钾（1.5g）；配制方法：称取本品37克，加入IooOML蒸储水中，加热煮沸溶解，分装到有玻璃小导管的试管中，每管8ml,121高压灭菌15min后备用；ii伊红美蓝琼脂（同上）II仪器恒温水浴：44.5°C±0.5°C或隔水式恒温培养箱、其他同总大肠菌群多管发酵法III检验步骤自总大肠菌群乳糖发酵试验中的阳性管（产酸产气）中取1滴转种于EC培养基中，置于44.5水浴箱或隔水式恒温培养箱内（水浴箱的水面应高于试管中培养基液面），培养24h±2h,如所有管均不产气，则可报告为阴性，如有产气者，则转种于伊红美蓝琼脂平板上，置44.5°C培养18h-24h,凡平板上有典型菌落者，则证实为耐热大肠菌群阳性。如检测未经氯化消毒的水，且只想检测耐热大肠菌群时，或调查水源水的耐热大肠菌群污染时，可用直接多管耐热大肠菌群方法，即在第一步乳糖发酵试验时按总大肠菌群接种乳糖胆盐发酵培养基在44.5±0.5水浴中培养。IV结果报告根据证实为耐热大肠菌群的阳性管数，查最可能数(MPN)检索表，报告每100OnlL水样中耐热大肠菌群的最可能数(MPN)值。6.2.2水质总碱度的测定6.2.2.1原理：用标准浓度的盐酸溶液滴定水样，用甲基橙做指示剂，根据指示剂颜色的变化判断终点。根据滴定水样所消耗的标准浓度的盐酸溶液用量，即可计算出水样的总碱度。6.2.2.2仪器50mL移液管25mL酸式滴定管250mL锥形瓶6.2.2.3试剂0.5%甲基橙指示剂0.05molL盐酸标准溶液6.2.2.4试剂甲基橙指示剂(5gL)硫代硫酸钠溶液(0.lmolL)盐酸标准滴定溶液(0.02molL)6.2.2.5步骤6.2.2.5.1水样中余氯可破坏指示剂，当水样中含有余氯时，需要加入1-2滴0.lmolL硫代硫酸钠溶液消除。6.2.2.5.2移取50.00InL水样于25OmL锥形瓶中，加入4滴甲基橙指示剂，摇匀。用盐酸标准溶液滴定至溶液由桔黄色刚刚变为桔红色为止。记录盐酸标准溶液用量Vlo6.2.2.5.3水样中总碱度的计算总碱度P(以CaeO3计，mgL)=C(HCL)×0.05005×Vl/V×IO6式中：P(CaCO3)水样的总碱度，mg/L；c(HCl)盐酸标准溶液的浓度，mol/L；V1滴定水样消耗标准盐酸溶液的体积，mL；V所取水样的体积，mL；0.05005与1.00mL盐酸标准滴定溶液c(HCl)=L000mol/L相当的，以克表示的碳酸钙(1/2Caeo3)的质量。6.2.3水质总硬度的测定6.2.3.1原理水样中的钙、镁离子与铭黑T指示剂形成紫红色螯合物，这些螯合物的不稳定常数大于乙二胺四乙酸钙和镁螯合物不稳定常数。当PH=IO时，乙二胺四乙酸二钠先与钙离子，再与镁离子形成螯合物，滴定至终点时，溶液呈现出铭黑T指示剂的纯蓝色。6.2.3.2仪器50mL移液管25mL酸式滴定管250mL锥形瓶6.2.3.3试剂格黑T指示剂(0.5%)缓冲溶液(PH=IO)乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液(0.01mol/L)6.2.3.4步骤6.2.3.4.1吸取50.OmL水样(若硬度过高，可取适量水样，用蒸镭水稀释至50mL,若硬度过低，改用100mL),置于25OmL锥形瓶中。6.2.3.4.2加入12血缓冲溶液(PH=IO)和5滴格黑T指示剂，立即用乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定至溶液从紫红色成为不变的纯蓝色为止，若水样经过稀释则需做空白试验，记下乙二胺四乙酸二钠标准溶液用量。6.2.3.4.3水样中钙、镁含量较大时，要预先酸化水样，并加热除去二氧化碳，以防碱化后生成碳酸盐沉淀，滴定时不易转化。6.2.3.4.4水样中总硬度的计算(匕-1)×c×100.09×l000Q(CaCOW)=，(6)式中：P(CaCoJ总硬度(以CaCO3计)，mg/L；V1一滴定中消耗EDTA-2Na溶液体积，mL；V0空白消耗EDTA-2Na溶液体积，mL；cEDTA-2Na-标准溶液的浓度，mol/L；V水样的体积，单位为毫升(mL)100.09与1.00mLEDTA-2Na标准溶液c(EDTA-2Na)=1.000mol/L相当的以克表示的碳酸钙的质量；6. 2.4水质PH的测定7. 2.4.1仪器6.2.4.1.1酸度计(6173PII):测量范围-6.00-20.00PH单位，精密度±0.OlPH6.2.4.1.250mL烧杯6.2.4.2步骤6.2.4.2.1酸度计的操作按仪器使用说明书或操作规程的要求进行。6.2.4.2.2测量时，用洗瓶缓缓淋洗电极数次，再用待测水样淋洗3-5次，然后插入待测水样中，待仪器数值显示稳定后，读出水样的PH值。6.2.5水质电导率的测定6.2.5.1仪器6.2.5.1.1DDS-307A电导率仪：测量范围：0-l×104uscm6.2.5.1.250mL烧杯6.2.5.2步骤6.2.5.2.1电导率仪的操作按仪器使用说明书或操作规程的要求进行。6.2.5.2.2测量时，用洗瓶缓缓淋洗电极数次，再用待测水样淋洗3-5次，然后浸入待测水样中进行电导率的测定，重复取样测定2-3次，测定结果读数相对误差均在±1%以内，即为所测的电导率值。6.2.6水质浊度的测定6.2.6.1仪器:TSZ型台式浊度仪：量程：0-400NTU,最小分辨：0.OOlNTU6.2.6.2步骤6.2.6.2.1TSZ型台式浊度仪的操作按仪器使用说明书或操作规程的要求进行。6.2.6.2.2装入待测水样的测量瓶需擦净水迹或指印并放入样品池里。6.2.6.2.3待仪器数值显示稳定后直接读取水样的浊度。6.2.7水质游离余氯的测定6.2.7.1仪器PicketColorimeter11口袋型比色计6.2.7.2步骤6.2.7.2.1PicketColorimeterII口袋型比色计的操作按仪器使用说明书或操作规程的要求进行。6.2.7.2.2水样采样后应立即测定，自始至终避免强光、振摇和温热，测定过程应在一分钟内完成。6.2.7.2.3假如在水样中添加试剂后，有短暂黄色产生，表示水中氯浓度过高，请重新稀释水样后，再重新分析，读值后，再乘以稀释倍数，得实际浓度。6.2.8测定结果必须做好质量记录并存档。6. 2.9水质异常纠偏措施序号水样异常情况描述纠正措施1井水检出大肠菌群停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用2菌落总数大于100CFUmL停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用3有异味停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用4PH值大于8.5停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用5总硬度大于450mgl停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用6总碱度大于150mgl停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用7浊度大于INTU停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用8余氯大于0.3mgl停止用水，排放或更换自来水。然后查明原因，采取相应的纠正预防措施，待验证评估井水合格后方可使用9余氯小于0.05mgl停止用水，补加余氯或更换自来水，待验证评估井水合格后方可使用10工艺水检出大肠菌群停止用水，依据工艺水处理系统清洗消毒规范对水处理设备进行清洗消毒11菌落总数大于100CFUmL停止用水，依据工艺水处理系统清洗消毒规范对水处理设备进行清洗消毒12有异味停止用水，依据工艺水处理系统清洗消毒规范对水处理设备进行清洗消毒13PH值大于8.5调节混合水比例，待验证评估合格后方可使用14总硬度大于75mgl调节混合水比例，待验证评估合格后方可使用15总碱度大于75mgl调节混合水比例，待验证评估合格后方可使用16浊度大于INTU调节混合水比例，待验证评估合格后方可使用17电导率大于200/cm调节混合水比例，待验证评估合格后方可使用18余氯大于0.lmg/1调节混合水比例，待验证评估合格后方可使用6.3水处理系统清洗、消毒效果验证序号设备名称清洗介质消毒介质消法率洗方频清毒及效果验证方法质量控制要求1800吨水池常温水二氧化氯见KJWI-PD-22水处理系统清洗消毒作业指导书Ll池内壁外观检查1.2水质感官、理化及微生物检测1、设备外观：应无异味、无水垢、泥沙、藻类等外观异常。2、水质质量见“6.1标准”要求。2原水缸一常温水二氧化氯2.1 缸壁外观检查2.2 水质感官、理化及微生物检测3工艺水缸常温水二氧化氯3.1 缸壁外观检查3.2 水质感官、理化及微生物检测4多介质过滤器一常温水热水(285C)水质感官、理化及微生物检测5活性碳过滤器常温水蒸汽水质感官、理化及微生物检测6树脂过滤器常温水食品级食盐水质感官、理化检测7Iou、5u、Iu过滤器常温水Hcl(2%)NaOH(2%)7.1 进出口水的PH偏差不超过0.37.2 水质感官、理化及微生物检测8反渗透膜Ro膜专用清洗剂RO膜专用杀菌剂、亚硫酸氢钠(保养剂)(2%)8.1 进出口水的PH偏差不超过0.38.2 水质感官、理化及微生物检测9管道及容器常温水柠檬酸(PH:2-4)8.1 进出口水的PH偏差不超过0.38.2 水质感官、理化及微生物检测7. O相关文件无8.0质量记录表单8. 1KJWIF-QA-15水样检验报告8. 2KJWIF-QA-15-002水样感官抽检报告表8. 3KJWIF-Qa-IO水处理系统清洗消毒验证记录