食品微生物自动化仪器检测.ppt
第十五章 食品微生物自动化仪器检测,第十五章 食品微生物自动化仪器检测,第一节 全自动微生物鉴定仪器 第二节 全自动微生物总数和大肠杆菌快速测定仪器 第三节 其他快速测定仪器,第一节 全自动微生物鉴定仪器,检测和鉴定细菌的标准方法是什么?一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统 ATB Expression是自动化微生物鉴定和药敏分析系统,它是从API系统发展而来,由法国生物梅里埃研制生产。以API试剂条试条为基础,测试品种齐全,共有750种反应,电脑数据库不断地完善和补充,鉴定能力强,可鉴定近700多种细菌。,一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统,API 细菌鉴定系统(生物梅里埃)鉴定产品包括试剂条和数据库,试剂条通常包含20个微量生化试验。目前系列 提供的16个产品鉴定范围涵盖几乎所有的细菌群,超过550个不同的种。将操作繁琐、解释冗长的传统方法微量化和标准化,将生化试验试剂条和数据库结合起来,使鉴定工作变得容易、快速和安全。这一创新得益于数值鉴定法的发展。,API 细菌鉴定系统,第一节 全自动微生物鉴定仪器,一、ATB Expression 细菌鉴定智能系统(一)系统原理 1微生物数值编码鉴定技术 细菌的编码鉴定法是根据Bascomb(1978)等人的理论编制而成,新编码鉴定法采用21项生化指标,每3项一组,计有7个组。每组的3项生化试验,凡阳性结果者其数值分别记为1、2、4,反应阴性者记为0,尔后,分别将各组数值相加,依次组成一组7位数值的编码,即代表所鉴定的菌株的相应菌名。一株拟态弧菌的编码鉴定计数:,一株拟态弧菌的编码鉴定计数,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,原理 选择识别力最强的发酵试验、同化试验、抑制试验、酶试验和其他传统的生化反应,经过优化,组成由32个反应联合的专一鉴定试剂条。采用8进位制细菌数码分类法,整个鉴定条10-11位数的生物数码,与标准数据库分类单位比较,得到相似系统和鉴定值,并计算模式频率T值(T index),T值越接近1代表该细菌与典型菌株反应模式越接近。,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,ATB Expression 细菌鉴定及药敏分析仪由阅读器、数字显示电子比浊仪、电子连续加样器、电脑及打印机 组成。,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,主要操作程序1、用光电比浊仪配制菌悬液,将待检菌液浓度调节至各试条要求的范围。2、将试条置入普通培养箱35培养4或24小时。3、将试条置入读数器读数,并打印报告。报告内容包括细菌鉴定、药敏试验S、I、R(部分试条含MIC)的结果,有丰富的专家系统信息,严格控制报告质量。,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,鉴定试条包含风干底物的反应孔,将标准浊度的菌液接种于反应孔,于指定温度培养4小时/24小时后,即可上ATB Expression仪器阅读及分析各生化孔的数据.,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,阅读器能以比色及比浊模式操作,能扫描试剂条条码,自动判断出试条的种类。计算机根据阅读器检测到的结果自动调用相应试剂条数据库,并对数据进行分析,得出生化/同化结果(数值编码)和药敏试验结果。系统将所得编码跟数据库的典型菌株生化谱比较,以客观的2个参数(鉴定百分率及T值)计算鉴定结果。,取菌苔,配制菌液,接种试条,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,上机检测,结果自动判断,保温孵育,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,ATB Expression 细菌鉴定智能系统操作步骤,ATB Expression 细菌鉴定系统 结果检测,ATB Expression 细菌鉴定智能系统,第一节 全自动微生物鉴定仪器,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统(一)系统工作原理(二)VITEK系统的结构组成(三)VITEK系统的特点(四)系统局限性,第一节 全自动微生物鉴定仪器,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统(一)系统工作原理 VITEK对细菌的鉴定是以每种细菌的微量生化反应为基础,不同种类的VITEK试卡(检测卡)含有多种生化反应孔,可达30种。,第一节 全自动微生物鉴定仪器,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统(一)系统工作原理,VITEK卡(检测卡),第一节 全自动微生物鉴定仪器,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统(二)VITEK系统的结构组成1检测卡 2充填机 3读数器/恒温箱 4电脑/打印机 5电源稳压器和UPS VITEK微生物鉴定系统,第一节 全自动微生物鉴定仪器,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统,VITEK自动化微生物分析仪由充填机/封口机、读取器/恒温器、电脑主机及打印机组成,充填机/封口机三分钟内把样本注入试验卡中及封口;读取器/恒温箱自动恒定培养温度并同时读取卡内生化反应变化(系统依据不同型号,容纳60至480张卡不等),电脑主机负责分析资料的储存、系统的操作及分析程式的运作。,第一节 全自动微生物鉴定仪器,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统(三)VITEK系统的特点 P346 可鉴定由环境、原料及产品分离培养出的微生物 主要鉴定菌种包括:肠杆菌科非发酵G(-)杆菌葡萄球菌链球菌酵母菌厌氧菌芽孢菌 其他测试:液体内的细菌计数微生物生长及抑制的研究,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统,VITEK试卡的反应池内含风干底物。试卡由标准浓度菌液充填,然后放入测试槽内,读取器每小时量度卡片内样本在培养介质内生长变化值,直至最后结果打印出来.,二、全自动微生物快速鉴定仪器VITEK系统,第二节 全自动微生物总数和大肠杆菌快速测定仪器,一、微生物总数快速测定仪 二、ISOGRID检测系统 三、大肠杆菌快速测定仪,第二节 全自动微生物总数和大肠杆菌快速测定仪器,一、微生物总数快速测定仪 P347(一)原理(二)微生物总数快速测定仪的特点(三)结构组成(四)操作步骤(五)特点,第二节 全自动微生物总数和大肠杆菌快速测定仪器,二、ISOGRID检测系统 ISOGRID检测系统是一种基于疏水性网膜(HGMF)的过滤系统。该系统通过使用这种有1600个小方格的滤膜,来对微生物进行检测或计数。,第二节 全自动微生物总数和大肠杆菌快速测定仪器,三、大肠杆菌快速测定仪 在快速检测大肠杆菌生化反应的色原及成套鉴定系统(Chromogenic or fluorescence substrates for rapid identification of bacteria)中,新型的色原或荧光底物已代替了传统的糖类和氨基酸。此种底物是由色原(呈色)或荧光与糖类或氨基酸经人工合成的。,第三节 其他快速测定仪器,一、自动菌落计数系统 二、应用电阻抗技术的全自动微生物监测系统 BACTOMETER 三、全自动酶联荧光免疫分析系统(mini VIDAS)四、API细菌鉴定系统,第三节 其他快速测定仪器,一、自动菌落计数系统,第三节 其他快速测定仪器,二、应用电阻抗技术的全自动微生物监测系统 BACTOMETER P351 电阻抗检测法是应用于细菌检测的一项电化学技术,年代美国开始出现以此为原理的自动化仪器。年代年代欧洲也陆续开发出类似的仪器。1998年电阻抗分析法成为除平板分析法外其他微生物检测法中首先被German standardization institution接受的微生物测定方法。,第三节 其他快速测定仪器,三、全自动酶联荧光免疫分析系统(mini VIDAS),Mini VIDAS performs assays using ELFA(Enzyme Linked Fluorescent Assay)technology.,三、全自动酶联荧光免疫分析系统(mini VIDAS),