实验一无菌技术及培养基的配制.ppt

工业微生物与育种学实验,Part 实验基本操作技能实验一 无菌技术及培养基的制备,主要参考资料,微生物学实验指导：黄秀梨，高等教育出版社，2002微生物学实验教程：杨革，科学出版社微生物学教程（第2版）：周德庆，高等教育出版社，2000工业微生物实验操作手册，诸葛健，轻工出版社，1997。伯杰士细菌系统发育手册、真菌鉴定手册、酵母鉴定手册、放线菌鉴定手册等工具书,成绩评定,单独设课，作为一门独立课程严格进行成绩考核。本门课程成绩评定由平时成绩（80%）+实验理论考试（20%）组成。平时成绩包括下列项目：实验纪律及准备（20）平时实验操作和技能（25）实验报告（20）实验设计创新能力及其它能力（15）,实验考试为理论与实践结合的考试，随机从题库中抽取题目，分为：(1)微生物学实验的基本操作技能，包括根据菌落形态鉴别所属菌类，制片镜检，选择相应的配方，配制斜面、平板培养基，包扎灭菌，在培养基上进行分离接种操作等；(2)设计一个大型综合实验的具体实验方案。相对应的考核方法为：(1)由学生从题库中随机抽取5道题，现场口头回答，每题2分力，教师根据其回答情况评分，一共10分；(2)开卷，在大型综合实验，即实验四进行之前完成，占10分。,实验安排,实验报告内容,目的要求实验原理实验材料实验步骤结果与讨论,1.1 无菌技术与培养基的制备,（1）微生物培养的常用器具及其灭菌（2）培养基配置的一般过程（3）选择培养基,1、,Petri dish,（1）微生物培养的常用器具及其灭菌,（2）培养基制备的一般程序,调配 过滤 矫正pH 分装过滤 灭菌（一般121.3，20-30min）鉴定是否有菌 放入冰箱冷藏备用,鉴定是否有菌可将培养基置于37 培养24小时，然后观察,培养基：,液体培养基；固体培养基；半固体培养基；,固体培养基；半固体培养基；,琼脂,实验室常用培养基,肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，琼脂15-20g，水1000ml，；淀粉琼脂培养基（高氏1号培养基）：可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl0.5g，K2HPO40.5g，FeSO40.01g，琼脂20g，水1000ml，pH7.0-7.2;PDA培养基：马铃薯（去皮）200g，蔗糖或葡萄糖15g，琼脂15-20g，水1000ml;,因高压之后pH值会下降0.1左右，所以矫正pH时应比所需的pH高,e.加棉塞，包装。,待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制,高温下培养：分离嗜热细菌；,培养基中不含N：分离固氮菌；,培养基加抗生素：分离抗性菌；,（3）选择培养基,富集培养,从自然界中分离到所需的特定微生物,特定的环境条件,仅适应于该条件的微生物旺盛生长,待分离微生物在群落中的数量大大增加,营养和生理条件几乎可无穷尽组合,根据微生物的特殊要求，分离特定已知微生物种类；,分离培养在特定环境中能生长的微生物；,二元培养物,病毒和宿主细胞；,纤毛虫、变形虫和粘细菌捕食细菌等；,蛭弧菌,