学习项目一色谱分离技术.ppt

利用分配原理，既混合物中各成分在固定相和移动相之间的分配系数的差异使混合物中各成分得以分离。,(2)分配色谱,含义,原于两相溶剂萃取法。将互相饱和的一相溶剂吸着在某种惰性固体粉末或滤纸上，这一相称为固定相，吸着了固定相的物质称为载体（支持剂），用另一种溶剂（展开剂）展开。,基本原理,中性多孔粉末 无吸附作用 与所用溶剂不发生化学反应可吸收一定量的固定液不影响流动液的通过不影响溶剂的性质的组成。,分配色谱的基本构成要素,支持剂,要求,常用的载体有硅胶、硅藻土、纤维素粉、滤纸等,种类,极性和亲水性溶剂 亲脂性溶剂,被分离成分与固定相性质相似,固定相,种类,选用原则,亲脂性溶剂极性和亲脂性溶剂。,被分离成分与流动相性质相反,流动相,种类,选用原则,被分离成分极性大，选极性大的固定相和极性小的流动相；被分离成分极性小，选极性小的固定相和极性大的流动相。,被分离成分,按操作形式分：分配薄层色谱和分配柱色谱。按相的选择极性不同分：正相色谱和反相色谱,分类,在正相分配色谱法中，流动相的极性小于固定相极性。常用的固定相有氰基与氨基键合相，主要用于分离极性及中等极性的分子型物质。,在反相分配色谱法中，流动相的极性大于固定相极性。常用的固定相有十八烷基硅烷（ODS）或C8键合相。,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。主要用于分离非极性及中等极性的各类分子型化合物。中药中的各种苷类特别适合用反相色谱法分离。,反相色谱是应用最广的色谱法，因为键合相表面的官能团不会流失，流动相的极性可以在很大的范围调整，再加之由它派生的反相离子对色谱法和离子抑制色谱法，可以分离有机酸、碱、盐等离子型化合物。高效液相色谱（HPLC）最常用的即是反相填料。,以滤纸为载体，滤纸中的水分（或根据需要加在滤纸上的溶液）为固定相，用适当的溶剂系统为流动相进行展开。,纸色谱,含义,支持剂、固定相、流动相（平面色谱称展开剂）。,滤纸的选择、操作过程：点样 展开 显色（不能用腐蚀性显色剂）比移值计算。,组成,操作技术,含义组成：支持剂、固定相、流动相。操作技术：铺板，不需活化 其他与吸附薄层相同（流动相应预先用固定相饱和）。,分配薄层色谱,含义组成：支持剂、固定相、流动相类型：按是否加压分常压和加压柱色谱按极性不同分正相和反相柱色谱,分配柱色谱,操作技术：装柱 湿法装柱上样及洗脱与吸附柱色谱相同收集洗脱检查结果与吸附柱色谱操作相同,