项目6疫苗生产技术.ppt

项目6：疫苗生产技术,任务1：细菌类疫苗的生产技术,教学安排,1.员工培训 由老师讲解细菌疫苗生产的理论基础及应用范围。分配实操任务：细菌疫苗(用大肠杆菌模拟)的生产。,2.学生模拟组建运营一个细菌疫苗生产企业，撰写计划书(在理论教学期间完成)。市场部：细菌疫苗的种类和用途，市场状况，选择生产的细菌疫苗品种，做市场销售预测。技术部：确定细菌疫苗生产的工艺流程及工艺参数，编制生产操作规程，确定生产车间的布局。,品控部：制定所生产的细菌疫苗质量标准，生产取样分析操作规程，质量检测标准和操作规程。总经理：协调监督各部工作，最后拿出完整的计划书。,3.计划书实施。计划书要先经过老师的审核，然后实施。实施过程中考核操作技能。实施后及时进行实训报告的撰写也总结。,细菌疫苗的生产流程,1菌种的选择菌种应具备的条件是：（1）菌种必须持有特定的抗原性，能使机体诱发特定的免疫力，阻止有关病原体的入侵或防止机体发生相应的疾病；（2）菌种应具有典型的形态，培养特性和生化特性，并在传代过程中，能长期保持这些特性；,(3）菌种应易于在人工培养基上培养；（4）如系制备死菌苗，菌种在培养过程就生产较少毒素；（5）如系制备毒素，应能产生大量典型毒素。,2培养基的营养要求往往需要特殊的营养物才能生长。如：结核杆菌以甘油为碳源；百日咳杆菌要以谷氨酸和胱氨酸作氮源等。3培养条件的控制（1）气体（2）温度接近人体温度。,（3）pH根据需要控制；（4）光避光。4杀菌热杀菌、甲醛溶液杀菌、丙酮杀菌。,5稀释、分装和冻干用含防腐剂的生理盐水稀释至所需的浓度，分装，210保存。三生物制品的分包装1生物制品的分装先检定合格，并有各阶段的制造与检定记录，最近无菌实验超过6个月应重新检定。,标签必须完整、明确，品名、批号必须与分装通知单相符。颜色相同而品名不同的活菌苗、活病毒苗与其他制品不得同室同时分装；全部分装应严格控制无菌，原容器内直接分装，同一容器应当日分装完毕；不同亚批制品不得使用同一灌注用具；温度敏感的应控制25 以下。,装量应多于标签标示量，分装20ml者补1ml分装10ml者补0.5ml，5ml补0.3ml，2ml补0.2ml。2生物制品的包装分包后要作漏检。,重要的细菌及其类毒素类疫苗的生产工艺,一、伤寒疫苗 全菌苗会产生副反应；多糖疫苗要求保持多糖乙酰基不被破坏，需用温和处理方法。(1)生产菌种 伤寒沙门氏菌。,(2)制造工艺 培养和预处理 37深层通气搅拌培养1012 h：对数生长后期平衡前期；0.52.0终浓度的甲醛杀菌,粗制Vi多糖制备 离心除菌；季铵盐络合沉淀；离心收集沉淀，用盐溶解分离；25%乙醇沉淀，除杂蛋白；80%乙醇沉淀多糖。,精制Vi多糖 10%饱和度乙醇钠溶解；冷酚萃取除杂；糖液用CaCl溶液透析；75%乙醇溶液，丙酮脱水干燥。,二卡介苗制备,牛型结核杆菌。表面培养法：采用改良的苏通培养基，温度3739，时间1012d，菌膜收集后压平，移入盛不锈钢珠瓶内，加适量稀释液，低温研磨，制备菌苗。液体深层培养:,三白喉类毒素,1菌种及培养基菌种：第8号菌株。培养基：改良马丁培养基，保浦氏培养基，改良林氏培养基。2培养多用深层培养。,温度3435pH7.07.6糖量用麦芽糖通气量充足氮源补加谷氨酸时间50h左右,3脱毒方法（1）温度越高越快，但超过40会降低抗原性，一般采用3739；（2）pH值越高越快，但碱性会降低抗原性，一般采用7.07.5；（3）甲醛浓度 越高越快，但过高会导致高甲醛残留，且增加注射疼痛。,4、白喉类毒素的精制5、精制类毒素的吸附,四、破伤风疫苗,谢 谢!,