项目四金黄色葡萄球菌检测-革兰氏染色.ppt

呈金黄色，有时也为白色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血环。Why?,血平板鉴定-菌落形态特征,灰色到黑玉色，圆形，光滑突起，湿润，边缘常为淡色（米黄色或灰色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。Why?,Baird-parker鉴定-菌落形态特征,革兰氏阳性菌，球形，组成葡萄状，无芽胞，无荚膜，直径约为0.5 m1 m,鉴定-革兰氏染色镜检,试管法,鉴定-血浆凝固酶试验,血浆凝固酶试验：挑取、Baird-Parker 平板或血平板上可疑菌落1 个或以上，分别接种到5 mL BHI和营养琼脂小斜面，36 1 培养18 h24 h。吸取1：4兔血浆0.5ml放入灭菌试管中，再加入培养后的的BHI肉汤0.5ml，振荡均匀，放在361 水浴锅，每半小时观察一次，至少观察6小时。,阳性反应,阴性反应,不凝固,少量、零散凝固,明显的块状凝固,巨大块凝固,完全凝固，倒置不流动,项目四 金黄色葡萄球菌检验革兰氏染色,一、革兰氏染色步骤,涂片,热固定,初染,媒染,脱色,复染,革兰氏染色阴性,革兰氏染色阳性,二、革兰氏染色原理 G菌细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。G菌肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。,G+和G细胞壁化学组成及结构比较,1、G+细菌的细胞壁。厚而致密，由肽聚糖和磷壁酸组成，以金黄色葡萄球菌为代表。2、G-细菌的细胞壁。分两层，外层为脂蛋白和脂多糖层，内层为肽聚糖层，以大肠杆菌为代表。,三、常用的染色方法,1、染色的基本原理主要是通过细胞及细胞物质对燃料的毛细现象、渗透、吸附等物理因素，以及各种化学反应进行的。2、染料种类染料按其组成成分可以分为天然染料和人工染料染料按其电离后染料离子所带电荷的性质分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类,3、染色方法（1）单染色法 用一种染料使微生物染色，如美蓝、孔雀绿、碱性番红、结晶紫和中性红等。（2）复染色法 又称鉴别染色法 是用两种或两种以上染料进行染色，有协助鉴别微生物的作用。最常用的鉴别染色法为革兰氏染色法。（3）特殊染色法 针对一些特殊情况而进行染色的方法。,