宠物人兽共患病莱姆病的诊治要点.docx

宠物人兽共患病莱姆病的诊治要点莱姆病是由伯氏疏螺旋体引起的一种婢传性人兽共患传染病。1977年美国医生A.CSIeere发现康涅狄格州莱姆镇流行的青少年关节炎是一种独立的疾病，并称之为莱姆关节炎。1982年，昆虫学家WinyBUrgdOrfer从采自疫区的达敏硬婢中发现和分离出莱姆病疏螺旋体。1984年Johnson根据其基因型和表型特征，认为该螺旋体是一个新种，命名为伯格多弗疏螺旋体。随后的调查研究证实该病是一种能引起人体多系统、器官损害的全身感染性疾病，命名为莱姆病。莱姆病流行广泛，它危害人和多种动物的多种器官、系统，造成全身感染，慢性游走性红斑（ECM）是其特征性症状，对人和动物的健康影响甚大，也给畜牧业造成相当大的损失,因而受到医学界和兽医学界的高度重视。一、病原（一）分类地位莱姆病病原体即伯氏疏螺旋体是螺旋体科疏螺旋体属的新种。（一）形态学及基本特征伯氏疏螺旋体是一种单细胞疏松盘绕的左旋螺旋体，长1040um,一般具有410个疏螺旋，螺旋波长度为1.82.8m,菌体宽度0.20.3u11莱姆病螺旋体由表层、外膜、鞭毛、原生质柱组成。具有抗原性的外膜蛋白有OspA,OspB,OSPC等。（三）培养特性伯氏疏螺旋体嗜氧，革兰氏染色阴性，生长缓慢，分离周期为820h,适宜生长温度为33o菌体末端纤细呈丝状，在暗视野显微镜下观察可见菌体作扭曲、翻转等螺旋体典型运动状态。（四）理化特性伯氏疏螺旋体对热（5070。C）有一定的抵抗力，但采用高温短时法对牛奶进行巴氏消毒处理，可杀死牛奶中存在的菌体。该菌属发酵型菌，不能在自然外界环境中独立存在,其发酵代谢产物为乳酸与梅毒螺旋体和钩端螺旋体不同。二、流行病学（一）传染来源莱姆病是一种自然疫源性疾病。其传染源包括小型啮齿类动物、大型哺乳类动物和鸟类。国外已从鼠类，鹿、熊、狗、牛、马等20多种哺乳动物和7种鸟类分离到本病原体。所有的传染源中，小鼠直接参与伯氏疏螺旋体生活周期，而且可以耐受高水平螺旋体血症，成为本病的主要贮存宿主和主要传染源。（一）传播途径莱姆病是一种婢媒传染病。婢是人、动物多种感染性和寄生性疾病的传播媒介和病原体的储存宿主。婢在吸吮具有菌血症动物的血时被感染，并在以后的吸血过程中，通过其唾液将病原体传给新的宿主。已从多种睥体内分离或检测到莱姆病螺旋体的存在。病原体在睥内各器官都有分布，携带有病原体的婢可多途径多方式地传播病原体，但主要通过叮咬吸血时经唾液将螺旋体传染给人及宠物。婢的幼虫、若虫和成虫3个发育阶段均需叮刺吸血才能完成。幼虫只叮刺小型宠物，而若虫不仅叮刺中小型动物亦可叮刺大型宠物，成虫则叮刺大型宠物。最近有研究表明，海鸟和候鸟在远距离的传播上起重要作用。（三）易感宠物我国在16个省、市、自治区的调查显示，至少有牛、羊、狗、鼠、兔等5种动物中存在莱姆病的感染。在宠物中，犬在户外、野外活动较多，受感染概率更大。犬感染率可达38.5-60.0%o（四）流行特征莱姆病分布广泛，呈世界性流行，除南北极外，遍及世界五大洲。在美国就有46个州存在莱姆病流行。该病呈地方性流行，其分布具有明显的地区性，主要是在有利于硬婢生长繁衍的山区、林区、牧区。我国莱姆病的高发地区主要在东北和西北地区。同时，该病又具有明显的季节性，多发生于温暖季节，初发于4月末，一般从5月初开始，6月上中旬达到高峰，811月仅见散在病例。11月终止。这些特征与某些特定的婢的种类、数量及其活动周期相关。莱姆病的流行特征受到自然地理和人为因素的影响，媒介睥类、宿主动物与人类和宠物接触的机会越多，莱姆病流行的可能性就越大。三、致病性(一)对宠物的致病性1 .犬发热、厌食、嗜眠、关节炎、跛行。发生心肌炎和肾炎、肾功能紊乱、氮血症、蛋白尿，尿中含有尿圆柱、脓细胞和红细胞。2 .马嗜眠、低热(38.639.PC)。触摸婢叮咬部位时可见高度敏感，易发生脱毛和皮肤剥落现象。前肢或后肢出现疼痛和轻度肿胀，跛行或四肢僵硬，不愿运动。有的病马出现脑炎症状，大量出汗，头颈歪斜，尾力减弱，吞咽困难，常出现无目标的运动。3 .羊绵羊羔自然感染莱姆病时表现低热，厌食，肢关节肿大、跛行。血清抗伯氏疏螺旋体阳性，病羔体内肌酸酎激酶活性升高。(一)对人的致病性莱姆病螺旋体可以引起人体多系统、多器官的损坏。根据病程发展、临床可分为3期。早期局部性感染、中期播散性感染和晚期持续性感染。早期局部性感染表现为婢叮咬后332d,在叮咬处出现慢性游走性红斑（ECM）为特征性症状，大约30%的莱姆病病人出现这种早期表现。中期播散性感染表现为ECM出现数天或数周后，发生继发性红斑、脑膜炎、脑膜脑炎、面神经炎、神经根炎，视神经炎、房室传导阻滞、心肌炎等。晚期持续性感染表现为发病后612个月后，出现关节炎和萎缩性肢皮炎，其他尚有亚急性脑炎、强制性麻痹和极度衰竭等。现已从病原学和临床治疗上证实少数病人可出现精神异常。四、诊断（一）临床诊断要点1 .宠物临床诊断要点应综合流行病史（婢叮咬史或疫区接触史）、临床表现和实验室检查结果进行判断。剖检犬的病理变化主要是心肌炎、肾小球肾炎及间质性肾炎。马在心和肾表面可见苍白色斑点，腕关节的关节囊显著变厚，含有较多的淡红色浸出液,同时有绒毛增生性滑膜炎。有的病例胸腹腔内有大量的液体和纤维素性渗出，全身淋巴结肿胀。2 .病人临床诊断要点人有被婢叮咬史和典型的临床表现ECM即可判断为莱姆病。中、晚期菜姆病的诊断主要依赖于实验室诊断。(一)实验室诊断要点聚合酶链反应(PCR)技术具有高的灵敏度和特异度，快速方便，需要的样本量少，对莱姆病尤其是早期莱姆病的实验诊断不失为一种好的方法。但国内这方面的工作开展较少，试剂选择也有一定的局限性。目前血清学检查是确定莱姆病螺旋体感染的唯一实用性手段，常用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光试验(IFA)法，目前仍然是较好和实用的方法。但这两种方法存在一定的假阳性和假阴性,较难用作莱姆病的确诊依据。五、防控措施(一)监测1.病原学检测(1)直接检测法。取感染动物的组织、血液或者婢中肠等直接进行涂片后用显微镜暗视野观察，这种常规的直检法较可靠，但需丰富的检验经验，同时，无法检测到混合感染的情况，而且该法容易漏检，与其他诊断方法相比，直接检查的检出率相对较低。(2)分离培养法。采集感染动物的血液、尿液等，接入培养基进行培养，或者用传播媒介婢类分组，750mLL酒精浸泡后，生理盐水漂洗，再用无菌水清洗。然后置于无菌研磨器中研磨，研磨过程中加入少量BSK-U培养基。研碎后离心,吸取上清液接种至BSK-H培养基中，于33。C培养7IOd后，采用常规显微镜暗视野观察。从标本中分离培养螺旋体是莱姆病检测的金标准，但是如果样品中伯氏疏螺旋体数量少，则螺旋体生长缓慢，对大部分样品来说很难分离培养出螺旋体。此方法可直接观察分离培养物中的螺旋体生长情况并作初步计数，不会出现假阳性，但是分离率低，耗时较长，敏感性差。2 .血清学检测主要有免疫荧光法、酶联免疫吸附试验、免疫印迹和免疫酶染色法。间接免疫荧光方法(IFA)是利用阳性血清检测样本的抗原性，判定样本的感染情况。但是IFA只能检测到菌体表面的抗原，灵敏度和特异性都比较低。IFA受实验因素影响大，易造成假阳性或假阴性。酶联免疫吸附试验(ELISA)主要对莱姆病特异抗体IgG进行检测，传统ELlSA检测方法存在非特异反应，虽然灵敏度高，但缺乏特异性，易误诊。免疫印记法特异性较高，有一定应用价值，但操作比较复杂。3 .分子生物学技术检测(1) PCRo随着聚合酶链反应方法具有敏感、特异，操作简便、易实现自动化、耗时短等优点。但在使用上存在一定的局限性，一是需要较高的实验条件和设备，操作规程要求严格。二是它的高敏感性，即使标本中有微量的交叉污染亦可出现假阳性反应，故所用容器设备必须从未接触过莱姆病螺旋体及其DNA浓缩样和PCR终末产物，以减少假阳性反应。三是PCR方法检测只能是针对单一种的伯氏疏螺旋体,然而，在大多数流行婢传病的地区，动物可能感染好几种莱姆病疏螺旋体，因此，如果要确定一头动物究竟感染了几种螺旋体，就得使用好几种方法，在实践应用中较为不便。(2) RLBo是反向线点杂交技术。针对现有技术检测婢体内莱姆病病原伯氏疏螺旋体时检测病原单一，不能同时检测出混合感染的发生，且敏感性低的缺点，RLB方法提供了一种能够直接、综合性、高特异性和敏感性地检测出目前已知所有的被检样品中的螺旋体感染的分子检测方法。国外已将此技术应用于莱姆病的诊断和流行病学调查。(一)预防莱姆病的预防主要采用综合措施，即环境防护、个体防护相结合的措施，定期消灭传播媒介老鼠、婢类等，对宠物定期驱除外寄生虫。另外，少带宠物到有利于硬睥生长繁衍的山区、林区、牧区，尤其是温暖季节。