遗传学第六章病毒的遗传分析.ppt

第六章 病毒的遗传分析,一、病毒的形态结构与基因组 P184二、噬菌体的增殖与突变型（一）噬菌体的增殖 P186（二）噬菌体的突变型1、条件致死突变 在某些条件下，导致某些突变型致死，而另 外一些条件下仍能增殖。致死条件为限制条件（restrictive condition)。增殖条件为许可条件（permissive condition)。,（1）温度敏感突变 热敏感突变 冷敏感突变（2）抑制因子敏感突变（sus突变）sus突变 su+突变：宿主菌含有抑制基因su+，sus突变噬菌体感染此类菌时能产生后代。,2、噬菌斑形态突变,（1）T4噬菌体简介 T4噬菌体为T-偶列噬菌体之一，基因组为165Kb的双链DNA分子，包括160个基因，宿主为E.coli。形态特征 环状遗传学图,（2）T4野生型和突变型侵染E.coli B,和E.coli K(）噬菌斑的变化 快速裂解（rapid lysis，r）突变：r-，形成大噬菌斑；r+，缓慢裂解，形成小噬菌斑。P191表8-4 T4 野生型和突变型的区别 类型 表型 B K(）野生型 小噬菌斑 小噬菌斑 r 大噬菌斑 无噬菌斑,3、宿主范围突变型 宿主范围(host range，h)：h-表示可同时感染两种不同的E.coli菌株B，B-2，噬菌斑透明。h+表示只感染菌株B，噬菌斑半透明。,三、噬菌体突变型的重组测验,（一）Benzer的重组测验和基因的 精细结构分析实验：T4 r区两种突变型r63，r12同时侵 染E.coli B 和E.coli K(），结果如下：,重组率=2野生型噬菌斑数 100%噬菌斑总数 重组测验：确定突变基因间的空间关系。,（二）T2突变型的两点测交与作图,（三）噬菌体的基因重组与作图（四）T4突变型的三点测交与作图,四、噬菌体突变型的互补测验,（一）互补测验与顺反子互补测验：确定突变基因间的功能关系。判断两个突变是位于同一个基因内的突变，还是两个基因间的突变。互补：一种突变型能弥补另一种突变型不具有的功能。这两种突变就称为彼此互补。顺式排列，反式排列。,斑点测试法（spot test)P196 用一种r突变型以0.1的感染比（噬菌体1:细菌10）感染大肠杆菌K(），噬菌体和细菌在温热的琼脂中混合，涂布在营养平板上，琼脂凝固后，在平板上划出一定位置，再在上面滴加含另一种r突变型的培养基。在这一滴培养基范围内，一些菌被两种噬菌体感染，如这范围内形成噬菌斑，就证明这两种突变型互补，相反则不互补。在一个培养基上可做68个斑点试验。,在反式测验中，如两个突变之间能互补，则表明两个突变是位于两个基因（顺反子）内的突变。如两个突变之间不能互补，则表明两个突变是位于同一个基因内的突变。,顺反子：一个不同突变之间没有互补的 功能区称为顺反子（cistron)。,（二）基因内互补 例外情况。如：沙门氏杆菌甘油磷酸脱氢酶基因；大肠杆菌和脉孢菌色氨酸合成酶 基因；脉孢菌谷氨酸脱氢酶基因。1、基因内互补和基因间互补的区别 P2002、基因内互补的作用机制 P202图8-14,五、噬菌体T4 r缺失突变与作图,（一）缺失作图的原理,缺失突变（deletion mutation）：一个顺反子内缺失一段核苷酸的突变。点突变（point mutation）：一个顺反子内单个核苷酸发生的改变。当同一顺反子内的缺失突变和点突变重叠时，不能产生基因内重组,因此无野生型噬菌体。,（二）缺失作图的方法,利用重叠缺失定位未知的r突变：根据是否产生野生型噬菌体，系列将r突变定于A5片段；系列将r突变定于A5c区；系列将其定于A5c3区。,r基因座A、B顺反子的部分突变图，每个正方形代表一个独立分离的突变,六、噬菌体的基因组与位点专一性重组,（一）噬菌体的基因组,(二）位点专一性重组的分子机制,参与整合，切离主要的酶：整合酶（Int);整合宿主因子(IHF);切离酶（Xis）。,七、环状排列与末端重复 基因组串联体,