血液系统疾病流式细胞术分析.ppt

血液病的流式细胞术分析,流式细胞术在血液病中的应用：急性白血病免疫分型淋巴细胞增殖性疾病免疫分型骨髓增生异常综合征辅助诊断微小残留白血病ZAP70、P糖蛋白等预后指标检测PNH（CD55、CD59）细胞周期分析CD34+细胞绝对计数,标本种类,外周血骨髓胸腹水脑脊液淋巴结细针穿刺液活检组织,标本要求,室温或24 72h内骨髓：急性白血病，MDS，MM外周血：CD55、CD59，LGL,标本前处理：,离心收集细胞（胸腹水、脑脊液）或制备细胞 悬液（活检组织）了解标本中细胞组成（瑞氏染色、台盼蓝染色）,细胞浓度调整,一般处理步骤胞膜抗原：标记-溶血-洗涤胞浆抗原：标记-溶血-固定/破膜-标记-洗涤免疫球蛋白：溶血-洗涤-标记-洗涤,设门方案SSC/FSCCD45CD19、CD20 CD3、CD5,光散射特征与细胞形态的关系,正常骨髓,淋巴,单核,粒细胞,CD45,SSC,原始,嗜碱,嗜酸,Blastwindows,抗体设置,髓系一般标志：CD13、CD33、CD117、MPO其他标记：CD14、CD64、CD4 CD71、Gly A CD61、CD41 CD36其他非髓系标记：CD2、CD5、CD7、CD56、CD19,骨髓增生异常综合症（MDS）,主要表现为粒系及单核系抗原表达异常正确的结果解释有赖于良好的质量控制和标本细胞活性,B淋巴细胞,、确定克隆性 阶段性B细胞标记物：CD5、CD10、CD20、CD22、CD23、FMC7 其他标记物：CD11c、CD25、CD103、CD38,T/NK细胞,抗原表达缺失和强度变化T淋巴细胞：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8NK细胞：CD16、CD56,benign,Malignant,结果分析,分析的重点在于确定每一个细胞标记的存在与否以及表达的强弱（模式识别）。每个抗体在阳性细胞上的表达百分率并不重要。以残存正常细胞（如正常成熟淋巴细胞）作为分析参照物。结合细胞形态可事半功倍。,AML-M1,AML-M2,AML-M3,AML-M4/M5,AML-M6,非造血细胞,非特异性染色（死亡细胞）,ALL,血小板附着于原始粒细胞所致CD61阳性拖尾,巨核细胞白血病,微小残留白血病：灵敏度为1/10001/10000 以初诊时免疫表型作为设置抗体组合的依据 排除非特异性染色细胞和杂质的影响,原血细胞,结果报告,