茶专《茶树病虫害防治》实验.ppt

茶树病虫害防治实验,指导教师：宁万光、周顺玉、胡肄珍、林继红,实验三、植物病害的症状类型观察,一、实验目的认识植物病害的主要症状，并对各类病害的典型症状有一概念，为田间诊断病害打好基础。二、内容说明植物病害的症状包括病状和病征。病状是指植物得病后本身所表现的反常状态；而病征则是指病部所构成的特征。本实验提供了各种病状，病征供同学们观察。三、材料与设备（一）材料1、病毒病 水稻黄矮病、烟草花叶病、香蕉束顶病、木瓜花叶病、白茶病毒病。2、细菌病害 水稻白叶枯病、白菜软腐病、番茄（或茄子）青枯病、茶根癌病。3、真菌病害 十字花科霜霉病、瓜类白粉病、小麦白粉病、小麦赤霉病、油菜菌核病、麦类黑穗病、玉米黑粉病、稻瘟病、茶毛发病、茶线腐病、茶云纹叶枯病、茶饼病、茶轮斑病、茶果腐病、小麦各种锈病、茶（或桑）紫纹羽病、茄绵疫病。4、生理性病害 各种作物缺素症。（二）设备 手持扩大镜、双目镜、镊子、挑针、玻片等。,实验内容,仔细观察每一实物标本，明确其所属类型。（一）病状类型 常见的有下述类型。1.变色 取水稻黄矮病、烟草花叶病、白菜病毒病、缺素症枝叶等标本，观察叶片的颜色变化。2.坏死或腐烂 由于坏死组织的性质不同可以分以下几种：斑点：取茶白星病等材料，注意斑点的形状、大小、颜色。3.腐烂：分干腐和湿腐两种，取番薯软腐病、白菜软腐病等标本观察。立枯和猝倒：观察黄瓜猝倒病标本。4.萎蔫：观察番茄（或茄子）青枯病、并与健株比较。5.畸形：观察瘤肿、丛枝、矮化、徒长、叶片畸形等。,（二）病征类型,絮状物：观察茄绵疫病标本，病部有无蜘蛛网状或絮状物。霉层：观察稻瘟病等标本。霜霉：观察十字花科蔬菜霜霉病标本，叶背面有无霜霉状产生？白粉：观察瓜类白粉病标本，白粉状物着生在何部？黑粉：观察麦类黑穗病。锈病：观察麦类锈病或豇豆锈病标本。颗粒状物：取茶轮斑病或黑痣标本观察，病部有无黑色小颗粒状物？菌核和菌素：观察紫纹羽病、毛发病、线腐病等标本，注意菌核的形态、色泽、大小。菌脓：植物病原细菌产生的脓状粘液。,作业,将观察标本的结果填入下表（至少填写10号标本）,有性态布氏白粉菌属子囊菌亚门布氏白粉菌属；无性态为半知菌亚门串珠状粉孢菌。,图2-4 小麦白粉病菌左.分生孢子和分生孢子梗(彷康振生等)右.闭囊壳及子囊,黄萎病：大丽轮枝菌半知菌亚门,棉花枯萎病原物为尖镰孢萎蔫专化型半知菌亚门镰孢属。,图6-1 棉花枯萎病菌1.小型分生孢子梗；2.大型分生孢子梗；3.大型孢子;4小型孢子,图6-2 棉花黄萎病菌1.分生孢子梗及分生孢子;2.干燥时分生孢子着生状;3.湿度大十分生孢子着生状(假头状着生)4.膨胀菌丝;5.厚垣孢子;6.拟菌核,瘤黑粉病原为玉米瘤黑粉菌属担子菌亚门黑粉菌属,丝黑穗病原为孢堆黑粉菌，属担子菌亚门孢堆黑粉菌属,图3-3 玉米丝黑穗病菌（示冬孢子及冬孢子萌发）,条锈成行叶锈乱，秆锈是个大红斑,条锈病菌：条形柄锈菌 秆锈病菌：禾柄锈菌 叶锈病菌：隐匿柄锈菌三种病菌均属担子菌亚门柄锈菌属。,病原为核盘菌属子囊菌亚门核盘菌属。,病原物为畸形外囊菌 子囊菌亚门外囊菌属,TMV引起的烟草花叶病,CMV引起的烟草花叶病,PVY引起的烟草花叶病,烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus，简称TMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，简称CMV）马铃薯Y病毒（Potato virus Y，简称PVY）,线虫纲的根结线虫属 侵染所致,1.子叶的症状 2-3.叶片的症状 4.茎的症状5.棉铃初期症状 6.棉菱后期症状 7.病原细菌,棉角斑单胞杆菌细菌，黄单胞杆菌属,其他一些例子,稻瘟病病原（稻梨孢）,谷粒瘟,穗颈瘟,节瘟,叶瘟（白点型）,叶瘟（褐点型）,叶瘟（急性型）,叶瘟（慢性型）,苗叶瘟,稻瘟病坏死霉状物,无性阶段为半知菌亚门梨孢属灰梨孢菌 有性阶段为子囊菌亚门真菌,病原菌为黄单胞菌水稻致病变种 黄单胞菌属细菌,水稻白叶枯病坏死菌脓,无性态阶段为半知菌亚门立枯丝核菌；有性阶段为担子菌门亡革菌,水稻纹枯病坏死菌核,半知菌亚门，长孺孢属,坏死霉状物（黑绒）,有性态为稻麦角属，子囊菌亚门麦角菌属；无性态为绿核菌，半知菌亚门绿核菌属,坏死粉状物,水稻条纹病毒（Rice stripe virus,RSV），纤细病毒属（Tenuuivirus）。,坏死、畸形无病症,有性态为玉蜀黍赤霉子囊菌亚门赤霉属，无性态为禾谷镰孢，半知菌亚门镰孢属。,坏死霉状物（粉红色）,有性态为大斑病毛球腔菌，子囊菌亚门毛球腔菌属。无性态为大斑病突脐蠕孢 半知菌类突脐蠕孢属,病原物有性态为异旋孢腔菌，子囊菌亚门，旋孢腔菌属，不常见，无性态为玉蜀黍双极蠕孢，半知菌类双极蠕孢属。,坏死霉状物,坏死温湿度适宜时病斑上可产生灰色霉状物或散生黑色刺状物,病原物甘薯长喙壳，子囊菌亚门长喙壳属,有性态为瓜亡革菌，担子菌亚门亡革菌属。无性态为茄丝核菌，半知菌亚门丝核菌属,坏死丝状物,坏死黑色点状物（分生孢子盘）、桔红色粘状物（分生孢子团）,有性态为围小丛壳，子囊菌亚门小丛壳属，自然条件下很少发生，无性态为胶孢炭疽菌 半知菌亚门炭疽菌属,棉花疫病病菌：苎麻疫霉，半知菌亚门疫霉属。棉花红腐病病菌：串珠镰孢和禾谷镰孢等，半知菌亚门镰孢属。棉花红粉病病菌：粉红聚端孢，半知菌亚门聚端孢属。棉花曲霉病菌：黄曲霉、烟曲霉、黑曲霉，均属半知菌亚门真菌,疫病腐烂霉状物白色、疏松,红粉病腐烂霉状物粉红色、厚、疏松,红腐病腐烂霉状物粉红色、薄、致密,曲霉病腐烂粉状物霉状物,实验四、茶树病害主要病原物形态观察,材料与设备,（一）材料 病害新鲜材料、标本、挂图，病原菌玻片、多媒体课件等。(二)设备 显微镜、扩大镜、载玻片、盖玻片、镊子、挑针、解剖刀、小剪刀、培养皿、贮水小滴瓶、乳酚油滴瓶、新刀片、毛笔等。,实验内容,（一）鞭毛菌观察1、游动孢子的观察 取一清洁凹载玻片，丁凹心处四周涂少量凡士林油备用；另取一张清洁盖玻片放平，在其中央滴加1滴蒸馏水，用解剖刀从霜霉病新鲜材料叶背面刮取新形成的孢子囊，置于盖玻片的小水滴中；接着将盖片翻转过来，轻轻放在凹玻片上，使盖片边缘与凹心周围的凡士林粘合，以防水滴蒸发，然后将玻片平放在培养皿内，于20左右的温度下经30min培养后镜检，即可看到游动孢子的形成。2、卵孢子观察 任取一种霜霉病的病斑枯死组织，剪成3-4mm见方的小块放在小试管内，随即滴入15KOH溶液(或加乳酚油亦可)于酒精灯上加热透明至枯死组织脱去黄褐色为止，冷却后取一小片病组织放在载玻片中央，滴一滴蒸馏水或乳酚油，加盖玻片镜检组织内的卵孢子。3、孢囊梗和孢子囊的观察 用挑针挑取瓜果腐霉菌的絮状菌丝体于载玻片水滴中，加盖玻片制成临时装片进行镜检，观察菌丝体、孢囊梗与孢子囊。也可用解剖刀从霜霉病材料背面剖取霉状物，制成临时装片观察孢囊梗和孢子囊。,（二）接合菌的观察,1、营养体和无性繁殖体观察 用丛根霉菌体材料，用挑针挑取孢子囊呈白色和黑色的分别制成临时装片，镜检比较其区别，注意匍匐菌丝有无分隔、假根形态、孢囊梗着生部位，黑色孢子囊破裂后，散出孢囊孢子形态、大小、色泽。2、接合孢子观察 镜检根霉菌接合孢子装片。,（三）子囊菌观察,1、子囊菌菌丝体及无性孢子观察 挑取白粉病病叶表面的白色粉霉状物制片，置显微镜下观察，注意菌丝有无分隔，分生孢子梗形态及分生孢子着生情况。观察白粉病病菌菌丝伸入寄主组织的吸器。2、子囊菌有性孢子及子实体观察 观察白粉菌的闭囊果挑取白粉病病叶表面的黑色小颗粒制片，在低倍镜下观察闭囊果的形态、颜色。用挑针在闭囊果上方的盖玻片上轻压，挤出闭囊果中的子囊；观察白粉病菌闭囊果内子囊的数目。3、观察小麦赤霉病子囊壳形状及着生情况及其内子囊着生情况(示范)。4、观察子囊盘形状及着生情况（示范）。,（四）担子菌观察,1、锈菌冬孢子萌发的观察 结合当地情况任选一种冬孢子萌发材料(如桧柏上梨胶锈菌的冬孢子角)，用挑针挑取萌发的冬孢子少许，制成临时装片镜检，观察担子的分隔，担孢子的数目及形态特征。2、夏孢子堆的观察 任选一种夏孢子堆尚未破裂的小麦秆锈，叶锈或条锈病材料，制成临时装片镜检。3、冬孢子的形态观察 取麦类锈病、蚕豆锈病或菜豆锈病带冬孢子堆的材料，用解剖刀刮取冬孢子制片进行观察。4、担子菌大型子实体观察，观察木耳、灵芝及蘑菇的外部形态。,（五）半知菌的观察,1.观察茶轮斑病病叶的症状特点，注意病部的黑色小粒的着生情况，用挑针或用刀片切取小黑粒，在镜下观察，注意分生孢子形状、大小及颜色。2.观察黑腐病病菌的菌丝分枝角度和分枝交界处的缢束现象。3.病组织内菌体观察，为了能真切地看清菌体，除用切片法观察外，有的材料需要进行透明而后观察，较常用的透明方法是水合氯醛法。,（六）细菌基本形态的观察取纽菌三种形态的装片镜检。,革兰氏染色反应的观察（1）涂片 取两块清洁的载玻片平放桌面上各滴加l滴无菌水，用接种环分别从新鲜材料溢脓处和菌种中挑取少量细菌，涂成菌膜。（2）固定 将涂片在酒精灯火焰上方通过数次，使菌膜干燥固定。（3）染色(1)在菌膜上加1滴结晶紫液染色1min；(2)用洗瓶把多余的结晶紫液轻轻冲去，加碘液冲去残水；(3)再加1滴碘液媒染1min；(4)再水洗去碘液，滤纸吸去多余水分；（4）滴加95酒精，脱色20-30s。；(6)用水洗去酒精，滤纸吸干后再以藏花红复染0.51min；(7)用水洗去复染剂，吸干备用。（5）镜检从低倍镜到高倍镜，细菌被染成蓝紫色，为革兰氏染色阳性反应，红色为阴性反应。（6）细菌的鞭毛观察用示范片供镜检。,（七）线虫的观察,取花生根线虫或茶苗根结线虫病材料，以挑针轻轻挑开根结，小心挑取乳白色小颗粒状物，置于载玻片中镜检，观察呈梨形的雌虫的特征；另将虫瘿用挑针压碎，注意找出呈线状的雄虫，观察其特征。,（八）寄生性种子植物的观察,观察所给寄生性种子植物的标本，注意其特征。,作业,1.绘霜霉病菌形态图。2.绘根霉菌匍匐菌丝、假根、孢子囊、孢囊梗、孢囊孢子及接合孢子的形态图。3.绘子囊壳、子囊盘、子囊和子囊孢子形态图。4.绘散生的分生孢子及分生孢子梗、分生孢子盘及分生孢子器的形态图。5.绘一种细菌形态及鞭毛着生位置图。6.绘茶苗根结线虫雌、雄成虫形态图。,孢囊梗二叉状锐角分枝，末端尖细，萌发形成芽管。白菜霜霉病-霜霉属,孢子囊梗主干单轴分枝，然后作2-3回不完全对称的二叉状锐角分枝，末端尖细。黄瓜霜霉病-假霜霉属,孢囊梗二叉状锐角分枝，末端膨大呈盘状。莴苣霜霉病盘梗霉属,孢囊梗单轴直角分枝，分枝末端平钝。葡萄霜霉病单轴霉属,甘薯软腐病根霉菌形态图结合菌亚门黑根霉属,马铃薯晚疫病鞭毛菌疫霉属,甘薯黑疤病子囊菌长喙壳属,烟草白粉病子囊菌白粉菌属,小麦白粉病子囊菌布氏白粉菌属,瓜类白粉病单丝壳属,苹果白粉病叉丝单囊壳属,葡萄白粉病钩丝壳属,梨树白粉病球针壳属,辣椒炭疽病半知菌炭疽菌属,芹菜枯斑病半知菌壳针孢属,实验八 茶树叶部病害的识别,一、实验目的掌握与认识茶树叶片受不同的病原真菌侵害后，表现出来的症状和病原物的形态特征。二、内容说明茶树叶部的病害种类很多，较常见的有茶饼病、云纹叶枯病、轮斑病等10多种，通过本实验，应该对这10多种病害有所认识。三、材料与设备（一）材料 茶饼病、网饼病、白星病、圆赤星病、云纹叶枯病、轮斑病、炭疽病、茶赤叶斑病、褐色叶斑病、煤病、藻斑病等蜡叶标本，新鲜材料，病原菌封片。（二）设备 显微镜、载玻片、盖玻片、手持扩大镜、蒸馏水、挑针。,四、步骤及方法,（一）茶饼病的观察 1、症状 取茶饼病标本观察。叶片初生淡黄色水渍状病斑，圆形凹陷，相应的背面突起呈馒头状，表面有白色粉霉，后变暗褐色，叶片畸形扭曲。芽和枝梢受害，肥肿呈瘤状，生灰白色粉状物。2、病原 属担子菌。取新鲜病叶，刮取病斑子实层装片镜检，注意观察棍棒状或圆筒状的担子，顶端有24个小梗，每个小梗上着生一个担孢子；担孢子肾脏形或椭圆形，无色，初为单孢，萌发时产生一个隔膜而成双胞。（二）茶网饼病的观察 请用网饼病材料跟茶饼病进行对比，注意发病部位、病斑色泽、形状、病原菌的差异情况。,（三）茶云纹叶枯病的观察 1、症状病斑发生在叶尖或叶缘部分，近圆形或不规则形，淡绿致褐色，后变灰白色，形成浓淡相间的云纹状，其边缘暗褐色，有不明显轮纹，黑色小点散生或轮状排列。2、病原有无性世代和有性世代，注意观察之，可取新鲜材料，徒手切片后制成临时装片镜检，观察子囊盘、子囊、子囊孢子或分生孢子盘、分生孢子等形态特征。（四）茶炭疽病的观察 1、症状 初在叶尖或叶缘部分产生水渍状暗绿色症斑，扩大后可蔓延至叶片一半，由焦黄色变成黄褐色至红褐色；病斑边缘有黄褐色隆起线，与健部分界明显，后期病部生有细小黑点。2病原 属半知菌、盘圆孢属，取炭疽病材料徒手切片后制片镜检。,（五）轮斑病的观察 1、症状先由叶尖或叶缘产生边缘不明显的黄褐色小点，以后渐扩大成近圆形，半球形或不规则形大斑；色泽由褐色发展成灰白色，具有同心轮纹，病斑上小黑点也呈同心轮纹排列，病部与健部分界明显。2、病原属半知菌，取病部小黑点装片镜检，观察分生孢子盘、分生孢子梗、分生孢子形状，注意分生孢子有多少隔膜，分成几个细胞，有无附属丝。（六）茶白星与圆赤星病将两者发病材料进行对比，注意发病部位、病斑大小、颜色、病征的区别。从病部刮取或切片装片进行镜检，观察病原菌形态。,（七）赤叶斑病与褐色叶斑病观察两者病叶，注意病斑发生的部位、形状、颜色、病征特点。将褐色叶斑病病叶上的灰色霉层制片镜检。将赤叶斑病病斑上小黑点用徒手切片装片镜检。（八）茶藻斑病 症状：叶的正反面均可表现症状，但以叶面为主。初为黄褐色针头状小圆点，后呈放射状向四周扩散，形成近圆形灰绿色毛毡状物，稍隆起且具纤维状纹理。病原：属藻类，病部的毛毡状物是藻类的营养体和繁殖体。刮取毛毡状物装片镜检，观察孢囊梗和游动孢子囊及游动孢子。,（九）茶煤病 症状：叶片或枝干上初生圆形或不规则形小霉斑，后扩大布满全叶或枝干上。病原：观察玻片标本。（十）茶芽枯病 症状：发生于嫩梢芽叶上，叶尖、叶缘、芽尖呈现黄褐色、枯焦状、萎缩、扭曲，后期病害表面散生细小黑色小点。病原：属半知菌。取新鲜材料，挑取病部小黑点，用刀片切成薄片，装片镜检，观察其分孢器，分生孢子。,五、作业,1、绘云纹叶枯病病菌形态图。2、绘茶轮斑病病菌形态图。,轮斑病-1分生孢子盘2.分生孢子,1,2,云纹叶枯病1、分生孢子盘2、局部放大3、子囊果4、子囊、子囊孢子,实验九茶树枝干病害与根部病害的识别,一、实验目的 认识茶树上一些典型的茎，枝干病害和根部病害，掌握其病状、症征。二、内容说明 茶树枝干上发生的病害大致分三种类型，一为既侵害枝干，又为害叶的，枝叶同时受害。二为单独在枝干上发生；三为寄生或附生于枝干的种子植物。而引起茶树根部发病的病原有细菌、线虫和各种真菌，苗期以根线虫和根癌肿较普遍和严重，热带地区红根腐是一种多发病害。本实验选取常见的，较为重要的枝干病害与根部病害进行观察。三、材料与设备（一）材料：茶树病害标本与新鲜材料，病原菌封片，挂图、多媒体课件等。（二）设备显微镜、手持扩大镜、挑针、解剖刀、剪、刀片、载玻片、盖玻片、蒸馏水、搪瓷盘等。,枝梢黑点病症状：在当年生半木质化新梢上，呈现不正形灰色斑块，病健部分界不明显后期病斑表面散生椭圆形黑色小点。病原：属子囊菌，将材料针对有小黑点处用徒手切片，切取薄片装片镜检，观察其子囊盘、子囊和8个内生的子囊孢子。（三）茶立枯病症状：发生于枝干的病斑近圆形或椭圆形，略凹陷、褐色，具明显的褐色边缘，后期病斑表面散生黑色小黑点。病原：切取小黑点，作徒手切片，制成临时装片，镜检。子囊壳生在子座内，扁球形，子囊棍棒状或圆筒状，内有8个长棍棒状的子囊孢子。（四）粗皮病症状：发生于老茶树下部枝干上，病部灰绿色，表面散生许多灰黑色圆形小突起，后突破表皮，表面较粗糙，近黑色。病原：在病斑黑色突起部分切取一小块，作徒手切片，装片镜检，观察子囊盘，子囊、侧丝和子囊孢子,茶黑痣病取发病材料，观察其症状、病原，注意与茶立枯病及粗皮病比较。（六）黑腐病与线腐病观察两种黑腐病的蜡叶标本，注意其症状的异同。用示范片观察两种黑腐病的菌丝、担子、担孢子和菌核黑腐病的菌核。观察与比较寄生性线腐与附生性线腐的症状区别。观察附生性线腐病的子实体液浸标本。（七）茶膏药病病原菌寄生在茶树枝干上的介壳虫分泌物上，常常先产生白色绵毛状物，不久中央现暗色，以后以暗色部分为中心，向四周伸出有光泽的丝状物，很象贴上去的膏药，膏药呈圆形，中央稍厚，周围薄，颜色渐变为紫褐色至紫黑色。（八）茶毛发病观察枝干上缠绕着许多散乱无序的漆黑色毛发状物，此即为病原菌的菌丝索。（九）胴枯病症状：病害发生在当年生枝条上，在半木质化的红棕色枝干的近基部形成褐色近椭圆形病斑，略凹陷，生上小黑点，严重时上部枝干枯死。病原：用示范片观察其分生孢子器，分生孢子梗和分生孢子。,（十）菟丝子菟丝子为一年生攀藤寄生性种子植物，没有根和叶，叶片退化成鳞片状，茎线状，黄或微红色，花黄白色，蒴果褐色、有棱角。注意观察吸盘。（十一）苔藓和地衣观察植物体黄至绿色，苔状或丝状，平覆或直立于枝干上，质地松软，为苔藓类。地衣呈壳状紧贴于枝干上。质地较硬脆。（十二）茶苗根结线虫病病状：观察茶苗根结线虫引起的病株的地上部和地下部表现。病原：在玻片上滴一滴水，将根部的瘤放人，用解剖针慢慢撕开或用小刀将其压碎在显微镜下观察，找出线状的雄虫和呈梨形的雌虫。（十三）茶苗根癌肿病症状：观察扦插苗根部受害后的癌肿病状表现。病原：用示范玻片观察病原细菌。（十四）紫纹羽病症状：观察根部、根颈处，细根、粗根的表现，注意其上布满的紫褐色丝状物和颗粒状的菌核，茎基部有较厚的紫红色的毛毡状菌丝层。病原：观察示范玻片。,（十五）茶红根腐病症状：病树突然死亡，凋萎的叶片仍附着在树上一个时期（可用现场拍摄的图片显示之），病根最明显的特征是根表有枣红色的菌膜，树皮与木质部间产生一些白色的菌丝薄膜。病原：用示范片观察（十六）其他根腐病的观察 观察褐根腐、黑纹根腐、臭根腐、白纹羽病、茶苗白绢病等几种根病，注意其症状表现有何区别。,五、作业,1、绘红锈藻病病原藻形态图。2、描述根结线虫病的地上、地下部症状，绘茶苗根结线虫雌、雄线虫图。,1地下根部：形成肿瘤,形似黄豆、菜籽等，且大小不一，受害根系无须根，畸形，2地上部分：生长不良，植株矮小，生长衰弱，叶片发黄，干旱季节叶片易大量脱落而枯死。,实验一 9月18日实验二 9月25日实验三 10月15日实验四 11月5日实验五 12月2日实验六 12月4日实验七 12月9日实验八 12月24日实验九 12月31日,