组织学与胚胎学histologyandembryology.ppt

组织学与胚胎学(histology and embryology),上篇,组织学,第1章 组织学绪论,目的要求 1、掌握嗜酸性、嗜碱性、电子密度高、电子密度低等概念。2、熟悉组织学与胚胎学的基本研究方法。3、了解组织学与胚胎学的范围、内容和其 它研究方法。4、了解组织学与胚胎学的发展。,组织学（histology）：研究机体微细结 构及其相关功能的科学。它是以显微镜观察组织切片为基本方法，又称显微解剖学。,一、定义：,二、内容：,1、基本组织（总论）：,2、器官、系统（各论）：,细 胞 组织 器官 系统细胞外基质,三、组织学常用计量单位,mm=1000m，m=1000 nm,四、组织学研究方法,（一）一般光学显微镜术（简称光镜，LM)镜下结构称光镜结构，放大倍数1500倍，分辨率0.2m，观察时，须将组织制成薄片，以利光线通过。,石蜡切片-最常用制片过程：1、取材 2、固定 3、脱水 4、透明 5、浸蜡包埋 6、切片：57微米厚度 7、展片 8、脱蜡 9、染色 10、脱水 11、封片,还有冰冻切片（酶组织化学染色），涂片（血液），铺片（疏松结缔组织），磨片（牙和骨）等制作切片的方法。,染色：是用染料使无色组织切片着色，增加对比度，便于镜下观察。染色方法很多，但没有一种能使细胞全部结构同时着色。常用酸性染料（伊红、坚固绿、橙黄G），碱性染料（苏木精、亚申蓝、甲苯胺蓝、碱性品红）、硝酸银等进行染色。最常用:,H.E,1、嗜碱性：细胞和组织的酸性物质或结构与碱性染料（如苏木精）亲合力强，称嗜碱性。2、嗜酸性：碱性物质或结构与酸性染料（如伊红）亲 合力强，称嗜酸性。3、中性：若与两种染料的亲合力均不强的。4、亲银性：银染法中有些组织结构可直接使硝酸银还 原而显示，称此为亲银性。5、嗜银性：有些结构无直接还原作用，需加入还原剂 方能显色，称此为嗜银性。,名词：,（二）电子显微镜术（简称电镜，EM）镜下结构称超微结构，可放大几万倍至几十万倍。,1、透射电镜：观察组织、细胞内部超微结构。分辨率0.2nm。标本制备：1、固定（戊二醛等）2、包埋（环氧树脂）3、切片（50-80nm)4、染色（醋酸铀和柠檬酸铅等重金属盐）标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。电子密度高、电子密度低：被重金属浸染呈黑色的结构，称电子密度高；反之，浅染的部分称电子密度低。,2、扫描电镜：用于观察组织表面的立体结构。分辨率5-7nm,（三）组织化学术,为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术相结合而产生的技术，能在组织切片定性、定位地显示某种物质的存在与否、以及分布状态。一般组织化学术：主要显示糖类(如PAS反应)、脂类、核酸和酶类。免疫组织化学术：应用标记的特异性抗体和组织中相应的肽或蛋白质结合，然后通过显微镜观察标记物，而获知该肽或蛋白质的分布部位及相对含量。此法特异性强，敏感度高，应用广泛。原位杂交术：即核酸分子杂交组织化学术，用于检测基因(DNA片段)的有无、及在转录水平检测基因的活性(mRNA)。,（四）放射自显影术,通过活细胞对放射性核素或其标记的物质的摄入，以显示该细胞的功能状态、或该物质在组织和细胞内的代谢过程。（五）图像分析术 应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织和细胞内各种有形成分的数量、体积、表面积等参数。根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，可以获得组织微细结构的立体模型，这部分内容称体视学。,（六）细胞培养术和组织工程,细胞培养术：是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。组织工程：是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。组织工程研究包括四个方面：生长旺盛的细胞，也称种子细胞；细胞外基质，可用生物材料(如牛胶原)和无毒、可被机体吸收的人工合成高分子材料；构建组织或器官，即把细胞置于细胞外基质中进行三维培养、并形成所需要的形状；将构建物移植机体的方法。,五、组织学学习要点,1、平面与立体 的关系 2、结构与功能的联系3、静态与动态的关系4、分析比较，纵横联系,思考题,组织学的主要研究内容是什么？组织和器官分别是如何构成的？人体有哪几种基本组织？何谓嗜碱性、嗜酸性、中性、电子密度高、电子密度低？组织学有哪些常用方法和技术？,