移液器的使用.ppt

中国动物疫病预防控制中心下属企业北京世纪元亨动物防疫技术有限公司哈尔滨元亨生物药业有限公司（生产基地）,移液器的使用方法和日常保养,孙博,移液器工作原理：,常规的移液器技术规格,准确性通常+/-1%重复性通常 0.25%到 0.33%一般情况下，微量移液器要稍差一些,准确性和重复性都差,准确性差但重复性高,准确性好而且重复性高,移液操作循环,排液及吹液,不规范的移液操作可能带来0.1%到5%的移液误差，甚至更高！,移液操作相关技术,量程优化吸头浸入吸液排液一致性及手温影响,误差的影响,超过1的误差所有操作者都需要注意 0.6%-1%的误差一般操作者视实验的要求自行注意小于 0.5%的误差校准操作者需要避免所有可能的误差,最佳的量程,通常的量程：一般在 10%-100%量程范围内可以操作在 10%量程操作需要较高的操作技巧最佳的量程：选择35%-100%量程范围进行操作对操作技巧依赖更少保证移液的准确性和精度,10%,100%,35%,选择合适的量程，可提高1%移液准确性！,量程设定,移液器量程的设定原则：由大到小！当由小量程到大量程时：朝所需量程方向连贯旋转旋转到达超过所需量程1/3圈处回调到所需量程处在量程设定过程中,不要将旋钮旋出最大量程,否则可能会卡住内部机械装置而损坏了移液器,正确的量程设定可以提高0.5%的移液准确性！,吸头浸入角度,正确的吸头浸入角度,错误的吸头浸入角度,以正确角度进行吸液操作可提高0.5%的移液准确性(微量程移液器可达 2.5%),吸头浸入深度,以正确吸头浸入深度进行吸液操作可提高1%的移液准确性(微量程移液器可达 5%),深度,吸头浸入时间(针对大容量移液器),吸液后保持吸头浸入液面最少1秒将吸头平缓移开液面对吸取大容量样品或者高粘度样品尤为重要,吸液：润洗吸头,用同一样品对吸头进行润洗先吸取样品，然后排回样品池或废液槽润洗有助于提高吸头多次相同移液操作的一致性,润洗吸头可提高0.5%的移液准确性!,无润洗,无润洗移取冷冻样品(例如 冰浴样品)移取高温样品(37oC)可以考虑使用活塞外置式移液器,当样品温度很高或者很低时，切勿润洗吸头！,吸液速度的影响,保持平顺，控制好吸液速度过快的吸液速度，导致：样品液进入套柄对活塞和密封圈造成损伤带入气雾造成样品交叉污染,不正确的吸液速度会导致至少5%的准确性下降！,排液,常规排液操作沿内壁排液（常规）,正确的排液技术提高1的移液准确性,排液,常规排液操作在液面上方排液,排液,常规排液操作在液面下方排液,一致性,应保持吸液和排液节奏的一致性。按压或释放按钮的速度平稳一致。到达第一停止点的用力应保持一致。吸头的浸入深度保持一致。移液器倾斜角度一致达到最好的操作一致性使用电动移液器，只需很少的人为操作,操作的一致性可提高1的移液准确性,手温的影响,手温对移液误差的影响可以达到0.2%以上,小结：,正确的吸头安装方法,常见的错误安装方法在将吸头套上移液器时，使劲地在吸头盒上敲几下。可能导致地后果1.移液器的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。2.移液器套柄弯曲正确的吸头安装方法:单道移液器：移液器垂直插入吸头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合,如何防止液体进入套柄,利用带滤芯的吸头，它有内部疏水过滤器，避免气雾和液体进入套柄。当吸头中有液体时，不要颠倒或平放移液器。缓慢吸液，握住移液器保持垂直或20度以内倾角。量程在5ml和5ml以上的移液器，配合使用厂家提供的专用安全过滤器。,移液器正确的放置方法,1.如不使用，要把移液器的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态 以保护弹簧 2.使用完毕，尽量将其竖直挂在移液枪架或挂钩上，但要小心别掉下来。这种保管方式可以延长移液器的使用寿命.,定期测漏和校准,定期检查是否有漏液现象。简易的方法如下：吸取液体后将移液器垂直放置在枪架上，静止15秒，观察吸头顶端是否有液滴如果漏液，原因大致有一下几方面：1、吸头是否匹配；2、密封系统是否正常；3、如果是易挥发的液体（许多有机溶剂都如此），则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体，然后再移液。比较专业的方法是使用瑞宁公司的测漏仪。由厂家或专业机构提供定期的较准，通常一年一到两次,高粘度样品移液的窍门:反向模式移液,适用于高粘度样品不适用于水溶液同常规移液操作相反的流程第二零点吸液第一零点排液,移液器的维护保养,敬请批评指正！,