负荷尿中维生素B1的测定荧光法.ppt

负荷尿中维生素B1的测定-荧光法,营养学系 李 丹,目 的,水溶性维生素在机体内存留时间短，满足机体需要后，多余的部分迅速从尿中排出，因此不易发生中毒情况，但长期供给不足时，很快会出现缺乏症状。而当日常摄入量达不到机体需要量时，摄入维生素制剂将首先留在体内满足机体需要，从而尿中排出量较少，反之亦然。因此，可由尿中排出的维生素量来判断体内水溶性维生素的营养水平。,评价标准,清晨排空小便后，空腹口服维生素B1 5mg，根据季节饮水200500ml左右，收集服药后4h内所有尿液，并在尿瓶中加入1g左右草酸，使尿液PH值保持在35，以防止维生素B1降解。用量筒量取尿液总体积并记录，做好标记后于4短时保存或-20长期保存。,评价标准,原 理,维生素B1 硫色素（噻嘧色素）,K3Fe(CN)6,碱性,420nm：K=F/C,步 骤,收集负荷尿加样操作 测定荧光强度,结果计算,注意事项,尿液加草酸后保存，并做好标记。不稳定试剂如维生素B1标准应用液、碱性K3Fe(CN)6等现用现配并避光。操作过程避光、迅速。萃取时要振荡均匀，分层后吸取水层时要有耐心。注意荧光光度计的正确使用，读值顺序为CBA。比色皿四面用擦镜纸擦拭干净，并禁用手触摸。所有玻璃器材需浸酸处理，以消除荧光物质干扰。称取K3Fe(CN)6时禁用金属匙，以防治金属物质干扰，另外K3Fe(CN)6与亚铁盐会生成蓝色沉淀。,