末梢血细胞形态学检查.ppt
血细胞涂片检查的内容和注意事项,2012年6月,血细胞涂片自身的特点：1涂片不易均匀：由于血液是混悬液，其中白细 胞、有核细胞、RBC、血小板的形态大小、比 重及生物活性和血浆成分等的不同和制片技术差 异、质量分布不均匀性差异颇大。2细胞分布和检查的非随机性：(1)细胞分类标准与观念不一；(2)采样和计数100200个白细胞的局限性；(3)细胞分布的生理变动；3.与疾病的相关性；4.室内、室间分类不一致性，开展室间质控也是促进形态学提高重要手段,外周血涂片检查及报告内容：1.WBC数及主要成分（即分类比例）；2.分类细胞比例及形态是否正常；3.有无幼稚白细胞、幼红细胞及异常细胞情况；4.成熟红细胞形态（包括个体与群体、大小形态、异形）、色素状态（中心淡染、低色素、高色素、多嗜性RBC）核残余物及排列等情况；5.血小板数量、形态、聚集性；6.异常细胞、寄生虫。,1.确诊白血病。2.贫血鉴别诊断的参考依据。3.了解疾病感染的程度。4.遗传性疾病的血液依据。5.提示血小板疾病。6.诊断血液寄生虫病7.血液分析仪质量的监控。,形态学检查的重要意义,染色：是识别细胞形态的重要标记工序：常规瑞氏-姬姆萨染色要点：1要得到满意、漂亮的血细胞染色标本，新鲜涂片迅速染色是很重要的。2染色液配制要合格；3涂片切勿用甲醛固定（肝素抗凝），否则不着色；4染色的好坏与染色液、缓冲液的质量及比例、加液间隔时间、保持玻片染色液面的张力等染色技巧均有重大关系。染液要覆盖涂膜面，再加缓冲液（1:2），其量要充足、混均，染色时间要充足。,一、白细胞检查意义1.机体被感染的病因及感染程度。2.血液系统恶性疾病的诊断核疗效评估。3.某些遗传性疾病的诊断。如梅-罕氏综合征二、红细胞检查的意义贫血的鉴别诊断为某些疾病诊断提供依据。如MM、DIC、骨纤等为疟疾诊断提供重要依据。三、血小板检查意义血小板疾病的诊断。验证血小板计数的准确程度,WBC形态学诊断技巧：1WBC数值准确性估计：（1）目前自动化计数仪时有出现结果的偏差，低倍镜观察血涂片可以粗略估WBC数值及分布。低倍视野WBC数：正常35个，增多6个以上，减低3个以下。（2）WBC如推至片尾，分布不均，估计将有一定难度。较大的细胞如单核、异淋及中性粒细胞及不成熟细胞多在片尾，体部则多为较小的淋巴细胞，使分类造成偏差，所以分类部位在适当调整。,2白细胞计数值限度分级：（1）WBC正常范围：4.010.0109/L;（2）WBC正常限度以下:轻度减少(10.020.0109/L),中度增多(20.040.0109/L),明显增多(40.080.0109/L)极度增多(80.0109/L)。以此与所测知WBC计数值作粗略对比，推断WBC计数值的准确性。有核红细胞单独计数：有核红细胞个/100个WBC,RBC形态学在检验中易被忽视，观察RBC形态,一般以外周血涂片较为可靠。RBC形态与排列（如重叠、缗钱状）与涂片技术、涂片部位及厚薄有很大关系。这点在镜检时应予注意。即是合格涂片，RBC形态依然与涂片部位及厚薄等多种因素有关：如取涂片中心区域，RBC中心淡染，多1/3细胞面积大小;取自涂片薄处或尾部，RBC形态误给人以“球形”，失去双凹盘形，中心淡染消失，所谓类球形改变；取厚片或制片干燥过慢，RBC未摊开，收缩变形，甚至出现人工中心染色过淡等；取厚片RBC则重叠堆积，呈假“缗钱状”，不便查清形态；玻片不清洁，油脂过多或骨髓脂肪过多，制片干燥不快，RBC则会形成人工的中心淡染区或空白区。,外周血血小板形态学诊断技巧：1血小板数:形态及聚集性,血涂片也是估计Plt计数主要依据。根据RBC正常500万/ul:Plt正常值1020万/ul=RBC:Plt=50:1(2)个，一个油镜视野RBC数约RBC200个：PLT48个，计数1020个油镜视野Plt数（分别计数正常和巨大异常Plt数）平均每个油镜视野Plt数如若4个相当于10万/ul；8个相当20万/ul;2个相当5万/ul;1个相当2.5万/ul。由于巨大和异常的PLT自动化的仪器不能计数，造成误差。,(一)：外周血涂片检查步骤：1肉眼观察：涂片面膜大小、厚薄是否适中，染色好坏。2低倍镜观察全貌：（1）涂片及染色是否合适；（2）了解白细胞数（可大体校对WBC直接计数是否正确）；（3）了解白细胞大致分布及其各阶段大致比例，特别要注意由于涂片过力，把WBC及成熟粒细胞大多推于片尾部位，造成分类比值误差。片尾有无异常细胞。（4）选择具有代表性的细胞镜检区域。,3油镜观察：进行WBC分类计数，观察细胞形态、比例、有无巨大或异常细胞。（1）血涂片对WBC总数准确性估计：从低倍及油镜中估计WBC数及其分布。一般区分WBC数几个等级（油镜视野中WBC密度、分散无重叠）。参见WBC形态诊断技巧节段。（2）白细胞分类计数：血中主要两大比例的中性成熟粒细胞与淋巴细胞及其他小比例细胞是否属正常范围及形态有无异常。（3）注意片尾端有无巨大或出现不成熟或异常细胞（如中晚幼粒、中晚幼红细胞、异常淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等）；（4）红细胞形态（群体、个体）、排列（重叠、缗钱状）；（5）血小板数量、形态及聚集性；（6）异常细胞、寄生虫。,
