血液常规检查操作规程.docx

血液常规检查操作规程1 .目的：检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白等的数量和质量，对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。2 .检测项目：全自动血液分析仪上测定血常规19项。包括：白细胞计数(WBC).中性粒细胞数(Neutff)淋巴细胞数(Lymph#)>中间细胞计数(MID#)、中性粒细胞比率(NeUt%)、淋巴细胞比率(LymPh%)、中间细胞比率(MID%)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、红细胞压积(Hct).红细胞平均体积(MeV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)>血小板压积(PCT)03 .原理：1.1 1血细胞(WBe.RBC.PLT)数量和体积检测原理：电阻抗法。1.2 2白细胞分类原理：电阻抗法。白细胞脉冲的大小是由被计数细胞在溶血素中大小决定的。1.3 血红蛋白测定：采用氟化高铁血红蛋白(HICV)比色法。1.4 RDW、MCH、MeV、MCHC>MPV>PCT、PDW为换算项目。1.5 HeT测定原理：血细胞产生的脉冲信号的峰值与RBC容积成正比。4 .仪器：厂商名：深圳迈瑞公司。型号：BC-5300；BC500厂商名：希森美康。型号：XS-800i5 .试剂：五分类血液分析仪配套试剂6 .标本的采集与运送6.1 标本类型：静脉血或手指末梢血。6.2 标本要求：标本用EDTA-K2抗凝；静脉血标本量应达到2ml；末梢血20lo6.3 标本运送：室温运送，4小时内完成检测。6.4 标本拒收标准：严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。7 .操作步骤：严格按照仪器标准操作规程操作8 .血细胞的显微镜检查（用于对仪器法结果可疑时的复核）9 .1镜检标准8.1.1 医生明确要求涂片镜检；8.1.2 仪器提示有原始或幼稚细胞、变异淋巴细胞、有核红细胞等异常需镜检；8.1.3 新生儿标本需涂片镜检；8.1.4 1.4WBC20×109L或W2.OX10"9L;8.1.5淋巴细胞245%,需做涂片镜检，1-4岁儿童且血细胞计数及他结果正常者除外；8.1.6单核细胞215%；8.1.7嗜酸性粒细胞210%；8.1.8嗜碱性粒细胞23%8.1.9PLT>500Xl（9L或V60×10'9L;8.2.0提示有PLT聚集，需涂片镜检；8.2镜检步骤8.2.1血涂片的制备8. 2.1.1在距载玻片一端Icm的位置滴加约5l的抗凝血；末梢血直接用干净玻片蘸取。9. 2.1.2用推片使血液沿其边缘展开，与载玻片3040度角进行推片。10. 2.1.3涂片完成后在空气中自燃晾干。11. 2.2血涂片的染色12. 2.2.1染色试剂：瑞氏染色液。13. 2.2.2染色步骤a.用蜡笔在血膜两头画线，然后将血涂片平放在染色架上。b.加瑞氏染液数滴，以覆盖整个血膜为宜，染色约1分钟。c.滴加约等量的缓冲液与染液混合，室温下染色5-10分钟。d.用流水冲去染液，待干燥后镜检。8. 2.2.3镜检观察要求a.将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好，否则重新涂片染色。b.选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠部分进行镜检。c.在高倍镜下辨认细胞不清楚时，必须待玻片干后用油镜观察。8 .2.2.4镜检观察的处理a.根据仪器报警提示的内容，确认镜下观察结果是否与仪器提示一致。b.发现原始及幼稚白细胞，则必须进行手工分类；如不能确定细胞种类，则报告异常细胞的比例。c.如果镜下发现有核红细胞，则必须对白细胞进行校正。d.如果镜下观察有血小板聚集，则必须手工冲池计数血小板；如果是EDTA.K2引起的血小板聚集，可用109InInOI/L枸椽酸钠抗凝剂采集标本，结果需要进行换算。e.多发性骨髓瘤、冷球蛋白血症引起的红细胞聚集，可将血液用仪器稀释液稀释3倍，然后37C水浴箱中10分钟后，立即上机检测，结果需要进行换算。9 .临床意义9. 1白细胞计数：9.1.1 生理性变化：白细胞计数结果有明显的生理性波动，如早晨较低，傍晚较高；餐后较餐前高；剧烈运动、情绪激动时较安静时偏高；月经期、妊娠、分娩、哺乳期亦可增高；新生儿及婴儿期明显高于成人。9.1.2 病理性增多，常见于：a.急生化脓性感染，尤其是革兰阳性球菌感染（脓肿、脑膜炎、肺炎、扁桃体炎、阑尾炎）b某些病毒性感染：传染性单核细胞增多症、流行性乙型脑炎等。c组织损伤：严重外伤、大手术、大面积烧伤、急性心肌梗死等。d急性大出血e白血病f恶性肿瘤：肝癌、胃癌、肺癌等。g病理性减少，见于：h某些感染性疾病，尤其是革兰氏阴性杆菌感染（伤寒、副伤寒等）。i某些病毒感染：流感、病毒性肝炎等。j某些原虫感染，如疟疾、黑热病等k某些血液病：再生隙碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、巨幼细胞贫血等。1自身免疫性疾病：SLE.An）S等。m脾功能亢进：门脉肝硬化n肿瘤化疗、放疗及某些药物（氯霉素、磺胺类药等）反应等。11.2 中性粒细胞：中性粒细胞增多分生理性和病理性增多。病理性增多可见于急性感染或炎症、急性失血、急性中毒及恶性肿瘤等；中性粒细胞减少可见于病毒感染、慢性理化损伤、自身免疫性疾病等。11.3 淋巴细胞：淋巴细胞病理性增多见于某些慢性感染、肾移植手术后、白血病、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等；淋巴细胞减少可见于接触放射线，应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素，严重化脓性感染等情况。11.4 红细胞和血红蛋白：a.减少见于：急、慢性红细胞丢失过多、红细胞寿命缩短、造血原料不足、骨髓造血功能减退等；11.5 见于：真性红细胞增多症，肺心病等。11.6 细胞比积：增高可见于大面积烧伤、脱水等血液浓缩情况；减低可见于贫血。11.7 细胞体积分布宽度（RDw）a.用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察，缺铁性贫血时RDW值增大，当给以铁剂治疗有效时RDW值一过性进一步增大，随后逐渐降到正常。b.对小细胞低色索性贫血的鉴别诊断.缺铁性贫血时RDW值增大而轻型海洋性贫血时RDW值正常。c.用于对贫血的分类（BaSSnIanMCV/RDW分类法），根据MCV、RDW值变化共分为6种类型贫血。类别MCVRDW正常-A缺铁性贫血t巨幼细胞性贫血tt溶血性贫血tt铁粒幼细胞贫血-At再生障碍性贫血单纯小细胞性贫血注：一无变化；t增大；I减少9.7MCWMCIkMCHC：这三个参数通常都用于各型贫血的诊断，具体应用如下表：贫血类型MCH(Pg)(82-100)MCV(fl)(27-34)MCHC(gD9316-354)常见原因及疾病大细胞性贫血升高升高正常叶酸、维生素B12缺乏或吸收障碍正常细胞性贫血正常正常正常急性失血、急性溶血单纯小细胞性贫血降低降低正常慢性炎症、尿毒症小细胞低色素性贫血降低降低降低铁缺乏、维生素B6缺乏、珠蛋白肽链合成障碍、慢性失血1. 8血小板：血小板数量病理性减低见于性白血病、再障、脾亢、血小板减少性紫瘢、败血症等；增高见于慢性白血病、真性红细胞增多症、急性化脓性感染、脾切除、溶血性贫血等。9. 9MPV：研究表明MPv的大小与PLT的多少呈非线性负相关，故在分析MPV的临床意义时应结合PLT的变化来考虑。a.鉴别血小板减少症的病因：骨髓损伤导致血小板减少时，MPV下降；当血小板在外周血中破坏增多导致血小板减少时，MPV增大；当血小板分布异常导致血小板减少时，MPV正常。bMPV增高可作为骨髓功能恢复的较早期指标。当骨髓功能衰竭时，MPv与PLT同时持续下降，骨髓抑制越严重，MPV越小，当骨髓功能恢复时，MPV值的增大先于PLT数值的增高。c.血栓前状态或血栓性疾病时MPV常增高。10. 0PCT的临床应用报道尚少。在血小板增多症、慢性粒细胞性白血病早期PCT常增大。11. 11PDW的增大可能与骨髓巨核细胞的倍体数增大等有关，其临床应用尚较少。10.注意事项：10.1 采血时，加入到抗凝管后，应注意充分混匀，避免血液凝固。混匀时，动作要轻，避免血液有形成分破坏。10.2 样本测定前，应注意充分混匀，方法如下：将血样瓶口朝上置于操作者双手掌心，双手来回搓动10次，动作要连贯。颠倒小瓶，使瓶口朝下，将血样置于操作者双手掌心,双手来回搓动10次。重复和步骤8次。轻轻颠倒混匀1分钟左右。10.3 为保证结果准确性，应做好仪器的保养和校准（见保养和校准程序）。10.4 仪器有报警提示或直方图有异常时，应进行手工方法复查。当WBOlO.0X109/L或<3.0X10*9/1时,应推片瑞氏染色，镜下复查白细胞分类、形态。当RB（X3.OX1（9L或PLT<50xl（9L时,应进行手工方法镜检复查。10.5 建议使用仪器配套的试剂。10. 6样本应在采血后2分钟至4小时内检测完成。12. 7血液与抗凝剂的比例要适当，Lnl血液用1.5-2.Omg的EDTA-K2抗凝。12.1 MlI）包括单核细胞、嗜酸细胞、嗜碱细胞、幼稚细胞；当MXD>13%时,应推片瑞氏染色，镜下复查白细胞分类、形态。12.2 失控处理：当出现失控现象时，按失控处理程序，寻找失控原因，并扣留该批检测结果，待查明失控原因并排除后重测样本，然后才发出报告。